| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-35页 |
| 1 NR5A2基因的结构特征 | 第13-17页 |
| ·基因家族概况 | 第13-14页 |
| ·NR5A2基因的结构域 | 第14-16页 |
| ·不同物种间NR5A2基因结构的比较 | 第16-17页 |
| 2 NR5A2基因的表达 | 第17页 |
| 3 NR5A2基因的调控 | 第17-22页 |
| ·PISAY对NR5A2的调节作用 | 第20-21页 |
| ·其他可能参与NR5A2基因调控的转录因子 | 第21页 |
| ·不同物种NR5A基因启动子的比较 | 第21-22页 |
| 4 NR5A2基因的生理功能 | 第22-26页 |
| ·NR5A2在脂类代谢中的作用 | 第22-25页 |
| ·NR5A2与胆固醇逆向转运 | 第22页 |
| ·NR3A2与胆汁酸BA的自我平衡 | 第22-25页 |
| ·NR5A2在卵巢中的作用 | 第25-26页 |
| 5 本实验研究的内容及意义 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-35页 |
| 第二章 试验研究 | 第35-64页 |
| 1 材料与方法 | 第35-45页 |
| ·实验动物 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·引物设计 | 第37-38页 |
| ·主要生物学数据库及软件 | 第38-39页 |
| ·溶液的配制 | 第39-40页 |
| ·卵巢采样所配溶液 | 第39-40页 |
| ·电泳液配制 | 第40页 |
| ·电泳试剂的配制 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·组织RNA的提取及反转录 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增 | 第41页 |
| ·PCR产物的回收及测序 | 第41页 |
| ·荧光实时定量PCR检测 | 第41-42页 |
| ·免疫印迹分析(western blot) | 第42-43页 |
| ·RNA干扰 | 第43-45页 |
| ·猪卵泡颗粒细胞体外培养和传代 | 第43页 |
| ·siRNA合成 | 第43-44页 |
| ·转染siRNA(以6孔板为例) | 第44页 |
| ·细胞总RNA的提取与浓度检测 | 第44-45页 |
| ·凋亡相关基因检测 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-61页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因的克隆与序列分析 | 第45-53页 |
| ·二花脸猪组织RNA提取结果 | 第45-46页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因编码区序列扩增 | 第46页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因核苷酸序列分析 | 第46-48页 |
| ·二花脸猪NR5A2氨基酸序列分析 | 第48-49页 |
| ·二花脸猪NR5A2蛋白理化性质及疏水性分析 | 第49-51页 |
| ·二花脸猪NR5A2三级蛋白结构预测 | 第51-52页 |
| ·哺乳动物NR5A2基因进化和系统发育树分析 | 第52-53页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因组织表达特征分析 | 第53-54页 |
| ·二花脸NR5A2基因RT-PCR扩增结果 | 第53页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因组织表达谱分析 | 第53-54页 |
| ·二花脸猪与商品猪卵巢组织NR5A2基因MRNA表达水平差异 | 第54-56页 |
| ·二花脸猪与商品猪卵巢组织NR5A2蛋白表达水平差异 | 第56-57页 |
| ·猪卵泡闭锁过程中NRSA2基因表达水平的变化 | 第57-59页 |
| ·猪卵泡闭锁过程中NR5A2基因表达水平 | 第57-58页 |
| ·NR5A2基因表达水平与卵泡液中雌激素、孕酮浓度的相关性分析 | 第58-59页 |
| ·NR5A2在猪卵泡颗粒细胞凋亡中的作用 | 第59-61页 |
| ·RNA干扰阻抑NR5A2基因的表达 | 第59页 |
| ·抑制NR5A2对颗粒细胞凋亡相关基因表达水平的影响 | 第59-60页 |
| ·抑制NR5A2对类固醇生成相关基因表达水平的影响 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| ·二花脸猪NR5A2基因的序列和结构特征 | 第61页 |
| ·二花脸猪NR5A2的组织表达特征 | 第61-62页 |
| ·二花脸猪卵巢组织NR5A2基因和蛋白表达水平 | 第62页 |
| ·NR5A2基因表达水平与猪卵泡闭锁的关系 | 第62页 |
| ·NR5A2基因在猪卵泡颗粒细胞增殖和凋亡中的作用 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 全文创新点 | 第69-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |