附件 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
英文缩略表 | 第15-16页 |
第一章 引言 | 第16-27页 |
·苏云金芽胞杆菌概述 | 第16页 |
·代谢途径对苏云金芽胞杆菌芽胞与晶体蛋白形成的影响 | 第16-17页 |
·σ54因子研究进展 | 第17-20页 |
·σ54因子的结构特点和作用机制 | 第17-18页 |
·依赖于σ54因子的转录调节因子(EBPs) | 第18-20页 |
·σ54因子的功能及其调控的代谢途径 | 第20页 |
·苏云金芽胞杆菌σ54调控的代谢途径 | 第20页 |
·参与肌氨酸代谢途径的肌氨酸氧化酶的研究进展 | 第20-26页 |
·微生物肌氨酸氧化酶的的理化性质 | 第21-23页 |
·微生物肌氨酸氧化酶的的分子生物学特性 | 第23-26页 |
·立题依据、研究内容和目的意义 | 第26-27页 |
·立题依据 | 第26页 |
·研究内容 | 第26页 |
·目的意义 | 第26-27页 |
第二章 材料与方法 | 第27-41页 |
·实验材料 | 第27-30页 |
·菌株与质粒 | 第27-29页 |
·培养基 | 第29页 |
·抗生素 | 第29页 |
·酶与生化试剂 | 第29-30页 |
·溶液与缓冲液 | 第30页 |
·实验仪器设备 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-41页 |
·Bt HD73 菌株基因组提取 | 第31页 |
·目的基因的扩增 | 第31-34页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第34页 |
·酶切反应 | 第34-35页 |
·DNA 片段连接 | 第35页 |
·E. coli 热激感受态细胞制备与转化 | 第35页 |
·Bt 电击感受态细胞制备与转化 | 第35-36页 |
·序列测定及分析 | 第36页 |
·同源重组突变体的筛选 | 第36页 |
·Bt 菌株生长曲线的测定 | 第36页 |
·蛋白定量及 SDS-PAGE 电泳 | 第36-37页 |
·β-半乳糖苷酶酶活分析 | 第37页 |
·Bt 总 RNA 的提取和纯化 | 第37-38页 |
·RT-PCR 分析 | 第38-39页 |
·SMARTerTMRACE | 第39-40页 |
·DNA 芯片分析 | 第40页 |
·唯一氮源实验 | 第40页 |
·蛋白诱导表达 | 第40页 |
·其他方法 | 第40-41页 |
第三章 结果与分析 | 第41-71页 |
·sox 基因簇的序列分析 | 第41页 |
·sox 基因簇的转录分析 | 第41-46页 |
·RNA 提取及纯化 | 第41-42页 |
·RT-PCR 分析 | 第42-43页 |
·DNA 芯片分析 | 第43-44页 |
·转录起始位点(Transcriptional Start Sites,TSSs)分析 | 第44-46页 |
·soxR 基因缺失突变株的构建与特点 | 第46-52页 |
·soxR 基因缺失突变盒的构建 | 第46-48页 |
·soxR 基因突变质粒的构建与鉴定 | 第48-49页 |
·soxR 基因缺失突变体的筛选与验证 | 第49-50页 |
·soxR 基因的突变不影响生长速度 | 第50-51页 |
·soxR 基因的突变不影响晶体蛋白产量 | 第51-52页 |
·soxB、soxR 和 soxC 基因启动子的调控模式 | 第52-58页 |
·soxB 基因启动子的调控 | 第52-54页 |
·soxR 基因启动子的调控 | 第54-55页 |
·soxC 基因启动子的调控 | 第55-58页 |
·肌氨酸对 sox 基因簇转录活性的影响 | 第58-59页 |
·SoxR 结合位点分析 | 第59-64页 |
·不同长度的 soxB 和 soxC 基因启动子转录分析载体的构建 | 第59-60页 |
·soxB、soxC 基因截短启动子的转录活性分析 | 第60-61页 |
·SoxR 蛋白的表达 | 第61-64页 |
·soxB 和 soxI 基因插入失活突变株的构建与筛选 | 第64-70页 |
·soxB 基因插入失活突变株的构建与筛选 | 第64-67页 |
·soxI 基因插入失活突变株的构建与筛选 | 第67-70页 |
·不同氮源条件下,出发菌株与突变菌株的生长情况比较 | 第70-71页 |
第四章 讨论 | 第71-78页 |
·σ54调控的肌氨酸代谢途径分布 | 第71-75页 |
·Bt 中依赖于σ54因子的 sox 基因簇的转录特点 | 第75-76页 |
·Bt HD73 中 sox 基因簇的调控模式 | 第76-77页 |
·sox 基因簇的表达调控模型 | 第76页 |
·sox 基因簇可能参与的代谢途径 | 第76-77页 |
·下一步展望 | 第77-78页 |
第五章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
作者简历 | 第88页 |