重组腈水解酶催化反应体系改进及固定化研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-28页 |
| ·腈水解酶 | 第11-16页 |
| ·腈水解酶简介 | 第11-12页 |
| ·腈水解酶的来源 | 第12-13页 |
| ·腈水解酶的结构与功能 | 第13-14页 |
| ·腈水解酶的催化机制 | 第14页 |
| ·腈水解酶的催化特性与应用 | 第14-16页 |
| ·环糊精 | 第16-21页 |
| ·分散剂作用与分类 | 第16页 |
| ·超分子体系与环糊精 | 第16-17页 |
| ·环糊精的结构特征与理化性质 | 第17-19页 |
| ·环糊精的包结作用 | 第19-20页 |
| ·环糊精包结作用的意义 | 第20-21页 |
| ·两相体系简介 | 第21页 |
| ·生物催化剂的固定化 | 第21-26页 |
| ·固定化技术简介 | 第21-22页 |
| ·常用固定化方法 | 第22-23页 |
| ·常用的固定化材料 | 第23-25页 |
| ·生物催化剂固定化的应用 | 第25-26页 |
| ·本课题的意义与主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第2章 重组腈水解酶酶学性质的研究 | 第28-45页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·药品与试剂 | 第28-29页 |
| ·仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·菌种活化 | 第31页 |
| ·菌种保藏 | 第31页 |
| ·摇瓶发酵培养 | 第31-32页 |
| ·静息细胞制备 | 第32页 |
| ·重组菌浓度测定 | 第32页 |
| ·催化活力评价 | 第32-33页 |
| ·重组腈水解酶的纯化 | 第33-34页 |
| ·温度对催化活力的影响 | 第34页 |
| ·pH对催化活力的影响 | 第34页 |
| ·底物浓度对反应初速度的影响 | 第34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-44页 |
| ·大肠杆菌浓度测定 | 第34-35页 |
| ·测氨法标准曲线 | 第35页 |
| ·诱导剂选择 | 第35-39页 |
| ·底物谱分析 | 第39-41页 |
| ·温度对催化活力的影响 | 第41-42页 |
| ·pH值对细胞催化活力的影响 | 第42-43页 |
| ·底物浓度对反应初速度的影响 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 第3章 重组腈水解酶催化反应体系的改进 | 第45-61页 |
| ·引言 | 第45-46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·药品与试剂 | 第46页 |
| ·仪器与设备 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·催化反应产物的检测 | 第46页 |
| ·添加剂的筛选 | 第46页 |
| ·环糊精包结物制备条件优化 | 第46-47页 |
| ·底物浓度对环糊精改进体系反应初速度的影响 | 第47页 |
| ·环糊精对反应效率的影响 | 第47页 |
| ·环糊精对反应e.e.值的影响 | 第47页 |
| ·有机相试剂的筛选 | 第47页 |
| ·两相体系中有机溶剂比例对反应效率的影响 | 第47页 |
| ·底物浓度对两相体系反应初速度的影响 | 第47-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-60页 |
| ·苯丙氨腈水解反应的HPLC测定 | 第48-49页 |
| ·产重组腈水解酶大肠杆菌催化苯丙氨腈 | 第49-50页 |
| ·添加剂对催化活力的影响 | 第50页 |
| ·不同环糊精对催化活力的影响 | 第50-51页 |
| ·环糊精包结物制备条件优化 | 第51-54页 |
| ·底物浓度对催化反应初速度的影响 | 第54页 |
| ·环糊精对反应效率的影响 | 第54-55页 |
| ·环糊精对产物e.e.值的影响 | 第55-56页 |
| ·环糊精包结原理初探 | 第56-58页 |
| ·有机相溶剂的选择 | 第58页 |
| ·甲苯比例对催化活力的影响 | 第58-59页 |
| ·底物浓度对两相体系中催化反应初速度的影响 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第4章 产重组腈水解酶大肠杆菌的固定化 | 第61-80页 |
| ·引言 | 第61页 |
| ·实验材料 | 第61-62页 |
| ·实验试剂与药品 | 第61-62页 |
| ·实验仪器与设备 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-66页 |
| ·固定化细胞活力回收率的计算 | 第62页 |
| ·重组大肠杆菌的固定化 | 第62-63页 |
| ·不同固定化材料对催化活力的影响 | 第63-64页 |
| ·常用材料的固定化牢固程度 | 第64页 |
| ·复合材料固定化方法 | 第64页 |
| ·复合材料条件优化 | 第64-65页 |
| ·复合材料孔隙率 | 第65页 |
| ·固定化细胞的活力评价 | 第65页 |
| ·温度对固定化细胞催化活力的影响 | 第65-66页 |
| ·pH值对固定化细胞催化活力的影响 | 第66页 |
| ·固定化对批次稳定性的影响 | 第66页 |
| ·固定化对贮藏稳定性的影响 | 第66页 |
| ·底物浓度对固定化细胞催化反应初速度的影响 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-79页 |
| ·常用固定化材料对重组菌催化活力的影响 | 第66-67页 |
| ·基础方法固定化牢固程度 | 第67-71页 |
| ·复合固定化材料条件的优化 | 第71-75页 |
| ·温度对催化活力的影响 | 第75-76页 |
| ·pH值对催化活力的影响 | 第76-77页 |
| ·固定化对批次稳定性的影响 | 第77-78页 |
| ·固定化对贮藏稳定性的影响 | 第78页 |
| ·底物浓度对固定化细胞反应初速度的影响 | 第78-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 第5章 结论与展望 | 第80-83页 |
| ·结论 | 第80-81页 |
| ·展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 科研成果 | 第92页 |
