目录 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-48页 |
1 棉铃虫的危害及Bt棉花种植的生态效应 | 第14-17页 |
2 Bt毒素及其应用 | 第17-26页 |
·Bt毒素的种类和命名 | 第17-18页 |
·Bt Cry毒素的结构 | 第18-20页 |
·Bt Cry毒素的作用机理 | 第20-25页 |
·苏云金芽孢杆菌的应用 | 第25-26页 |
3 昆虫Bt结合受体 | 第26-33页 |
·钙粘蛋白 | 第27-31页 |
·氨肽酶N | 第31-32页 |
·碱性磷酸酯酶 | 第32页 |
·其它受体 | 第32-33页 |
4 昆虫Bt抗性机理 | 第33-39页 |
·昆虫中肠Bt受体基因变异 | 第33-38页 |
·中肠蛋白酶变异 | 第38-39页 |
·免疫增强 | 第39页 |
5 Bt抗性监测及抗性治理策略 | 第39-45页 |
·抗性监测 | 第39-42页 |
·抗性治理策略 | 第42-45页 |
6 本研究的目的和意义 | 第45-48页 |
第二章 棉铃虫田间种群Bt毒素Cry1Ac抗性的检测 | 第48-64页 |
摘要 | 第48-50页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·试验材料 | 第50-51页 |
·试验方法 | 第51-52页 |
2 结果与分析 | 第52-58页 |
·田间棉铃虫种群对Cry1Ac毒素的毒力反应 | 第52-58页 |
·诊断剂量下的存活率(抗性个体频率) | 第58页 |
3 讨论 | 第58-64页 |
·北方棉区棉铃虫对Cry1Ac毒素产生早期抗性的原因 | 第58-60页 |
·延缓我国田间棉铃虫抗性发展的因素 | 第60-61页 |
·我国棉铃虫Bt抗性治理措施 | 第61-64页 |
第三章 棉铃虫田间种群Bt抗性基因的遗传多样性 | 第64-82页 |
摘要 | 第64-65页 |
1 材料与方法 | 第65-70页 |
·供试昆虫 | 第65-66页 |
·Cry1Ac毒素的制备与生物测定方法 | 第66页 |
·F_1筛选法 | 第66-68页 |
·棉铃虫抗性品系的构建 | 第68-69页 |
·田间抗性基因的遗传分析及等位基因互补性测验 | 第69-70页 |
·田间抗性棉铃虫钙粘蛋白基因cDNA的克隆 | 第70页 |
·数据分析 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-78页 |
·山东夏津棉铃虫田间种群(2009年)的F_1检测 | 第70-71页 |
·山东夏津田间棉铃虫(2009年)Cry1Ac抗性基因的显隐性及抗性个体基因型的鉴定 | 第71-73页 |
·棉铃虫田间抗性品系对Cry1Ac的抗性水平 | 第73-74页 |
·田间抗性基因的显性度及其与r_1的等位互补性 | 第74-76页 |
·田间棉铃虫抗性品系钙粘蛋白基因的鉴定 | 第76-78页 |
3 讨论 | 第78-82页 |
·钙粘蛋白基因突变与棉铃虫Bt抗性 | 第78-79页 |
·棉铃虫Bt抗性基因的遗传多样性 | 第79-80页 |
·棉铃虫Bt抗性监测——多种方法的综合运用 | 第80-82页 |
第四章 棉铃虫钙粘蛋白胞质区缺失突变导致Cry1Ac非隐性抗性 | 第82-112页 |
摘要 | 第82-83页 |
1 材料与方法 | 第83-95页 |
·供试昆虫 | 第83-84页 |
·主要试剂与仪器 | 第84页 |
·生物测定 | 第84-85页 |
·钙粘蛋白胞质区缺失突变基因(r_(15))的鉴定与检测 | 第85-86页 |
·棉铃虫钙粘蛋白胞质区缺失突变品系(XJ-r_(15))的分离纯化 | 第86-87页 |
·XJ-r_(15)品系抗性遗传方式的研究 | 第87页 |
·等位基因互补性检测 | 第87页 |
·抗性连锁分析 | 第87-88页 |
·配基结合及Western Blot分析 | 第88-89页 |
·4种钙粘蛋白表达载体的构建 | 第89-91页 |
·重组Bacmid的获得 | 第91-92页 |
·重组杆状病毒的制备及其对昆虫细胞的感染 | 第92-93页 |
·免疫荧光定位分析 | 第93-94页 |
·细胞毒力测定 | 第94页 |
·数据分析 | 第94-95页 |
2 结果与分析 | 第95-106页 |
·钙粘蛋白胞质区缺失突变基因r_(15)的鉴定 | 第95-97页 |
·XJ-r_(15)抗性品系对Cry1Ac的抗性遗传方式及其交互抗性 | 第97-99页 |
·r_(15)与r_1的等位互补检测及r_(15)与XJ-r_(15)品系Cry1Ac抗性的连锁分析 | 第99页 |
·棉铃虫中肠BBMVs钙粘蛋白检测及Cry1Ac与钙粘蛋白的结合分析 | 第99-100页 |
·4种钙粘蛋白基因在昆虫Sf9细胞中的表达 | 第100-103页 |
·免疫荧光定位分析 | 第103-105页 |
·Cry1Ac毒素对Sf9细胞的毒力分析 | 第105-106页 |
3 讨论 | 第106-112页 |
·钙粘蛋白胞质区突变基因(r_(15))与Cry1Ac毒力的关系 | 第106-109页 |
·r_(15)介导的棉铃虫Cry1Ac非隐性抗性的分子模型 | 第109-112页 |
全文总结 | 第112-114页 |
参考文献 | 第114-134页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第134-136页 |
致谢 | 第136页 |