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中华绒螯蟹精子核非浓缩的表观遗传机制

摘要第1-7页
Abstract第7-16页
第1章 绪论第16-34页
   ·国内外研究进展第16-33页
     ·概述第16-17页
     ·精子和精子核第17-18页
     ·SBNP替代在精子核发生中的作用第18-23页
     ·SBNP修饰在精子核发生中的作用第23-27页
     ·精子核发生的表观遗传机制第27-30页
     ·河蟹的精子发生、AR和精子核的非浓缩现象第30-33页
   ·研究目的和意义第33-34页
第2章 河蟹精子及其非浓缩核的发生第34-48页
   ·引言第34页
   ·材料和方法第34-36页
     ·材料第34页
     ·材料的准备和处理第34-35页
     ·半薄切片的光学显微镜观察第35页
     ·精子发生过程的电镜观察第35-36页
   ·结果第36-40页
     ·河蟹的精巢发育周期第36-37页
     ·河蟹的输精管第37-38页
     ·河蟹的精子发生第38-40页
   ·讨论第40-48页
     ·半薄切片法对精巢发育周期和精子发生的研究第40-41页
     ·精巢发育周期及分期依据的改进第41-42页
     ·精子发生在精巢中的有序进行第42-44页
     ·精子在输精管中的进一步发育第44-45页
     ·河蟹精子非浓缩核的发生第45-46页
     ·河蟹精子及核发生在进化上的适应性第46-48页
第3章 精子发生和AR过程中的BPA第48-59页
   ·引言第48页
   ·材料和方法第48-52页
     ·材料第48-49页
     ·材料的准备和处理第49页
     ·AR过程的光学显微镜观察第49-50页
     ·AR过程的电镜观察第50页
     ·BPA的获得第50页
     ·BPA的抗体制备第50-51页
     ·BPA在精子发生和AR过程中的IHC定位第51-52页
   ·结果第52-54页
     ·河蟹精子的AR第52-54页
     ·BPA抗体的活性和效价第54页
     ·BPA在精子发生和AR过程中的分布第54页
   ·讨论第54-59页
     ·温差对河蟹精子AR诱导的高效性第54-55页
     ·通过诱导精子的AR获得蟹类的精子核和提取精子核蛋白第55页
     ·精子发生和AR过程中的BPA第55-57页
     ·AR是精子发育的继续和终结第57页
     ·河蟹精子AR与非浓缩核的关系第57-59页
第4章 精子发生和AR过程中的Lys、Arg及SBNP第59-72页
   ·引言第59页
   ·材料和方法第59-62页
     ·材料第59-60页
     ·材料的准备和处理第60页
     ·精子发生和AR过程中Lys和Arg的染色和观察第60页
     ·SBNP的抽提第60-61页
     ·SBNP的电泳分析第61-62页
     ·SBNP的分子量计算第62页
     ·SBNP的抗体制备第62页
     ·SBNP在精子发生和AR过程中的IHC定位第62页
   ·结果第62-67页
     ·精子发生和AR过程中的Lys分布第62-63页
     ·精子发生和AR过程中的Arg分布第63页
     ·SBNP的组分及分子量第63-66页
     ·SBNP抗体的活性和效价第66页
     ·精子发生和AR过程中SBNP的分布第66-67页
   ·讨论第67-72页
     ·精子发生和AR过程中的组蛋白第67-68页
     ·精子发生和AR过程中富含Arg的精子特异的组蛋白第68-69页
     ·SBNP中的组蛋白第69-70页
     ·精子发生和AR过程中的SBNP第70-72页
第5章 精子发生和AR过程中的SMBP及其与SBNP的相关性第72-82页
   ·引言第72页
   ·材料和方法第72-75页
     ·材料第72页
     ·精子碱性蛋白的提取第72-73页
     ·三类精子碱性蛋白的Arg定性比较第73-74页
     ·三类碱性蛋白的电泳比较第74页
     ·SMBP的抗体制备第74页
     ·SMBP中含有的一种SBNP的抗体制备第74页
     ·三类精子碱性蛋白的WB分析第74-75页
     ·SBNP在精子发生和AR过程中的IHC定位第75页
   ·结果第75-78页
     ·定性比较三类精子碱性蛋白的Arg第75页
     ·三类碱性蛋白的组分第75-76页
