| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-19页 |
| 第一章 综述 | 第19-46页 |
| 1 高密度脂蛋白 | 第19-30页 |
| ·脂蛋白 | 第19-22页 |
| ·脂蛋白的分类 | 第19-20页 |
| ·脂蛋白的结构 | 第20-21页 |
| ·脂蛋白的代谢 | 第21-22页 |
| ·高密度脂蛋白的结构与功能 | 第22-27页 |
| ·新生的盘状 HDL 的形成 | 第25-26页 |
| ·球形 HDL 的形成 | 第26页 |
| ·HDL 中胆固醇的摄取 | 第26-27页 |
| ·HDL 作为输送载体的应用 | 第27-30页 |
| ·抗癌药物的载体 | 第27-28页 |
| ·抗病毒药物的载体 | 第28页 |
| ·抗真菌药物的载体 | 第28页 |
| ·医学影像造影剂的载体 | 第28-29页 |
| ·基因输送的载体 | 第29-30页 |
| 2 磁共振成像(MRI) | 第30-44页 |
| ·MRI 的原理 | 第30页 |
| ·MRI 造影剂 | 第30-31页 |
| ·造影剂的分类 | 第31-32页 |
| ·顺磁性造影剂 | 第32页 |
| ·超顺磁性造影剂 | 第32页 |
| ·MRI 造影剂的体内分布和应用 | 第32-44页 |
| ·细胞外液造影剂 | 第33-34页 |
| ·血池造影剂 | 第34-36页 |
| ·白蛋白结合的钆螯合物 | 第34页 |
| ·连接钆螯合物的高聚物 | 第34-36页 |
| ·超小超顺磁氧化铁 | 第36页 |
| ·靶向造影剂 | 第36-44页 |
| ·肝胆靶向的造影剂 | 第36-37页 |
| ·单核吞噬细胞系统的靶向造影剂 | 第37-38页 |
| ·靶向淋巴结的造影剂 | 第38页 |
| ·靶向脑部的造影剂 | 第38-39页 |
| ·主动靶向或细胞标记的造影剂 | 第39-41页 |
| ·生物激活造影剂 | 第41-44页 |
| ·pH 敏感的造影剂 | 第41页 |
| ·酶敏感的造影剂 | 第41-43页 |
| ·金属离子敏感的造影剂 | 第43-44页 |
| 3 研究目的与内容 | 第44-46页 |
| 第二章 重组载脂蛋白 A-I 的表达和 GD-DTPA 衍生物的合成 | 第46-79页 |
| 1 前言 | 第46-49页 |
| ·重组载脂蛋白 A-I 的表达 | 第46-47页 |
| ·DTPA 配体的连接反应 | 第47-49页 |
| ·胆固醇的连接反应 | 第49页 |
| 2 材料与方法 | 第49-63页 |
| ·材料与仪器 | 第49-53页 |
| ·实验试剂 | 第49-50页 |
| ·实验溶液 | 第50-51页 |
| ·实验仪器 | 第51-53页 |
| ·实验方法 | 第53-63页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的表达纯化和鉴定 | 第53-58页 |
| ·pNFXex 质粒的转化和保存 | 第53-54页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第53页 |
| ·pNFXex 质粒的转化、鉴定与保存 | 第53-54页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的表达 | 第54页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的纯化 | 第54-55页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的鉴定 | 第55-57页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的活性检测 | 第57页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的圆二色谱分析 | 第57-58页 |
| ·Gd-DTPA 衍生物 Gd-DTPA-chol 和 Gd-DTPA-(chol)_2的合成 | 第58-63页 |
| ·胆固醇-乙二胺的合成 | 第58-59页 |
| ·连接胆固醇的 DTPA 配体 DTPA- chol 和 DTPA-(chol)2的合成 | 第59-60页 |
| ·Gd-DTPA-chol 的合成 | 第60-61页 |
| ·Gd-DTPA-(chol)2的合成 | 第61-62页 |
| ·Gd-DTPA-chol 和 Gd-DTPA-(chol)2分离纯化 | 第62页 |
| ·鉴定产物的钆含量 | 第62-63页 |
| ·产物的表征 | 第63页 |
| 3 实验结果 | 第63-75页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的表达纯化和鉴定 | 第63-67页 |
| ·pNFXex 质粒的转化 | 第63-64页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的表达纯化分离 | 第64-65页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的活性 | 第65-66页 |
| ·载脂蛋白 A-I 的α螺旋含量 | 第66-67页 |
| ·Gd-DTPA-chol 和 Gd-DTPA-(chol)2合成 | 第67-75页 |
| ·Gd-DTPA 和 Gd-(DTPA)2配体的合成 | 第67-72页 |
| ·Gd-DTPA-chol 和 Gd-DTPA-(chol)2螯合物的合成 | 第72-74页 |
| ·Gd-DTPA-chol 和 Gd-DTPA-(chol)2螯合物的钆含量测定 | 第74-75页 |
| 4 分析与讨论 | 第75-79页 |
| 第三章 重组 HDL 的制备和表征 | 第79-99页 |
| 1 前言 | 第79-81页 |
| ·肝脏磁共振成像的造影剂 | 第79-80页 |
| ·重组 HDL 的制作方法 | 第80-81页 |
| 2 材料与方法 | 第81-87页 |
| ·材料与仪器 | 第81-83页 |
| ·实验试剂 | 第81页 |
| ·实验溶液 | 第81-82页 |
| ·实验仪器 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-87页 |
| ·钆-重组高密度脂蛋白(Gd-HDL)的制作 | 第83-87页 |
| ·使用 Gd-DTPA-chol 制作 Gd-chol-HDL | 第83页 |
| ·使用 Gd-DTPA-(chol)2制作 Gd-(chol)2-HDL | 第83-84页 |
| ·重组 HDL 的分离纯化 | 第84页 |
| ·Gd-HDL 的蛋白浓度测定 | 第84-85页 |
| ·Gd-HDL 的钆浓度测定 | 第85页 |
| ·Gd-HDL 的粒径测定 | 第85-86页 |
| ·Gd-HDL 的透射电镜观察(TEM) | 第86页 |
| ·Gd-HDL 纵向弛豫效率 r1的测定 | 第86-87页 |
| 3 实验结果 | 第87-95页 |
| ·Gd-chol-HDL 和 Gd -(chol)2-HDL 的制备 | 第87-88页 |
| ·重组 Gd-HDL 的组分测定 | 第88-89页 |
| ·Gd-chol-HDL 和 Gd-(chol)2-HDL 的表征 | 第89-95页 |
| ·两种重组 HDL 的粒径分布 | 第89-91页 |
| ·Gd-HDL 的透射电镜观察 | 第91-94页 |
| ·Gd-HDL 的纵向弛豫效率 r1测定 | 第94-95页 |
| 4 讨论与分析 | 第95-99页 |
| 第四章 重组 GD-HDL 的体外细胞实验 | 第99-116页 |
| 1 前言 | 第99-103页 |
| ·体外细胞模型 | 第99页 |
| ·造影剂的毒性实验 | 第99-102页 |
| ·细胞毒性实验 | 第102-103页 |
| 2 材料与方法 | 第103-107页 |
| ·材料与仪器 | 第103-105页 |
| ·实验材料 | 第103-104页 |
| ·实验溶液 | 第104页 |
| ·实验仪器 | 第104-105页 |
| ·实验方法 | 第105-107页 |
| ·重组 Gd-HDL 的细胞体外实验 | 第105-107页 |
| ·细胞培养 | 第105页 |
| ·细胞毒性实验 | 第105-106页 |
| ·细胞的摄取实验 | 第106-107页 |
| ·细胞的摄取抑制试验 | 第107页 |
| 3 实验结果 | 第107-111页 |
| ·重组 HDL 对肝癌细胞 HepG2 的毒性研究 | 第107-109页 |
| ·HepG2 细胞对重组 HDL 摄取的研究 | 第109-110页 |
| ·竞争抑制 HepG2 细胞摄取重组 HDL 的研究 | 第110-111页 |
| 4 分析与讨论 | 第111-116页 |
| 第五章 重组 HDL 的体内 MRI 研究 | 第116-126页 |
| 1 前言 | 第116-117页 |
| ·以脂蛋白为基础的造影剂在 MRI 中的应用 | 第116-117页 |
| 2 材料与方法 | 第117-119页 |
| ·材料与仪器 | 第117-118页 |
