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SIgA分泌片的原核表达及抗分泌片单克隆抗体的制备

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 SIgA的研究进展第7-13页
   ·SIgA的结构及其组成成分第7-8页
   ·SIgA的功能和作用第8-9页
   ·SIgA与疾病的关系第9-11页
     ·呼吸道和胃肠道疾病第9-10页
     ·泌尿生殖系统疾病第10页
     ·肝胆疾病第10页
     ·癌症第10页
     ·其它疾病第10-11页
   ·SC在SIgA中的作用第11-12页
     ·SC与疾病的关系第11-12页
   ·本试验研究的背景和目的意义第12-13页
第二章 SC基因克隆构建及表达第13-24页
   ·材料第13-14页
     ·质粒及菌株第13页
     ·寡核苷酸引物第13页
     ·主要试剂第13页
     ·主要仪器设备第13页
     ·培养基及溶液第13-14页
   ·方法第14-19页
     ·PCR方法扩增SC基因第14-15页
     ·重组pQE80L-SC质粒的构建第15-16页
     ·重组pQE80L-SC质粒的鉴定第16-17页
     ·重组质粒pQE80L-SC在BL21(DE3)中的表达第17页
     ·SDS-PAGE分析第17-18页
     ·重组蛋白表达形式分析第18页
     ·包涵体的纯化回收第18-19页
   ·结果第19-23页
     ·PCR扩增SC基因第19页
     ·SC基因的测序结果第19-20页
     ·重组pQE80-SC质粒的PCR鉴定第20-21页
     ·对阳性克隆的酶切鉴定第21页
     ·重组质粒在大肠杆菌中的诱导表达形式和溶解性分析第21-22页
     ·不同浓度尿素溶解分析第22页
     ·SC的纯化分析第22-23页
   ·讨论第23-24页
第三章 抗SC单克隆抗体的制备第24-34页
   ·材料第24页
     ·实验材料第24页
     ·实验试剂第24页
     ·主要仪器设备第24页
   ·方法第24-30页
     ·免疫小鼠第24-25页
     ·间接ELISA建立第25页
     ·骨髓瘤细胞的培养第25-26页
     ·饲养细胞的制备第26页
     ·脾细胞与瘤细胞的融合第26-27页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选及亚克隆第27-28页
     ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第28页
     ·单克隆抗体的制备第28页
     ·Western blot实验第28-29页
     ·单克隆抗体分型鉴定第29页
     ·单克隆抗体的纯化第29-30页
   ·结果第30-33页
     ·小鼠免疫的效价图第30页
     ·饲养细胞的细胞形态第30页
     ·杂交瘤细胞的细胞形态第30-31页
     ·Western Blot检测抗体第31-32页
     ·单克隆抗体免疫球蛋白类及亚类的鉴定第32页
     ·单克隆抗体分子量SDS-PAGE鉴定第32-33页
   ·讨论第33-34页
全文结论第34-35页
参考文献第35-38页
附录第38-41页
致谢第41-42页
作者简介第42页

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