| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一部分 胰岛淀粉样多肽片段肽的序列与聚集性研究 | 第10-38页 |
| 一、前言 | 第10-15页 |
| 1. 淀粉样蛋白疾病 | 第10-11页 |
| 2. IAPP及其在糖尿病中的作用 | 第11-12页 |
| 3. 影响IAPP聚集的因素 | 第12-14页 |
| 4. 短肽聚集性与序列之间的关系 | 第14-15页 |
| 二、实验方法与材料 | 第15-20页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第15-16页 |
| 2. 实验仪器 | 第16-17页 |
| 3. 实验方法 | 第17-20页 |
| ·多肽固相合成(SPPS) | 第17页 |
| ·高效液相色谱(HPLC)纯化与质谱(MS)鉴定 | 第17页 |
| ·圆二色光谱(CD)法检测 | 第17-18页 |
| ·透射电子显微镜(TEM)检测 | 第18页 |
| ·分子排阻色谱(SEC)检测 | 第18-19页 |
| ·硫磺素T荧光检测(ThT) | 第19页 |
| ·细胞毒性实验(MTT) | 第19-20页 |
| ·统计分析 | 第20页 |
| 三、实验结果 | 第20-34页 |
| 1. 短肽序列的合成与突变 | 第20-22页 |
| 2. 二级结构的圆二色光谱测定 | 第22-25页 |
| 3. ThT荧光实验对聚集动力学的检测 | 第25-29页 |
| 4. SEC法测定多肽寡聚化状态 | 第29-31页 |
| 5. MTT法测定细胞毒性 | 第31-34页 |
| 四、结论与讨论 | 第34-38页 |
| 1. 短肽的序列与其聚集性之间的关系 | 第34-35页 |
| 2. 20位氨基酸在hIAPP聚集过程中的重要作用 | 第35页 |
| 3. 溶液寡聚化状态对聚集的影响 | 第35-36页 |
| 4. hIAPP短肽聚集的机制及其意义 | 第36-37页 |
| 5. 展望 | 第37-38页 |
| 第二部分 咪唑环在hIAPP聚集中的影响研究 | 第38-58页 |
| 一、前言 | 第38-39页 |
| 二、实验材料 | 第39页 |
| 三、实验方法 | 第39-42页 |
| 1. DEPC法修饰hIAPP | 第39页 |
| 2. 多肽的聚集实验 | 第39-40页 |
| 3. 脂质体膜囊的制备 | 第40页 |
| 4. 染料外泄实验(dye leakage assay) | 第40页 |
| 5. 圆二色光谱法 | 第40页 |
| 6. 淀粉样纤维的形成和ThT检测 | 第40页 |
| 7. 透射电子显微镜检测 | 第40-41页 |
| 8. 衰减全反射傅立叶变换红外光谱(ATR-FTIR)检测 | 第41页 |
| 9. 电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测量 | 第41页 |
| 10. 副本交换分子动力学(REMD)模拟计算 | 第41-42页 |
| 11. 统计分析 | 第42页 |
| 四、实验结果 | 第42-54页 |
| 1. DEPC修饰 | 第42-43页 |
| 2. hIAPP与细胞膜的相互作用 | 第43-45页 |
| 3. hIAPP与金属离子的相互作用 | 第45-47页 |
| 4. 单体结构的分子动力学模拟计算(REMD) | 第47-54页 |
| 五、结论与讨论 | 第54-58页 |
| 1. 利用DEPC修饰蛋白质 | 第54页 |
| 2. 咪唑环参与hIAPP与膜的相互作用 | 第54页 |
| 3. hIAPP与金属离子的相互作用 | 第54-55页 |
| 4. hIAPP及DMI在不同pH下的单体结构 | 第55页 |
| 5. hIAPP的pH依赖性聚集动力学特性与咪唑环之间的联系 | 第55-56页 |
| 6. 咪唑环在hIAPP聚集过程中的作用 | 第56-57页 |
| 7. 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 综述 胰岛淀粉样多肽的研究进展 | 第70-95页 |
| 一、胰岛淀粉样多肽的简介 | 第71-72页 |
| 二、胰岛淀粉样多肽的生物合成 | 第72-73页 |
| 三、胰岛淀粉样多肽的生理功能 | 第73-74页 |
| 四、hIAPP的结构、聚集性、及其与2型糖尿病的关系 | 第74-78页 |
| 1. hIAPP寡聚体的结构及其对β细胞的影响 | 第75-76页 |
| 2. hIAPP淀粉样聚集体的结构及其对p细胞的影响 | 第76-78页 |
| 五、影响IAPP聚集性的因素 | 第78-83页 |
| 1. 生物因素 | 第78-81页 |
| 2. 化学因素 | 第81-83页 |
| 3. 物理因素 | 第83页 |
| 六、抑制聚集性的意义 | 第83-84页 |
| 七、hIAPP的聚集抑制剂 | 第84-85页 |
| 1. 小分子抑制剂 | 第84-85页 |
| 2. 多肽类抑制剂 | 第85页 |
| 八、结语 | 第85-86页 |
| 九、参考文献 | 第86-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
| 附录1 攻读学位期间发表论文目录 | 第97-98页 |
