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无乳链球菌诱导吉富罗非鱼sIgM、mIgD重链基因的克隆及表达分析

摘要第1-6页
Abstract第6-9页
英文缩略词第9-13页
1 文献综述第13-21页
   ·研究对象第13页
     ·罗非鱼简介第13页
     ·无乳链球菌对吉富罗非鱼的危害第13页
   ·硬骨鱼类免疫系统及免疫机制研究第13-15页
     ·硬骨鱼类主要的免疫器官和组织第13-14页
     ·硬骨鱼类主要的免疫细胞第14-15页
     ·硬骨鱼类主要的免疫因子第15页
   ·硬骨鱼类免疫球蛋白的研究进展第15-19页
     ·IgM 的结构及功能第15-17页
     ·IgD 的结构及功能第17-18页
     ·新型免疫球蛋白第18-19页
   ·本研究的目的及意义第19-21页
2 吉富罗非鱼 sIgM 和 mIgD 重链基因的克隆及序列分析第21-47页
   ·实验材料第21-23页
     ·实验用鱼第21页
     ·实验仪器第21页
     ·主要试剂第21页
     ·受体菌及质粒载体第21-22页
     ·主要溶液和培养基的配置第22页
     ·生物信息学分析所用软件第22-23页
   ·实验方法第23-31页
     ·吉富罗非鱼头肾总 RNA 的提取第23页
     ·吉富罗非鱼 sIgM 和 mIgD 重链基因的 RACE 克隆第23-31页
   ·结果与分析第31-44页
     ·吉富罗非鱼总 RNA 的提取第31-32页
     ·罗非鱼 cDNA 模板的合成第32页
     ·sIgM 基因克隆结果与序列分析第32-37页
     ·mIgD 基因克隆结果与序列分析第37-44页
   ·讨论第44-47页
3 吉富罗非鱼 sIgM 和 mIgD 基因的表达差异研究第47-56页
   ·实验仪器及试剂第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·灭活无乳链球菌的制备第47页
     ·吉富罗非鱼的暂养第47页
     ·免疫试验及样品采集第47-48页
     ·引物设计第48页
     ·总 RNA 的提取及 DNaseⅠ消化第48页
     ·Real-Time PCR(qRT-PCR)第48-49页
     ·数据统计及分析第49页
   ·实验结果第49-54页
     ·健康吉富罗非鱼体内 sIgM 和 mIgD 的组织表达差异第49-50页
     ·灭活无乳链球菌免疫罗非鱼后 sIgM 和 mIgD 在各组织中的时间表达差异第50-54页
   ·讨论第54-56页
4 吉富罗非鱼 sIgM、mIgD 基因的原核表达及 SIGM 多克隆抗体的制备第56-70页
   ·实验材料第56-57页
     ·实验载体及菌株第56页
     ·实验动物第56页
     ·实验仪器第56页
     ·实验试剂和溶液第56-57页
   ·实验方法第57-62页
     ·sIgM 基因恒定区的原核表达第57-59页
     ·mIgD 基因恒定区的原核表达第59-62页
     ·兔抗罗非鱼 SIGM 多克隆抗体的制备第62页
   ·实验结果与分析第62-68页
     ·sIgM 基因的原核表达第62-65页
     ·mIgD 基因的原核表达第65-67页
     ·兔抗 SIGM 多克隆抗体的抗血清效价测定和特异性检测第67-68页
   ·讨论第68-70页
5 SIGM 的免疫组织化学分析及免疫电镜分析第70-79页
   ·实验材料第70-71页
     ·实验动物第70页
     ·实验仪器第70页
     ·实验试剂及溶液第70-71页
   ·实验方法第71-73页
     ·免疫组化分析第71-72页
     ·免疫电镜分析第72-73页
   ·结果分析第73-76页
     ·免疫组织化学结果分析第73-75页
     ·免疫电镜结果分析第75-76页
   ·讨论第76-79页
6 结论第79-81页
   ·吉富罗非鱼 sIgM、mIgD 重链基因的克隆第79页
   ·吉富罗非鱼 sIgM、mIgD 基因差异表达分析第79页
   ·sIgM 和 mIgD 基因的原核表达及 SIGM 多克隆抗体的制备第79-80页
   ·SIGM 的免疫组织化学分析及免疫电镜分析第80-81页
参考文献第81-91页
致谢第91-93页
作者简介第93-94页
导师简介第94页

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