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5个玉米非生物逆境诱导启动子的克隆与功能鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1. 文献综述第12-22页
   ·引言第12-13页
   ·植物启动子的基本结构第13-14页
     ·TATA-box第13页
     ·CAAT-box第13页
     ·上游调控元件第13-14页
   ·植物启动子的类型及研究第14-18页
     ·组成型启动子第14-15页
     ·诱导型启动子第15-17页
     ·组织特异型启动子启动子第17页
     ·与非生物胁迫有关的元件第17-18页
   ·报告基因第18-20页
     ·萤火虫荧光素酶第19页
     ·β-葡萄糖苷酸酶第19-20页
   ·本研究的目的和意义第20-22页
2. 材料和方法第22-42页
   ·实验材料第22-25页
     ·植物材料第22页
     ·菌株、质粒和引物第22页
     ·酶和试剂第22页
     ·培养基和抗生素第22-23页
     ·GUS检测试剂第23页
     ·主要仪器设备第23-25页
   ·实验方法第25-37页
     ·目的启动子的生物信息学分析第25-26页
     ·目的启动子GUS报告基因瞬时表达载体的构建第26-32页
     ·瞬时表达载体的改造第32-37页
   ·胚性愈伤组织受体第37页
   ·非生物逆境诱导启动子的瞬时表达鉴定第37-39页
     ·材料准备第37页
     ·金粉的制备第37-38页
     ·DNA微载体制备第38页
     ·基因枪法转化玉米胚性愈伤组织第38-39页
     ·GUS组织化学染色第39页
   ·非生物逆境诱导启动子瞬时表达的定量检测第39-40页
   ·MGL3、HVA22、ABA3、sBCBF6和ABP9在逆境下的表达分析第40-42页
     ·玉米幼苗的逆境胁迫处理与cDNA样品制备第40页
     ·引物设计第40页
     ·qRT-PCR分析基因表达第40-42页
3. 结果与分析第42-60页
   ·目的启动子生物信息学分析第42-45页
     ·玉米MGL3启动子的预测结果第42页
     ·玉米HVA22启动子的预测结果第42-43页
     ·玉米ABA3启动子的预测结果第43页
     ·玉米sbCBF6启动子的预测结果第43-44页
     ·玉米ABP9启动子的预测结果第44-45页
   ·目的启动子GUS报告基因瞬时表达载体第45-50页
     ·目的片段ubiquitin、MGL3s、HVA22s、ABA3s、CaMV35S和sbCBF6s第45-46页
     ·瞬时表达载体第46-50页
   ·非生物逆境诱导启动子的瞬时表达第50-53页
     ·GUS组织化学染色第50-52页
     ·MGL3s、HVA22s、ABA3s、sbCBF6s和ABP9s的GUS定量第52-53页
   ·MGL3、HVA22、ABA3、SBCBF6s和UBIQUITIN基因在逆境下的表达第53-60页
     ·内参基因、MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6s和ubiquitin基因的引物特异性第53-54页
     ·内参基因、MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6s和ubiquitin基因的标准曲线第54-55页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在盐胁迫下的表达模式第55-56页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在ABA诱导下的表达模式第56-57页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在乙烯诱导下的表达模式第57页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在高温胁迫下的表达模式第57-58页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在冷胁迫下的表达模式第58-59页
     ·MGL3、HVA22、ABA3、sbCBF6和ubiquitin基因在干旱胁迫下的表达模式第59-60页
4 讨论第60-63页
   ·MGL3启动子及其基因在逆境下的表达第60页
   ·HVA22启动子及其基因在逆境下的表达第60-61页
   ·ABA3启动子及其基因在逆境下的表达第61页
   ·SBCBF6启动子及其基因在逆境下的表达第61页
   ·UBQUITIN启动子及其基因在逆境下的表达第61页
   ·结论第61-62页
   ·后续研究第62-63页
参考文献第63-67页
致谢第67-68页
附录第68-70页

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