| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·真核生物启动子简介 | 第11-12页 |
| ·Ⅰ类启动子 | 第11页 |
| ·Ⅱ类启动子 | 第11-12页 |
| ·Ⅲ类启动子 | 第12页 |
| ·肌肉特异性启动子 | 第12-16页 |
| ·肌肉高效特异性启动子主要元件 | 第12-13页 |
| ·骨骼肌alpha-actin 启动子 | 第13-14页 |
| ·肌肉肌酸激酶启动子 | 第14-15页 |
| ·肌球蛋白轻链启动子 | 第15页 |
| ·合成启动子 | 第15-16页 |
| ·增强子 | 第16-17页 |
| ·增强子简介 | 第16-17页 |
| ·Ckm 基因增强子 | 第17页 |
| ·启动子的研究方法 | 第17-20页 |
| ·启动子的生物信息学分析与预测 | 第17-18页 |
| ·启动子的实验室研究方法 | 第18-19页 |
| ·研究启动子用的载体 | 第19-20页 |
| ·启动子研究的应用 | 第20-21页 |
| ·在转基因研究中的应用 | 第20页 |
| ·在进化研究中的应用 | 第20页 |
| ·在RNA 干扰载体中的应用 | 第20页 |
| ·促进生物信息学的发展 | 第20-21页 |
| ·在临床治疗中的应用 | 第21页 |
| ·研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·主要实验仪器 | 第22页 |
| ·主要实验材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-33页 |
| ·相关实验方法 | 第23-24页 |
| ·alpha-actin,Mylpf 和Ckm 5'调控序列的克隆及载体构建 | 第24-28页 |
| ·启动子的合成及载体构建 | 第28-31页 |
| ·重组质粒瞬时转染牛成肌细胞和成纤维细胞 | 第31-32页 |
| ·Dual-Luciferase(?)报告基因检测启动子活性 | 第32页 |
| ·启动子序列的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-42页 |
| ·启动子5'调控序列PCR 扩增结果 | 第33页 |
| ·阳性重组子的鉴定 | 第33-34页 |
| ·序列测定 | 第34-35页 |
| ·真核表达载体的鉴定 | 第35-36页 |
| ·alpha-actin、Mylpf 和Ckm 5'调控序列双萤光素酶检测 | 第36-37页 |
| ·合成启动子及增强子的双萤光素酶检测 | 第37-41页 |
| ·核心启动子82bp 和148bp 活性检测 | 第37页 |
| ·合成启动子活性检测 | 第37-38页 |
| ·增强子活性检测 | 第38-39页 |
| ·质粒pGL3-82-P-E 与pGL3-CMV 活性的比较 | 第39页 |
| ·质粒pGL3-82-P-E 与pGL3-148-P-E 转染成纤维细胞 | 第39-40页 |
| ·核心启动子及合成启动子转染成纤维细胞 | 第40-41页 |
| ·转录因子结合位点分析 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| ·基因获得 | 第42-43页 |
| ·载体选择 | 第43页 |
| ·转染方法的选择 | 第43页 |
| ·转染条件的选择 | 第43-44页 |
| ·alpha-actin,Mylpf 和Ckm 启动子的活性分析 | 第44页 |
| ·核心启动子的活性分析 | 第44-45页 |
| ·合成启动子的活性分析 | 第45页 |
| ·增强子的活性分析 | 第45页 |
| ·特异性的分析 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |
