中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第12-27页 |
·致病因素 | 第12-15页 |
·非传染性因素 | 第12页 |
·传染性因素 | 第12-15页 |
·国外研究进展 | 第12-13页 |
·国内研究进展 | 第13-15页 |
·与传染性病毒性腺胃炎相关的主要病原 | 第15-19页 |
·禽网状内皮增生症病毒 | 第15-16页 |
·冠状病毒 | 第16-17页 |
·禽呼肠孤病毒 | 第17-18页 |
·马立克氏病毒 | 第18-19页 |
·流行病学 | 第19-20页 |
·临床症状 | 第20页 |
·病理组织学变化 | 第20-21页 |
·腺胃 | 第20页 |
·十二指肠 | 第20-21页 |
·法氏囊 | 第21页 |
·肾脏 | 第21页 |
·胸腺 | 第21页 |
·诊断 | 第21-22页 |
·治疗 | 第22-23页 |
·实时荧光定量 PCR | 第23-26页 |
·实时荧光定量 PCR 的分类 | 第23-24页 |
·SYBR GreenI 荧光染料法 | 第23页 |
·TaqMan 探针法 | 第23页 |
·双杂交探针 | 第23-24页 |
·分子信标 | 第24页 |
·实时荧光定量 PCR 的定量方法 | 第24-25页 |
·绝对定量 | 第24-25页 |
·相对定量 | 第25页 |
·实时荧光定量 PCR 的应用 | 第25-26页 |
·分子生物学应用 | 第25页 |
·遗传学 | 第25页 |
·甲基化分析 | 第25页 |
·SNP 分析 | 第25-26页 |
·临床食品及环境的应用 | 第26页 |
·肿瘤基因检测 | 第26页 |
·产前诊断 | 第26页 |
·荧光定量 PCR 的优点 | 第26页 |
·研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-40页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·毒株 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-40页 |
·主要溶液及其配制 | 第28-29页 |
·病毒的分离 | 第29页 |
·血凝试验(HA) | 第29页 |
·鸡胚半数致死量试验 | 第29页 |
·病毒对 NDV 的干扰试验 | 第29-30页 |
·石蜡切片制作方法 | 第30-31页 |
·HE 染色 | 第31页 |
·IBV 的引物设计及目的片段扩增 | 第31页 |
·重组质粒的构建 | 第31-36页 |
·动物组织 RNA 的提取 | 第31-32页 |
·反转录反应 | 第32页 |
·PCR 反应 | 第32-33页 |
·PCR 产物的胶回收 | 第33-34页 |
·PCR 产物与 pEASY-T1 Cloning Vector 的连接反应 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态细胞(E.coli DH5α)的制备 | 第34-35页 |
·连接产物的转化 | 第35页 |
·质粒 DNA 的提取 | 第35-36页 |
·重组质粒 DNA 的鉴定 | 第36页 |
·质粒酶切鉴定 | 第36页 |
·PCR 鉴定 | 第36页 |
·阳性克隆序列测定 | 第36页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 的建立 | 第36-40页 |
·质粒标准品的制备及原始定量 | 第36-37页 |
·荧光定量 PCR 反应条件的优化 | 第37页 |
·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 的反应体系及程序 | 第37-38页 |
·标准曲线的建立 | 第38页 |
·临床样品检测 | 第38-40页 |
·临床样品组织中 RNA 的提取 | 第38-39页 |
·反转录反应 | 第39页 |
·实时荧光定量 PCR 检测不同器官的病毒拷贝量 | 第39-40页 |
3. 结果 | 第40-50页 |
·病毒的分离与鉴定 | 第40-42页 |
·病毒的分离与传代 | 第40页 |
·血凝实验结果 | 第40页 |
·鸡胚半数致死量试验结果 | 第40-41页 |
·病毒对 NDV 的干扰试验 | 第41-42页 |
·病理组织学变化 | 第42页 |
·PCR 实验结果 | 第42-44页 |
·阳性质粒测序结果 | 第44-45页 |
·荧光定量 PCR 反应条件的优化 | 第45页 |
·荧光定量 PCR 检测β-actin、N 基因标准曲线的建立 | 第45-47页 |
·临床样品的检测结果 | 第47-48页 |
·SPSS 17.0 软件 Duncan 法对各器官病毒含量进行差异显著性分析结果 | 第48-50页 |
4. 讨论 | 第50-52页 |
5 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
研究生期间发表论文 | 第62页 |