| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| ·转基因植物作为生物反应器生产药用蛋白的研究 | 第16-21页 |
| ·植物生物反应器的概念 | 第17页 |
| ·植物生物反应器的优越性 | 第17-19页 |
| ·植物生物反应器在生产药用蛋白的应用 | 第19-21页 |
| ·利用转基因植物生产可食用疫苗的可行性 | 第21-26页 |
| ·利用转基因植物生产可食用疫苗的优势 | 第21-23页 |
| ·利用转基因植物生产可食用疫苗的植物表达系统 | 第23-24页 |
| ·影响外源蛋白在植物中表达的因素 | 第24-26页 |
| ·利用转基因植物生产可食用疫苗的问题与展望 | 第26-27页 |
| ·启动子在转基因植物研究中的应用 | 第27-32页 |
| ·植物启动子的一般结构及功能 | 第27-28页 |
| ·植物启动子的分类 | 第28-30页 |
| ·植物启动子的克隆方法 | 第30-32页 |
| ·启动子在植物基因工程中的应用前景 | 第32页 |
| ·本研究的目的意义 | 第32-36页 |
| 第二章 苜蓿和大豆高效表达特殊蛋白质及其编码基因的分离与鉴定 | 第36-61页 |
| 前言 | 第36-37页 |
| ·实验材料与仪器 | 第37-44页 |
| ·植物 | 第37页 |
| ·菌种及培养基 | 第37页 |
| ·Marker | 第37-38页 |
| ·试剂与药品 | 第38-42页 |
| ·实验仪器 | 第42-44页 |
| ·实验方法 | 第44-50页 |
| ·培养苜蓿和大豆并制备植物蛋白提取液 | 第45页 |
| ·SDS-PAGE | 第45页 |
| ·2D-PAGE | 第45-46页 |
| ·苜蓿高效表达的特殊蛋白质的氨基酸序列的测定 | 第46页 |
| ·苜蓿高效表达的特殊蛋白质基因的核苷酸序列的测定 | 第46-50页 |
| ·实验结果 | 第50-60页 |
| ·苜蓿和大豆的培养及其植物蛋白的提取 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE分离植物蛋白质 | 第51-52页 |
| ·2D-PAGE分离植物蛋白质 | 第52-53页 |
| ·苜蓿特殊蛋白质的氨基酸序列的测定 | 第53-54页 |
| ·苜蓿特殊蛋白质(AL-a)基因的核苷酸序列的测定 | 第54-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第三章 苜蓿质体蓝素基因启动子表达特性的分析 | 第61-76页 |
| 前言 | 第61-62页 |
| ·实验材料与仪器 | 第62-64页 |
| ·植物 | 第62页 |
| ·试剂和药品 | 第62-63页 |
| ·实验仪器 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-71页 |
| ·苜蓿质体蓝素基因光诱导表达特异性的分析 | 第64-67页 |
| ·苜蓿质体蓝素基因的组织特异性表达分析 | 第67-71页 |
| ·试验结果 | 第71-75页 |
| ·苜蓿质体蓝素基因的光诱导特异性表达分析 | 第71-73页 |
| ·苜蓿质体蓝素基因的组织特异性表达分析 | 第73-75页 |
| ·本章小结 | 第75-76页 |
| 第四章 首蓿质体蓝素基因启动子的克隆分离及重组质粒的构建 | 第76-94页 |
| 前言 | 第76-77页 |
| ·实验材料与仪器 | 第77-80页 |
| ·实验材料和试剂 | 第77-78页 |
| ·实验仪器 | 第78-80页 |
| ·实验方法：实验程序图如下 | 第80-86页 |
| ·苜蓿质体蓝素启动子引物的设计 | 第81页 |
| ·聚合酶链反应(PCR)提取苜蓿质体蓝素基因启动子 | 第81-82页 |
| ·含有苜蓿质体蓝素基因启动子重组质粒pBI121-P-AP的构建 | 第82-83页 |
| ·重组质粒的扩增 | 第83-86页 |
| ·结果与讨论 | 第86-93页 |
| ·PCR法克隆分离苜蓿质体蓝素基因启动子 | 第86-87页 |
| ·苜蓿质体蓝素基因启动子测序结果 | 第87-88页 |
| ·所测得苜蓿质体蓝素启动子序列与NCBI数据库比对结果如下 | 第88-91页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测pBI121质粒的酶切结果 | 第91页 |
| ·含苜蓿质体蓝素基因启动子P-AP的重组质粒pB121-P-AP的构建 | 第91-93页 |
| ·本章小结 | 第93-94页 |
| 第五章 转基因首蓿的制备及外源报告基因GUS表达的检测 | 第94-105页 |
| 前言 | 第94-95页 |
| ·实验材料和仪器 | 第95-97页 |
| ·实验材料 | 第95页 |
| ·实验仪器 | 第95-97页 |
| ·实验方法 | 第97-100页 |
| ·根癌农杆菌菌种的活化 | 第97页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第97页 |
| ·重组质粒pBI121-Ap转化根癌农杆菌 | 第97页 |
| ·浸种法侵染苜蓿制备转基因苜蓿 | 第97-98页 |
| ·PCR法检测转基因苜蓿 | 第98页 |
| ·转基因苜蓿GUS基因表达的组织化学检测 | 第98-100页 |
| ·结果与讨论 | 第100-104页 |
| ·重组质粒转化根癌农杆菌的转化子的筛选 | 第100页 |
| ·浸种法转染苜蓿并筛选转基因苜蓿 | 第100-101页 |
| ·PCR法检测转基因苜蓿中的GUS基因 | 第101页 |
| ·转基因苜蓿GUS基因表达的组织化学检测 | 第101-104页 |
| ·本章小结 | 第104-105页 |
| 第六章 结论与讨论 | 第105-111页 |
| ·结论 | 第105-107页 |
| ·讨论 | 第107-111页 |
| ·利用苜蓿或大豆作为受体植物生产可食疫苗 | 第107页 |
| ·植物特异性启动子提高外源蛋白基因表达量 | 第107-109页 |
| ·转基因苜蓿转化和再生的方法 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 发表文章 | 第119-120页 |
| 附件 | 第120-129页 |
| 学位论文自愿预先检测申请表 | 第129页 |
