| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-25页 |
| 1 实验材料 | 第25-31页 |
| ·相关细胞、菌株及辅助噬菌体 | 第25页 |
| ·本实验相关抗体和抗原 | 第25-26页 |
| ·用于HIV-1假病毒包装的相关质粒 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27-28页 |
| ·常用溶液和培养基 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-48页 |
| ·Y498抗体的基因序列分析 | 第31页 |
| ·Fab Y498的表达及纯化 | 第31-32页 |
| ·ELISA检测Fab Y498交叉反应活性 | 第32页 |
| ·Fab Y498的中和活性检测 | 第32-33页 |
| ·Y498全分子IgG表达载体的构建 | 第33-35页 |
| ·Y498(Y498 IgG)的表达及纯化 | 第35页 |
| ·ELISA检测抗体Y498交叉反应活性 | 第35-36页 |
| ·表面质子共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)实验 | 第36-37页 |
| ·Y498与去构象HIV-1 gp120的结合反应 | 第37页 |
| ·竞争ELISA(Competition ELISA) | 第37-38页 |
| ·HIV-1假病毒的制备 | 第38页 |
| ·基于HIV-1假病毒的中和实验 | 第38-39页 |
| ·Y498的同源建模和分子对接 | 第39-41页 |
| ·噬菌体表面展示肽库筛选Y498所识别的模拟肽 | 第41-44页 |
| ·预测Y498所识别的表位 | 第44-45页 |
| ·点突变分析预测的Y498结合位点 | 第45-46页 |
| ·Capture ELISA检测Y498的识别表位 | 第46-47页 |
| ·Y498对筛选到的点突变进行中和反应 | 第47页 |
| ·Y498所识别表位的结构展示及分析 | 第47-48页 |
| 3 实验结果 | 第48-69页 |
| ·Y498可变区序列分析 | 第48-49页 |
| ·Fab Y498抗体的Ni柱亲和纯化 | 第49页 |
| ·Fab Y498反应活性的检测 | 第49-50页 |
| ·Fab Y498抗体中和活性的鉴定 | 第50-51页 |
| ·Y498(Y498IgG)的载体构建 | 第51页 |
| ·Y498的结合反应 | 第51-52页 |
| ·Y498的表达纯化 | 第52页 |
| ·Y498的交叉反应 | 第52-53页 |
| ·表面等离子共振(SPR实验) | 第53-54页 |
| ·Y498IgG具有广谱的中和活性 | 第54-58页 |
| ·Y498识别位于gp120上的CD4结合区域的构象表位 | 第58-60页 |
| ·Y498的生物信息学分析 | 第60-63页 |
| ·Y498的表位筛选和预测 | 第63-64页 |
| ·突变对入侵能力的影响 | 第64页 |
| ·突变对结合能力的影响 | 第64-65页 |
| ·Y498对突变体的中和耐受 | 第65-67页 |
| ·Y498识别表位的结构展示 | 第67-69页 |
| 4 讨论 | 第69-73页 |
| 小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 综述 | 第81-89页 |
| 参考文献 | 第86-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 个人简历 | 第90页 |
