酸性红73间接ELISA检测方法的建立及初步应用
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1 酸性红 73 的概述 | 第10页 |
| 2 酸性红 73 的研究现状 | 第10-15页 |
| ·酸性红 73 的危害 | 第10-11页 |
| ·残留特性及检测方法 | 第11-15页 |
| ·合成人工抗原的方法 | 第15页 |
| 3 研究内容、目标及意义 | 第15-17页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| ·研究目标 | 第16页 |
| ·拟解决的关键问题 | 第16页 |
| ·研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 酸性红 73 人工抗原的合成与鉴定 | 第17-27页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| ·试剂与药品 | 第17页 |
| ·仪器与设备 | 第17-18页 |
| ·溶液系统 | 第18-19页 |
| 2 方法 | 第19-21页 |
| ·人工抗原的合成 | 第19-21页 |
| ·活性酯法 | 第19-20页 |
| ·N，N-羰基二咪唑(CDI)法 | 第20-21页 |
| ·人工抗原的鉴定 | 第21页 |
| ·人工抗原浓度的测定 | 第21页 |
| ·紫外分光光度法 | 第21页 |
| ·SDS-PAGE 法 | 第21页 |
| 3 结果 | 第21-25页 |
| ·人工抗原浓度测定结果 | 第21-22页 |
| ·紫外分光光度法鉴定结果 | 第22-24页 |
| ·免疫原 AR73-HS-BSA 鉴定结果 | 第22页 |
| ·包被原 AR73-HS-OA 鉴定结果 | 第22-23页 |
| ·免疫原 AR73-BSA 鉴定结果 | 第23页 |
| ·包被原 AR73-OA 鉴定结果 | 第23-24页 |
| ·SDS-PAGE 法鉴定结果 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| ·人工抗原的浓度 | 第25页 |
| ·AR73 的半抗原与偶联物 | 第25-26页 |
| 5 结论 | 第26-27页 |
| 第三章 AR73 多克隆抗体的制备与纯化 | 第27-36页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| ·试剂与药品 | 第27页 |
| ·仪器和设备 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·溶液系统 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第28-29页 |
| ·多克隆抗体纯化方法的比较 | 第29-30页 |
| ·饱和硫酸铵法 | 第29页 |
| ·辛酸-硫酸铵法 | 第29-30页 |
| ·改良 BCA 法测 IgG 浓度 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE 测 IgG 纯度 | 第30页 |
| ·间接 ELISA 方法测 IgG 效价 | 第30页 |
| ·多克隆抗体的筛选 | 第30-31页 |
| ·双向琼脂扩散法 | 第30页 |
| ·筛选血清 IgG 组分的提取 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-33页 |
| ·两种纯化方法的比较 | 第31-32页 |
| ·IgG 浓度的比较结果 | 第31页 |
| ·IgG 纯度的测定 | 第31-32页 |
| ·IgG 效价的比较结果 | 第32页 |
| ·多克隆抗体的筛选结果 | 第32-33页 |
| ·双向琼脂扩散实验结果 | 第32-33页 |
| ·筛选血清的分离纯化结果 | 第33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| ·多克隆抗体的纯化方法 | 第33-34页 |
| ·多克隆抗体的筛选 | 第34-35页 |
| 5 结论 | 第35-36页 |
| 第四章 间接 ELISA 检测方法的建立及其应用 | 第36-47页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| ·试剂与药品 | 第36页 |
| ·仪器与设备 | 第36页 |
| ·溶液系统 | 第36-37页 |
| 2 方法 | 第37-39页 |
| ·间接 ELISA 方法的建立 | 第37页 |
| ·最佳组合与最适工作浓度的选择 | 第37页 |
| ·间接 ELISA 方法标准曲线的建立 | 第37页 |
| ·间接 ELISA 方法反应体系的优化 | 第37-39页 |
| ·酶标板均一性的测定 | 第37-38页 |
| ·包被液及包被方式的选择 | 第38页 |
| ·封闭液的筛选 | 第38页 |
| ·抗体稀释液及温育时间的确定 | 第38页 |
| ·酶标二抗稀释倍数与反应时间的选择 | 第38页 |
| ·底物反应体系及温育时间的优化 | 第38-39页 |
| ·优化后 ELISA 方法的重新建立 | 第39页 |
| ·ELISA 方法的特异性检测 | 第39页 |
| ·样品制备及添加回收率的计算 | 第39页 |
| ·样品的制备 | 第39页 |
| ·添加回收率的计算 | 第39页 |
| ·实际样品的检测 | 第39页 |
| 3 结果 | 第39-44页 |
| ·间接 ELISA 方法的建立 | 第39-40页 |
| ·最佳组合与最适工作浓度的确定 | 第39-40页 |
| ·标准曲线的建立 | 第40页 |
| ·ELISA 方法的优化结果 | 第40-43页 |
| ·酶标板均一性测定结果 | 第40页 |
| ·包被液及包被方式的确定 | 第40-41页 |
| ·封闭液的确定 | 第41页 |
| ·抗体稀释液及温育时间的优化 | 第41-42页 |
| ·酶标二抗稀释倍数与反应时间的选择 | 第42页 |
| ·底物及反应时间的确定 | 第42页 |
| ·间接 ELISA 方法的重新建立 | 第42-43页 |
| ·特异性测定结果 | 第43页 |
| ·样品制备及添加回收率的计算 | 第43-44页 |
| ·AR73 样品制备 | 第44页 |
| ·准确性的测定 | 第44页 |
| ·实际样品检测结果 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| ·间接 ELISA 方法的优化 | 第44-45页 |
| ·间接 ELISA 方法的特异性和准确度 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 全文结论 | 第47-48页 |
| 1 主要结论 | 第47页 |
| 2 本文章存在的不足 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 攻读硕士期间发表或录用的论文 | 第56-57页 |
