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棉铃虫Bt抗性基因遗传多样性及钙粘蛋白胞质区突变基因的功能表达

目录第1-7页
摘要第7-10页
ABSTRACT第10-14页
第一章 文献综述第14-48页
 1 棉铃虫的危害及Bt棉花种植的生态效应第14-17页
 2 Bt毒素及其应用第17-26页
   ·Bt毒素的种类和命名第17-18页
   ·Bt Cry毒素的结构第18-20页
   ·Bt Cry毒素的作用机理第20-25页
   ·苏云金芽孢杆菌的应用第25-26页
 3 昆虫Bt结合受体第26-33页
   ·钙粘蛋白第27-31页
   ·氨肽酶N第31-32页
   ·碱性磷酸酯酶第32页
   ·其它受体第32-33页
 4 昆虫Bt抗性机理第33-39页
   ·昆虫中肠Bt受体基因变异第33-38页
   ·中肠蛋白酶变异第38-39页
   ·免疫增强第39页
 5 Bt抗性监测及抗性治理策略第39-45页
   ·抗性监测第39-42页
   ·抗性治理策略第42-45页
 6 本研究的目的和意义第45-48页
第二章 棉铃虫田间种群Bt毒素Cry1Ac抗性的检测第48-64页
 摘要第48-50页
 1 材料与方法第50-52页
   ·试验材料第50-51页
   ·试验方法第51-52页
 2 结果与分析第52-58页
   ·田间棉铃虫种群对Cry1Ac毒素的毒力反应第52-58页
   ·诊断剂量下的存活率(抗性个体频率)第58页
 3 讨论第58-64页
   ·北方棉区棉铃虫对Cry1Ac毒素产生早期抗性的原因第58-60页
   ·延缓我国田间棉铃虫抗性发展的因素第60-61页
   ·我国棉铃虫Bt抗性治理措施第61-64页
第三章 棉铃虫田间种群Bt抗性基因的遗传多样性第64-82页
 摘要第64-65页
 1 材料与方法第65-70页
   ·供试昆虫第65-66页
   ·Cry1Ac毒素的制备与生物测定方法第66页
   ·F_1筛选法第66-68页
   ·棉铃虫抗性品系的构建第68-69页
   ·田间抗性基因的遗传分析及等位基因互补性测验第69-70页
   ·田间抗性棉铃虫钙粘蛋白基因cDNA的克隆第70页
   ·数据分析第70页
 2 结果与分析第70-78页
   ·山东夏津棉铃虫田间种群(2009年)的F_1检测第70-71页
   ·山东夏津田间棉铃虫(2009年)Cry1Ac抗性基因的显隐性及抗性个体基因型的鉴定第71-73页
   ·棉铃虫田间抗性品系对Cry1Ac的抗性水平第73-74页
   ·田间抗性基因的显性度及其与r_1的等位互补性第74-76页
   ·田间棉铃虫抗性品系钙粘蛋白基因的鉴定第76-78页
 3 讨论第78-82页
   ·钙粘蛋白基因突变与棉铃虫Bt抗性第78-79页
   ·棉铃虫Bt抗性基因的遗传多样性第79-80页
   ·棉铃虫Bt抗性监测——多种方法的综合运用第80-82页
第四章 棉铃虫钙粘蛋白胞质区缺失突变导致Cry1Ac非隐性抗性第82-112页
 摘要第82-83页
 1 材料与方法第83-95页
   ·供试昆虫第83-84页
   ·主要试剂与仪器第84页
   ·生物测定第84-85页
   ·钙粘蛋白胞质区缺失突变基因(r_(15))的鉴定与检测第85-86页
   ·棉铃虫钙粘蛋白胞质区缺失突变品系(XJ-r_(15))的分离纯化第86-87页
   ·XJ-r_(15)品系抗性遗传方式的研究第87页
   ·等位基因互补性检测第87页
   ·抗性连锁分析第87-88页
   ·配基结合及Western Blot分析第88-89页
   ·4种钙粘蛋白表达载体的构建第89-91页
   ·重组Bacmid的获得第91-92页
   ·重组杆状病毒的制备及其对昆虫细胞的感染第92-93页
   ·免疫荧光定位分析第93-94页
   ·细胞毒力测定第94页
   ·数据分析第94-95页
 2 结果与分析第95-106页
   ·钙粘蛋白胞质区缺失突变基因r_(15)的鉴定第95-97页
   ·XJ-r_(15)抗性品系对Cry1Ac的抗性遗传方式及其交互抗性第97-99页
   ·r_(15)与r_1的等位互补检测及r_(15)与XJ-r_(15)品系Cry1Ac抗性的连锁分析第99页
   ·棉铃虫中肠BBMVs钙粘蛋白检测及Cry1Ac与钙粘蛋白的结合分析第99-100页
   ·4种钙粘蛋白基因在昆虫Sf9细胞中的表达第100-103页
   ·免疫荧光定位分析第103-105页
   ·Cry1Ac毒素对Sf9细胞的毒力分析第105-106页
 3 讨论第106-112页
   ·钙粘蛋白胞质区突变基因(r_(15))与Cry1Ac毒力的关系第106-109页
   ·r_(15)介导的棉铃虫Cry1Ac非隐性抗性的分子模型第109-112页
全文总结第112-114页
参考文献第114-134页
攻读博士学位期间发表的论文第134-136页
致谢第136页

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