| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 符号与缩略语说明 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-28页 |
| ·文献综述 | 第12-25页 |
| ·多环芳烃简介 | 第12-15页 |
| ·多环芳烃的微生物降解 | 第15-17页 |
| ·细菌降解PAHs的途径 | 第17-20页 |
| ·细菌降解PAHs的酶 | 第20-25页 |
| ·研究目的及意义 | 第25-26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 Sphingobium sp.strain FB3中降解荧蒽基因的克隆及序列分析 | 第28-45页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-33页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·培养基、药品与试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·Sphingobium sp. strain FB3的随机插入突变子文库构建 | 第29-30页 |
| ·侧翼序列克隆 | 第30-32页 |
| ·PCR产物回收及酶连转化 | 第32页 |
| ·质粒DNA提取 | 第32-33页 |
| ·测序及结果分析 | 第33页 |
| ·Sphigobium sp.strain FB3基因组测序 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-42页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3的随机插入突变子文库构建 | 第33-35页 |
| ·侧翼序列克隆及序列分析 | 第35-39页 |
| ·Sphigobium sp.strain FB3基因组测序结果 | 第39-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第三章 Sphingobium sp.strain FB3中编码环羟化双加氧酶基因的功能分析 | 第45-63页 |
| ·前言 | 第45页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·培养基、药品与试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3编码环羟化双加氧酶基因表达载体及表达菌株构建 | 第46-48页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3中编码环羟化双加氧酶基因的诱导表达 | 第48页 |
| ·E.coli BL21 FlnA和E.coli BL21 FlnA12诱导表达的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第48-49页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA和E.coli BL21 FlnA12降解荧蒽效果及降解产物检测 | 第49页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA的底物特异性研究 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-56页 |
| ·Sphingobium sp.FB3中编码环羟化双加氧酶基因的表达载体及表达菌株构建 | 第50页 |
| ·E. coli BL21 FlnA和E.coli BL21 FlnA12诱导表达的SDS-PAGE检测 | 第50-51页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA和E coli BL21 FlnA12降解荧蒽效果及降解产物检测 | 第51-54页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA的底物特异性 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第四章 Sphingobium sp. strain FB3中环羟化双加氧酶α亚基三维结构及底物特异性研究 | 第63-73页 |
| ·前言 | 第63页 |
| ·材料与方法 | 第63-66页 |
| ·菌株与质粒 | 第63页 |
| ·培养基、药品与试剂 | 第63-64页 |
| ·主要仪器 | 第64页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3环羟化双加氧酶组分末端氧化酶α亚基三维结构及活性位点预测 | 第64页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3环羟化双加氧酶组分末端氧化酶α亚基活性位点与底物结合情况 | 第64页 |
| ·α亚基中的PHE223突变成LEU223的表达载体及表达菌株构建 | 第64-65页 |
| ·E.coli BL21 FlnA-223中编码环羟化双加氧酶基因的诱导表达 | 第65页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA-223和E.coli BL21 FlnA降解苯并[a]芘效果检测 | 第65页 |
| ·菌株E.coli BL21 FlnA-223和E.coli BL21 FlnA的底物特异性研究 | 第65-66页 |
| ·结果与分析 | 第66-71页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3环羟化双加氧酶组分末端氧化酶α亚基三维结构及活性位点预测 | 第66-67页 |
| ·Sphingobium sp.strain FB3环羟化双加氧酶组分末端氧化酶α亚基活性位点与底物结合情况 | 第67-69页 |
| ·α亚基中的PHE223突变成LEU223的表达载体及表达菌株构建 | 第69页 |
| ·E.coli BL21 FlnA-223和E.coli BL21 FlnA的诱导表达及降解苯并[a]芘效果检测 | 第69-71页 |
| ·E.coli BL21 FlnA-223和E.coli BL21 FlnA的底物特异性研究 | 第71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第五章 结论与展望 | 第73-74页 |
| ·结论 | 第73页 |
| ·展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 个人简介 | 第85-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
