| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1. 前言 | 第12-27页 |
| ·研究问题的由来 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-26页 |
| ·体细胞核移植 | 第13-14页 |
| ·小鼠体细胞核移植 | 第14-15页 |
| ·体细胞核移植效率低的原因 | 第15-16页 |
| ·表观重编程研究概况 | 第16-17页 |
| ·正常发育过程中的表观重编程 | 第17-20页 |
| ·DNA甲基化的作用和机制 | 第20-26页 |
| ·研究目的与意义 | 第26-27页 |
| 2. 材料和方法 | 第27-45页 |
| ·本研究的技术路线 | 第27页 |
| ·主要实验材料 | 第27-33页 |
| ·实验细胞 | 第27-28页 |
| ·主要试剂、试剂盒、抗体 | 第28-29页 |
| ·主要试剂的配制 | 第29-31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·引物及siRNA列表 | 第32页 |
| ·主要生物学数据库网站 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-45页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的分离和培养 | 第33-34页 |
| ·MEFs的siRNA转染 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量PCR（q-PCR） | 第35-39页 |
| ·WB检测蛋白表达 | 第39-41页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第41-42页 |
| ·细胞周期检测 | 第42-43页 |
| ·细胞基因组甲基化检测 | 第43-45页 |
| ·统计学方法 | 第45页 |
| 3. 结果与分析 | 第45-54页 |
| ·MEFs的siRNA转染 | 第45-46页 |
| ·小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）的培养 | 第45-46页 |
| ·转染效果 | 第46页 |
| ·q-PCR检测干扰后 24h Dnmt1、Dnmt3b mRNA表达情况 | 第46-48页 |
| ·PCR引物及退火温度的确定 | 第46-47页 |
| ·q-PCR检测mRNA水平干扰效果 | 第47-48页 |
| ·siRNA干扰对DNMT1 和DNMT3b蛋白影响 | 第48-50页 |
| ·q-PCR检测干扰后增殖相关基因PCNA mRNA水平 | 第50页 |
| ·细胞凋亡检测结果 | 第50-52页 |
| ·细胞周期检测结果 | 第52-53页 |
| ·基因组甲基化水平检测结果 | 第53-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-61页 |
| ·MEFs的siRNA转染 | 第54-56页 |
| ·siRNA干扰MEFs Dnmt1、Dnmt3b引起基因组甲基化变化 | 第56-58页 |
| ·敲低Dnmt1、Dnmt3b引起MEFs增殖、凋亡、周期变化 | 第58-61页 |
| 5. 小结 | 第61-62页 |
| ·本研究主要结论 | 第61页 |
| ·本研究的创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
