| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·CYP7A1 基因的研究进展 | 第10-14页 |
| ·CYP7A1 基因的结构特点 | 第10页 |
| ·CYP7A1 基因的表达和调控 | 第10-12页 |
| ·CYP7A1 基因与代谢疾病的相关研究 | 第12-14页 |
| ·展望 | 第14页 |
| ·P53 蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
| ·P53 蛋白的结构特点 | 第14页 |
| ·P53 蛋白的转录调控 | 第14-15页 |
| ·P53 蛋白对靶基因的转录激活/抑制功能 | 第15页 |
| ·突变体 P53 蛋白 | 第15-16页 |
| ·P53 蛋白与 CYP7A1 基因 | 第16页 |
| ·真核生物基因启动子序列克隆和功能分析方法 | 第16-21页 |
| ·真核生物基因启动子结构 | 第16-17页 |
| ·启动子克隆方法的研究进展 | 第17-18页 |
| ·启动子分析方法和策略 | 第18-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 CYP7A1 基因启动子区域克隆及序列分析 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·实验鹅品种来源及样品的采集和制备 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·菌株和克隆载体 | 第22-23页 |
| ·主要药品及试剂 | 第23页 |
| ·常规溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·引物的设计与合成 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·碱裂解法提取鹅基因组 DNA | 第24-25页 |
| ·引物制备 | 第25页 |
| ·基因组步移 PCR 扩增程序 | 第25-27页 |
| ·1%琼脂糖凝胶的制作及电泳检测 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第28页 |
| ·PCR 产物与 T5 载体连接 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28-29页 |
| ·连接产物的鉴定 | 第29页 |
| ·所需软件 | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-32页 |
| ·CYP7A1 基因启动子区的克隆 | 第30-31页 |
| ·序列特征分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 3 CYP7A1 基因 5’调控序列 P53 结合位点的初步研究 | 第33-47页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·细胞系 | 第33页 |
| ·菌株和载体 | 第33页 |
| ·主要药品和工具酶 | 第33页 |
| ·试剂盒 | 第33页 |
| ·主要仪器和设备 | 第33-34页 |
| ·引物合成和测序 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-40页 |
| ·鹅 CYP7A1 基因启动子缺失体的构建 | 第34页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·PCR 反应 | 第35-36页 |
| ·缺失中间载体构建 | 第36页 |
| ·提取中间载体质粒 DNA | 第36-37页 |
| ·缺失体中间载体的酶切及目的片段的回收 | 第37页 |
| ·缺失体片段的回收和纯化 | 第37页 |
| ·连接 | 第37-38页 |
| ·重组质粒的转化鉴定 | 第38页 |
| ·DF-1 细胞培养 | 第38页 |
| ·细胞转染 | 第38-39页 |
| ·细胞转染结果检测 | 第39-40页 |
| ·结果 | 第40-44页 |
| ·缺失突变体 PCR 扩增、载体酶切鉴定结果 | 第40-43页 |
| ·鹅 CYP7A1 基因启动子重组质粒的活性测定和分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| 4 结论与展望 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第47页 |
| ·展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 个人简介 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |