| 致谢 | 第1-7页 |
| 前言 | 第7-11页 |
| 中文摘要 | 第11-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 论文创新点 | 第21-22页 |
| 缩略词表 | 第22-28页 |
| 1. Racl异戊烯化激活介导ICA促ES细胞心肌分化研究 | 第28-48页 |
| 引言 | 第28-29页 |
| ·实验材料 | 第29-31页 |
| ·细胞株 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·试剂、抗体及耗材 | 第30页 |
| ·常用液体配制 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-36页 |
| ·ES细胞支持培养 | 第31-32页 |
| ·ICA诱导ES细胞分化心肌细胞培养 | 第32页 |
| ·免疫荧光法检测心肌特异性蛋白α-actinin表达 | 第32页 |
| ·荧光显微镜检测EBs内ROS水平 | 第32-33页 |
| ·Western blot | 第33-34页 |
| ·siRNA转染 | 第34-35页 |
| ·Rac1△质粒构建与转染 | 第35页 |
| ·免疫共沉淀 | 第35-36页 |
| ·数据分析 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-46页 |
| ·细胞形态观察及肌小节结构蛋白α-actinin表达 | 第36页 |
| ·ICA促ES细胞分化为心肌细胞 | 第36-38页 |
| ·ICA对Racl膜定位的影响 | 第38页 |
| ·siRNA沉默Racl后对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第38-39页 |
| ·法尼基转移酶抑制剂FTI-277对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第39-40页 |
| ·牛儿基转移酶抑制剂GGTI-298对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第40-42页 |
| ·Rac1 CAAX缺失对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第42-43页 |
| ·Rac1-GTP装填抑制剂NSC23766对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第43-45页 |
| ·ICA对d 5 EBs Rac1-p67phox复合物在细胞膜上共定位的影响 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 2. miR-126参与VEGF及其受体Flk-1激活介导ICA促ES细胞心肌分化研究 | 第48-61页 |
| 引言 | 第48-49页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·细胞株 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49页 |
| ·试剂、抗体及耗材 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-52页 |
| ·荧光显微镜检测EBs内ROS水平 | 第50页 |
| ·Western blot | 第50-51页 |
| ·siRNA转染 | 第51页 |
| ·qRT-PCR | 第51页 |
| ·miRNA转染 | 第51-52页 |
| ·免疫共沉淀 | 第52页 |
| ·数据分析 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-59页 |
| ·VEGF及其受体Flk-1对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第52-53页 |
| ·siRNA沉默Flk-1对ICA促ES细胞心肌分化的影响 | 第53页 |
| ·miRNAs芯片检测ICA促ES细胞心肌分化过程中miRNAs差异表达 | 第53-57页 |
| ·miR-126拟似物对ES细胞心肌分化的影响 | 第57页 |
| ·miR-126抑制剂对ES细胞心肌分化的影响 | 第57-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-61页 |
| 3. miR-126-Rac1/p67phox-ROS-Ca~(2+)信号通路在ICA促ES细胞心肌分化中的作用研究 | 第61-71页 |
| 引言 | 第61-62页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·细胞株 | 第62页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·试剂、抗体及耗材 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-65页 |
| ·Western blot | 第63页 |
| ·miRNA转染 | 第63页 |
| ·EBs内[Ca~(2+)]_i浓度测定 | 第63-64页 |
| ·Percoll不连续密度梯度离心法分离ES细胞衍生心肌细胞 | 第64页 |
| ·ES细胞衍生心肌细胞内钙瞬变测定 | 第64-65页 |
| ·数据分析 | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-68页 |
| ·miR-126抑制剂对ICA促内质网钙调蛋白表达的影响 | 第65-66页 |
| ·miR-126抑制剂对ICA促EBs内[Ca~(2+)]_i增加的影响 | 第66-67页 |
| ·miR-126抑制剂对ES细胞衍生心肌细胞钙瞬变的影响 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 综述：microRNAs调控干细胞心肌分化研究现状 | 第75-84页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 附录一：代谢性谷氨酸受体5在小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞中的作用研究 | 第84-98页 |
| 附录二：mGluR5-Homer-PIKE-PI3K信号通路在ROS介导淫羊藿苷促小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞中的作用研究 | 第98-108页 |
| 作者简历及在读期间所取得的科研成果 | 第108-111页 |
