| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 英文缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 表达嵌合抗原受体的慢病毒载体的构建及病毒的包装 | 第13-35页 |
| ·序言 | 第13-14页 |
| ·材料、试剂、仪器 | 第14-16页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·试剂/试剂盒 | 第14-15页 |
| ·仪器 | 第15-16页 |
| ·方法与步骤 | 第16-30页 |
| ·Hinge-TM-CD137-CD3ζ基因序列的获得 | 第16-19页 |
| ·Hinge-TM-CD137-CD3ζ与载体 pCDH-CMV-MCS 的连接 | 第19-21页 |
| ·EGFRvⅢ scFv 基因序列的获得 | 第21-22页 |
| ·EGFRvⅢ scFv 与载体 pCDH-CD137-CD3ζ的连接 | 第22-24页 |
| ·慢病毒的包装及病毒滴度的测定 | 第24-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·pCDH-CD137-CD3ζ载体鉴定 | 第30页 |
| ·pCDH-CAR 载体鉴定 | 第30-31页 |
| ·慢病毒的包装与滴度测定 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-35页 |
| 第二章 嵌合抗原受体的转导、表达及功能测定 | 第35-55页 |
| ·序言 | 第35-36页 |
| ·材料、试剂、仪器 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂/试剂盒 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37页 |
| ·方法与步骤 | 第37-46页 |
| ·人外周血 CD3~+T 细胞的分离 | 第37-38页 |
| ·T 细胞的激活 | 第38-40页 |
| ·LV- EGFRvⅢ/CAR 感染 T 细胞 | 第40页 |
| ·流式细胞仪检测 T 细胞表面 CAR 的表达 | 第40-41页 |
| ·Western blot 检测 T 细胞中 CAR 的表达 | 第41-43页 |
| ·~(51)Cr 释放法检测 CAR~+T 细胞的细胞毒性 | 第43-44页 |
| ·ELISA 法检测细胞因子 IFN-γ的分泌 | 第44-45页 |
| ·动物试验 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·修饰 T 细胞表面 CAR 表达 | 第46页 |
| ·修饰 T 细胞中 CAR 表达 | 第46-47页 |
| ·修饰 T 细胞的选择性杀伤作用 | 第47-48页 |
| ·修饰 T 细胞的 IFN-γ分泌 | 第48页 |
| ·修饰 T 细胞在裸鼠体内对肿瘤的杀伤作用 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-55页 |
| ·靶抗原的选择 | 第49-50页 |
| ·CAR 的结构设计 | 第50-52页 |
| ·CAR~+T 细胞的功能研究 | 第52-53页 |
| ·安全性的研究 | 第53-55页 |
| 第三章 小结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 文献综述 | 第61-71页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第73-74页 |