     ·抗体的活性和效价第76-77页
     ·WB对三类碱性蛋白的交叉分析结果第77页
     ·SMBP在精子发生和AR过程中的分布第77-78页
   ·讨论第78-82页
     ·精荚基质蛋白的提取方法第78-79页
     ·三类碱性蛋白中的Arg第79页
     ·三类碱性蛋白的相关性第79-80页
     ·精子发生和AR过程中的SMBP及其与SBNP的相关性第80-82页
第6章 精子发生和AR过程中的组蛋白H4第82-102页
   ·引言第82页
   ·材料和方法第82-85页
     ·材料、试剂和仪器第82页
     ·SBNP的抽提第82页
     ·SBNP的电泳第82页
     ·SBNP的WB第82-83页
     ·免疫定位材料的准备和处理第83页
     ·精子发生和AR过程中组蛋白H4的IHC定位第83页
     ·精子发生和AR过程中组蛋白H4的IF定位第83页
     ·精子发生和AR过程中组蛋白H4的IEM细胞定位第83-84页
     ·精子组蛋白H4两种候选蛋白的MS分析第84-85页
     ·河蟹精子中组蛋白H4的进化分析第85页
   ·结果第85-97页
     ·SBNP中的组蛋白H4第85-86页
     ·IHC定位分析组蛋白H4在精子发生和AR过程中的分布第86页
     ·IF定位分析组蛋白H4在精子发生和AR过程中的分布第86页
     ·IEM定位分析组蛋白H4在精子发生和AR过程中的亚细胞分布第86页
     ·河蟹精子组蛋白H4候选蛋白的检索鉴定结果第86-91页
     ·河蟹精子组蛋白H4候选蛋白序列的同源性比对结果第91-96页
     ·河蟹精子核中组蛋白H4匹配肽段的氨基酸组成第96-97页
   ·讨论第97-102页
     ·河蟹精子发生和AR过程中的组蛋H4第97-98页
     ·河蟹精子核内存在组蛋白H4的2种变体或2种不同修饰第98-100页
     ·河蟹精子核内的组蛋白H2B和其他SBNP第100页
     ·河蟹精子核非浓缩的起源和进化分析第100-102页
第7章 精子发生和AR过程中的核心组蛋白H2A第102-113页
   ·引言第102页
   ·材料和方法第102-103页
     ·材料第102页
     ·SBNP的电泳第102页
     ·河蟹SBNP2和SBNP3的质谱分析第102页
     ·河蟹SBNP3的抗体制备第102页
     ·河蟹SBNP3的WB第102页
     ·河蟹SBNP3的免疫定位第102-103页
   ·结果第103-109页
     ·河蟹SBNP2和SBNP3的检索和鉴定结果第103-106页
     ·河蟹SBNP3的电泳纯抗原和抗体第106-107页
     ·河蟹SBNP3抗体的活性和效价第107页
     ·WB分析河蟹SBNP3第107-108页
     ·IHC定位分析SBNP3在河蟹精子发生和AR过程中的分布第108页
     ·IEM定位分析SBNP3在河蟹精子发生和AR过程中的分布第108-109页
   ·讨论第109-113页
     ·河蟹精子中的组蛋白和其他SBNP第110页
     ·精子发生和AR过程中的H2A第110-111页
     ·组蛋白的转移和抛弃是河蟹精子核非浓缩的重要原因第111-113页
第8章 精子发生和AR过程中的乙酰化组蛋白H3第113-122页
   ·引言第113-114页
   ·材料和方法第114-115页
     ·材料和试剂第114页
     ·电泳和WB第114页
     ·组织和细胞材料的准备第114-115页
     ·精子发生和AR过程中乙酰化组蛋白H3的IF定位第115页
     ·精子发生和AR过程中乙酰化组蛋白H3的IEM细胞定位第115页
   ·结果第115-117页
     ·SBNP中的乙酰化组蛋白H3第115页
     ·精子发生和AR过程中乙酰化组蛋白H3的分布第115-116页
     ·精原细胞和精母细胞中的乙酰化组蛋白H3第116页
     ·早期精细胞中大量出现的乙酰化组蛋白H3第116-117页
     ·酰化组蛋白H3从中期精细胞开始缓慢向核外转移第117页
     ·AR过程中精子核中的乙酰化组蛋白H3第117页
   ·讨论第117-122页
第9章 结语第122-123页
参考文献第123-134页
图版说明第134-142页
图版第142-165页
缩略词第165-167页
致谢第167页

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