| ·实验试剂 | 第117-118页 |
| ·溶液配制 | 第118页 |
| ·实验仪器 | 第118页 |
| ·实验方法 | 第118-119页 |
| 3 实验结果 | 第119-123页 |
| ·大鼠的 MRI 实验 | 第119-120页 |
| ·大鼠肝脏信号增强分析 | 第120-123页 |
| 4 分析与讨论 | 第123-126页 |
| 第六章 重组 HDL 介导基因靶向转染的研究 | 第126-142页 |
| 1 前言 | 第126-129页 |
| ·基因治疗 | 第126-129页 |
| 2 材料与方法 | 第129-135页 |
| ·材料与仪器 | 第129-130页 |
| ·实验材料 | 第129-130页 |
| ·实验仪器 | 第130页 |
| ·实验方法 | 第130-135页 |
| ·阳离子脂质 CDAN 的合成 | 第130-131页 |
| ·重组 HDL 的合成 | 第131-132页 |
| ·重组 HDL 与 DNA 的复合实验 | 第132页 |
| ·细胞转染实验 | 第132-133页 |
| ·重组 HDL 的体内分布研究 | 第133-135页 |
| 3 实验结果 | 第135-140页 |
| ·阳离子的胆固醇衍生物 CDAN 的合成 | 第135页 |
| ·重组 HDL 与 DNA 复合后的粒径变化 | 第135-136页 |
| ·重组 HDL 的体外细胞转染实验 | 第136-137页 |
| ·重组 HDL 的体内分布研究 | 第137-140页 |
| 4 分析与讨论 | 第140-142页 |
| 第七章 包裹 SIRNA 的重组 HDL 的基因沉默研究 | 第142-175页 |
| 1 前言 | 第142-148页 |
| ·RNA 干扰 | 第142-144页 |
| ·siRNA 输送载体 | 第144-148页 |
| ·化学修饰的 siRNA | 第145页 |
| ·融合蛋白修饰的 siRNA | 第145-146页 |
| ·脂质体 | 第146页 |
| ·高聚物 | 第146-148页 |
| ·重组 HDL 用于 siRNA 输送的研究 | 第148页 |
| 2 材料与方法 | 第148-158页 |
| ·材料与仪器 | 第148-151页 |
| ·实验材料和仪器 | 第148-150页 |
| ·实验溶液 | 第150-151页 |
| ·RNA 酶灭活处理 | 第151页 |
| ·实验方法 | 第151-158页 |
| ·聚阳离子高聚物复合 siRNA | 第151-152页 |
| ·重组 HDL 的制作 | 第152-153页 |
| ·重组 HDL 的电泳检测 | 第153页 |
| ·重组 HDL 的粒径和电位 | 第153-154页 |
| ·重组 HDL 的透射电镜观察(TEM) | 第154页 |
| ·重组 HDL 的血清稳定性实验 | 第154页 |
| ·细胞体外实验 | 第154-157页 |
| ·细胞培养 | 第154-155页 |
| ·细胞毒性实验 | 第155页 |
| ·细胞转染实验 | 第155-157页 |
| ·靶向荧光素酶蛋白的 siRNA 转染实验 | 第155-156页 |
| ·非荧光素酶基因靶向的 siRNA 转染实验 | 第156-157页 |
| ·细胞荧光共聚焦实验 | 第157页 |
| ·动物的基因沉默实验 | 第157-158页 |
| 3 实验结果 | 第158-171页 |
| ·重组 HDL 的制作 | 第158-159页 |
| ·重组 HDL 的粒径和电位表征 | 第159-162页 |
| ·重组 HDL 的透射电镜观察 | 第162-163页 |
| ·重组 HDL 的血清稳定性实验 | 第163-164页 |
| ·体外细胞实验 | 第164-170页 |
| ·细胞毒性实验 | 第164-166页 |
| ·细胞的基因沉默实验 | 第166-168页 |
| ·细胞的竞争抑制基因沉默实验 | 第168-169页 |
| ·细胞荧光共聚焦实验 | 第169-170页 |
| ·小鼠的基因沉默研究 | 第170-171页 |
| 4 分析与讨论 | 第171-175页 |
| 第八章 总结与展望 | 第175-179页 |
| 1 全文总结 | 第175-176页 |
| 2 创新点 | 第176-177页 |
| 3 研究展望 | 第177-179页 |
| 参考文献 | 第179-196页 |
| 致谢 | 第196-197页 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第197-200页 |
| 上海交通大学博士学位论文答辩决议书 | 第200页 |
