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冷应激对雏鸡组织热休克蛋白和小肠免疫功能的影响

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-17页
   ·热休克蛋白第12-13页
   ·应激对热休克蛋白的影响第13-15页
   ·应激对免疫功能的影响第15-16页
   ·实验的目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-25页
   ·试验的总体设计第17页
     ·急性应激试验第17页
     ·慢性应激试验第17页
   ·样品的采集与处理第17页
     ·组织样品的采集与处理第17页
   ·主要仪器和试剂第17-18页
     ·主要仪器第17-18页
     ·主要试剂第18页
   ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 基因的克隆、原核表达、多克隆抗体的制备第18-24页
     ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 基因序列的克隆与鉴定第18-22页
     ·鸡组织热休克蛋白 mRNA 及小肠免疫球蛋白和细胞因子 mRNA 表达的检测第22-23页
     ·鸡组织 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 蛋白表达情况的检测第23-24页
   ·试验数据的分析与统计第24-25页
3 结果与分析第25-51页
   ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 多克隆抗体的制备第25-30页
     ·组织中总 RNA 的提取与鉴定第25页
     ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 基因的 PCR 扩增结果第25-26页
     ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 mRNA 基因序列的测序结果第26页
     ·重组表达载体的构建与鉴定第26-27页
     ·融合蛋白的表达、鉴定与纯化第27-29页
     ·多克隆抗体的制备和鉴定结果第29-30页
   ·实时 PCR 检测方法的建立第30-31页
     ·鸡热休克蛋白基因和免疫相关基因 real-time PCR 扩增结果第30-31页
   ·冷应激对鸡心脏热休克蛋白 mRNA 和蛋白表达影响的检测结果第31-33页
     ·急性冷应激对鸡心脏 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27mRNA 表达影响的检测结果第31-32页
     ·慢性冷应激对鸡心脏 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27mRNA 表达影响的检测结果第32-33页
   ·冷应激对鸡肾脏热休克蛋白 mRNA 和蛋白表达影响的检测结果第33-35页
     ·急性冷应激对鸡肾脏 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第33-34页
     ·慢性冷应激对鸡肾脏 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第34-35页
   ·冷应激对鸡脾脏、胸腺和法氏囊热休克蛋白 mRNA 和蛋白表达影响的检测结果第35-41页
     ·急、慢性冷应激对鸡脾脏 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第35-37页
     ·急、慢性冷应激对鸡胸腺 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第37-39页
     ·急、慢性冷应激对鸡法氏囊 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第39-41页
   ·冷应激对鸡十二指肠、空肠和回肠的热休克蛋白 mRNA 和蛋白表达影响的检测结果第41-46页
     ·急、慢性冷应激对鸡十二指肠 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第41-42页
     ·急、慢性冷应激对鸡空肠 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第42-44页
     ·急、慢性冷应激对鸡回肠 Hsp90、Hsp70、Hsp60 mRNA 和蛋白表达及 Hsp40、Hsp27 mRNA 表达影响的检测结果第44-46页
   ·冷应激对鸡十二指肠、空肠、回肠的免疫球蛋白和细胞因子 mRNA 表达影响的检测结果第46-51页
     ·急、慢性冷应激对鸡十二指肠、空肠、回肠的 IgM、IgA 和 IgG mRNA 表达影响的检测结果第46-48页
     ·急、慢性冷应激对鸡十二指肠、空肠、回肠 plgR、TGF、IL-4 和 IL-10 mRNA表达影响的检测结果第48-51页
4 讨论第51-57页
   ·鸡 Hsp90、Hsp70 和 Hsp60 的克隆、表达及多克隆抗体的制备第51-52页
   ·冷应激对鸡组织热休克蛋白的影响第52-54页
   ·冷应激对鸡十二指肠、空肠、回肠免疫球蛋白和细胞因子的影响第54-57页
5 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-67页
附录第67-68页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第68页

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