| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| ·MLL5蛋白及其功能 | 第9-10页 |
| ·蛋白O连接的糖基化及其功能 | 第10-12页 |
| ·泛素化与去泛素化酶 | 第12页 |
| ·研究内容 | 第12-14页 |
| 2 实验材料与方法 | 第14-37页 |
| ·实验材料 | 第14-20页 |
| ·菌株和细胞系 | 第14页 |
| ·质粒 | 第14-15页 |
| ·实验试剂 | 第15-16页 |
| ·抗体 | 第16-17页 |
| ·寡聚核苷酸链 | 第17-20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验耗材 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-37页 |
| ·质粒构建 | 第22-23页 |
| ·感受态细菌的制备及质粒转化 | 第23-24页 |
| ·质粒的大量制备 | 第24-25页 |
| ·细胞培养 | 第25页 |
| ·细胞转染 | 第25-26页 |
| ·慢病毒包装，感染及稳转细胞株的建立 | 第26-28页 |
| ·RNA抽提与反转录 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time q PCR) | 第29-30页 |
| ·免疫共沉淀（Co-IP）与蛋白印迹分析(WB) | 第30-32页 |
| ·免疫荧光染色（IF）和激光共聚焦(CLSM)分析 | 第32页 |
| ·His-Pull-down实验 | 第32-34页 |
| ·人宫颈癌组织的H&E染色和免疫组化 | 第34页 |
| ·细胞增殖与流式细胞分析细胞周期、细胞凋亡 | 第34-37页 |
| 3 实验结果 | 第37-56页 |
| ·OGT蛋白与MLL5蛋白相互结合 | 第37-39页 |
| ·在He La细胞系中稳定敲低OGT蛋白 | 第39-41页 |
| ·OGT能够稳定MLL5蛋白 | 第41-43页 |
| ·OGT通过抑制MLL5蛋白的泛素化，进而维持MLL5蛋白的稳定性 | 第43-45页 |
| ·通过质谱分析MLL5蛋白的翻译后修饰 | 第45-47页 |
| ·第440位苏氨酸糖基化修饰在维持MLL5蛋白稳定中的作用 | 第47-49页 |
| ·USP7蛋白与MLL5蛋白相结合 | 第49-51页 |
| ·USP7是MLL5蛋白的去泛素化酶，为维持MLL5蛋白的稳定所必需 | 第51-53页 |
| ·MLL5、OGT和USP7形成蛋白复合体 | 第53-54页 |
| ·在宫颈腺癌组织中，MLL5表达水平上调与USP7和OGT蛋白表达水平上调相一致 | 第54-55页 |
| ·USP7和OGT共同维持MLL5蛋白稳定的模型 | 第55-56页 |
| 4 总结和讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 缩略词表 | 第66-68页 |
| 攻读学位期间发表文章情况 | 第68-69页 |
| 文献综述 | 第69-87页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
