| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-32页 |
| ·溶菌酶的研究进展 | 第15-22页 |
| ·溶菌酶的分类 | 第16-19页 |
| ·c 型溶菌酶(chicken type lysozyme) | 第17页 |
| ·g 型溶菌酶(goose type lysozyme) | 第17-18页 |
| ·噬菌体溶菌酶(phage lysozyme) | 第18页 |
| ·植物溶菌酶(plant lysozyme) | 第18页 |
| ·真菌与细菌溶菌酶(fungus and bacterial lysozyme) | 第18-19页 |
| ·无脊椎型溶菌酶(invertebrate lysozyme) | 第19页 |
| ·溶菌酶的催化作用 | 第19-22页 |
| ·溶菌酶的作用机制 | 第19-21页 |
| ·溶菌酶催化活性的影响因素 | 第21-22页 |
| ·溶菌酶的生物学功能 | 第22-24页 |
| ·溶菌酶在身体防御机制方面的作用 | 第22-23页 |
| ·溶菌酶与其它生物活性酶的联系 | 第23页 |
| ·溶菌酶与免疫促进物质的联系 | 第23-24页 |
| ·溶菌酶的消化作用 | 第24页 |
| ·溶菌酶的应用 | 第24-28页 |
| ·溶菌酶在食品工业中的应用 | 第24-26页 |
| ·溶菌酶在乳制品中的应用 | 第24页 |
| ·溶菌酶在新鲜海产品、肉类制品中的应用 | 第24-25页 |
| ·溶菌酶在低度酒类和饮料中的应用 | 第25页 |
| ·溶菌酶在水果保鲜上的应用 | 第25页 |
| ·溶菌酶在其他食品中的应用 | 第25-26页 |
| ·溶菌酶在医学上的应用 | 第26-27页 |
| ·溶菌酶在多种疾病诊断方面的应用 | 第27页 |
| ·溶菌酶在基因工程和酶工程上的应用 | 第27页 |
| ·制备细胞浸提物 | 第27-28页 |
| ·溶菌酶在降解壳聚糖上的应用 | 第28页 |
| ·溶菌酶在饲料中的应用 | 第28页 |
| ·溶菌酶与棘皮动物的防御机制 | 第28-29页 |
| ·海洋生物溶菌酶研究动态 | 第29-31页 |
| ·i 型溶菌酶分子水平研究 | 第29-30页 |
| ·海洋生物溶菌酶基因工程的研究 | 第30页 |
| ·双功能的 i 型溶菌酶—Destabilase-lysozyme | 第30-31页 |
| ·本文的主要研究内容 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-56页 |
| ·海参溶菌酶基因的克隆 | 第32-47页 |
| ·材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·菌种和质粒 | 第32页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·各种酶类 | 第32页 |
| ·试剂盒与试剂 | 第32页 |
| ·常用储液 | 第32-33页 |
| ·方法与步骤 | 第33-47页 |
| ·海参肠总 RNA 的提取与纯化 | 第33-34页 |
| ·溶菌酶 cDNA 保守区域的 RT-PCR 扩增 | 第34-38页 |
| ·海参溶菌酶基因 cDNA5’末端的克隆 | 第38-41页 |
| ·海参溶菌酶基因 cDNA3’末端的克隆 | 第41-43页 |
| ·海参溶菌酶基因全长 DNA 的扩增 | 第43-47页 |
| ·海参溶菌酶基因的 southern 和 northern 杂交 | 第47-55页 |
| ·材料与试剂 | 第47-48页 |
| ·动物材料 | 第47页 |
| ·Southern 杂交所需溶液及物品 | 第47-48页 |
| ·Northern 杂交所需溶液及物品 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-55页 |
| ·Southern 杂交 | 第48-51页 |
| ·Northern 杂交 | 第51-55页 |
| ·用生物信息学方法对海参溶菌酶基因序列特征进行分析 | 第55-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-75页 |
| ·海参肠总 RNA 和基因组 DNA 的质量分析 | 第56-57页 |
| ·总 RNA 的质量分析 | 第56页 |
| ·基因组 DNA 的质量分析 | 第56-57页 |
| ·海参溶菌酶基因克隆 | 第57-62页 |
| ·海参溶菌酶基因 CDNA 的克隆 | 第57-59页 |
| ·海参溶菌酶基因保守区域 CDNA 的克隆 | 第57页 |
| ·海参溶菌酶基因 CDNA5’末端的克隆 | 第57-59页 |
| ·海参溶菌酶基因 CDNA3’末端的克隆 | 第59页 |
| ·海参溶菌酶基因全长 DNA 的克隆 | 第59-62页 |
| ·海参溶菌酶基因 DNA 片段 HS1-d1 的克隆 | 第59-60页 |
| ·海参溶菌酶基因 DNA 片段 HS1-d2 的克隆 | 第60页 |
| ·海参溶菌酶基因 DNA 片段 HS1-d3 的克隆 | 第60-62页 |
| ·海参溶菌酶基因序列分析 | 第62-70页 |
| ·海参溶菌酶基因保守区域 cDNA 片段的序列分析 | 第62-63页 |
| ·海参溶菌酶基因 cDNA 全长序列的分析 | 第63-65页 |
| ·海参溶菌酶基因内含子分析 | 第65-67页 |
| ·同源性比较和分子发育分析 | 第67-69页 |
| ·海参 i 型溶菌酶三级结构模型 | 第69-70页 |
| ·Southern 杂交结果与分析 | 第70-72页 |
| ·海参基因组 DNA 的提取 | 第70页 |
| ·酶切结果分析 | 第70-71页 |
| ·Southern 杂交检测溶菌酶基因的拷贝数 | 第71-72页 |
| ·Northern 杂交结果与分析 | 第72-75页 |
| ·DIG-PCR 扩增标记探针的检测 | 第72页 |
| ·RNA 变性凝胶电泳分析 | 第72页 |
| ·Northern 杂交对海参溶菌酶基因表达量的检测 | 第72-75页 |
| 第四章 讨论 | 第75-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
