致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
1 文献综述 | 第10-24页 |
·昆虫体壁表皮的研究 | 第10-13页 |
·体壁表皮的构成 | 第10页 |
·体壁表皮的化学组分 | 第10-12页 |
·昆虫表皮的醌鞣化 | 第12-13页 |
·昆虫酚氧化酶的研究概况 | 第13-19页 |
·昆虫酚氧化酶的种类 | 第13-14页 |
·酚氧化酶的分布 | 第14页 |
·昆虫漆酶的研究 | 第14-19页 |
·昆虫漆酶的种类 | 第15-16页 |
·昆虫漆酶的生化特征 | 第16-17页 |
·昆虫漆酶在表皮中的功能 | 第17-19页 |
·保幼激素和蜕皮激素的研究 | 第19-24页 |
·保幼激素的研究 | 第19-21页 |
·保幼激素的生化特征 | 第19页 |
·保幼激素的生物合成及其类似物 | 第19-20页 |
·保幼激素的代谢 | 第20-21页 |
·蜕皮激素的研究 | 第21-23页 |
·蜕皮激素的生物学特征 | 第21页 |
·蜕皮激素的生物合成 | 第21-22页 |
·蜕皮激素的代谢 | 第22页 |
·蜕皮激素的作用机制及其受体 EcR、USP 的研究 | 第22-23页 |
·保幼激素和蜕皮激素对昆虫蜕皮变态的调控 | 第23-24页 |
2 前言 | 第24-25页 |
3 材料与方法 | 第25-39页 |
·供试材料 | 第25-27页 |
·供试昆虫 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·试验试剂 | 第25页 |
·试验中所用的主要溶液及培养基的制备 | 第25-26页 |
·SDS-PAGE 电泳试剂 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-39页 |
·棉铃虫 lac2 基因的克隆 | 第27-31页 |
·棉铃虫总 RNA 提取步骤 | 第27页 |
·反转录 | 第27-28页 |
·引物的设计和完成 | 第28页 |
·cDNA 片段的 PCR 扩增 | 第28-29页 |
·PCR 产物的纯化 | 第29页 |
·克隆载体的连接 | 第29-30页 |
·制备感受态细胞以及转化质粒 | 第30页 |
·质粒 DNA 提取 | 第30-31页 |
·阳性克隆的筛选 | 第31页 |
· | 第31-33页 |
·5'-RACE-Ready cDNA 的合成 | 第31页 |
·5'-RACE cDNA 的巣式 PCR、克隆及测序 | 第31-32页 |
·3'-RACE-Ready cDNA 的合成 | 第32-33页 |
·3'-RACE cDNA 的巣式 PCR、克隆及测序 | 第33页 |
·比对棉铃虫 lac2 基因氨基酸序列及构建进化树 | 第33-34页 |
·棉铃虫 lac2 基因的时空表达分析 | 第34-35页 |
·取样 | 第34页 |
·引物的设计与合成 | 第34页 |
·实时荧光定量 PCR | 第34-35页 |
·Methoprene 和蜕皮激素的处理 | 第35页 |
·体外转录合成蜕皮激素受体 ECR、USP 基因 dsRNA | 第35-37页 |
·dsRNA 的合成 | 第35-36页 |
·dsRNA 的注射 | 第36-37页 |
·体外转录合成 lac2 双链 RNA | 第37页 |
·dsRNA 的合成 | 第37页 |
·dsRNA 的注射 | 第37页 |
·LAC2 的原核表达 | 第37-39页 |
4 结果与分析 | 第39-55页 |
·棉铃虫 lac2 基因 cDNA 序列分析及系统进化树 | 第39-48页 |
·棉铃虫 lac2 基因发育表达模式 | 第48页 |
·棉铃虫 lac2 基因组织表达模式 | 第48-49页 |
·Methoprene 和蜕皮激素处理对棉铃虫 lac2 基因表达量的影响 | 第49-51页 |
·蜕皮激素受体缺失对棉铃虫 lac2 基因表达的影响 | 第51-54页 |
·RNA 干涉对 usp 和 ecr 表达的影响 | 第51-52页 |
·蜕皮激素受体干涉对 lac2 基因表达的影响 | 第52-54页 |
·RNA 干扰 lac2 基因对棉铃虫表皮的影响 | 第54-55页 |
·棉铃虫 lac2 基因融合蛋白的原核表达 | 第55页 |
5 结论与讨论 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-70页 |
ABSTRACT | 第70-73页 |
硕士期间发表论文 | 第73页 |