| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| ·日本晴水稻简介 | 第11页 |
| ·涝害对植物的伤害 | 第11-12页 |
| ·涝害的定义及类型 | 第11-12页 |
| ·涝害对植物的伤害 | 第12页 |
| ·淹水胁迫对水稻生长的影响 | 第12-13页 |
| ·影响水稻茎伸长的植物激素的种类 | 第13-16页 |
| ·赤霉素(GA) | 第14-15页 |
| ·生长素(IAA) | 第15-16页 |
| ·脱落酸(ABA) | 第16页 |
| ·乙烯 | 第16页 |
| ·RNA干扰机制 | 第16-20页 |
| ·siRNA与miRNA的区别 | 第17页 |
| ·MicroRNA研究概述 | 第17-20页 |
| ·人工微RNA(artificial microRNA,amiRNA)技术 | 第20页 |
| ·传统的amiRNA表达载体构建方法 | 第20页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻转化体系 | 第20-21页 |
| ·水稻成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生 | 第21页 |
| ·实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR)技术 | 第21-23页 |
| ·非特异性荧光定量PCR | 第22-23页 |
| ·应用SYBR Green法进行相对定量分析方法 | 第23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·供试材料 | 第25-31页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·培养基配置 | 第26-27页 |
| ·抗生素与激素类 | 第27-28页 |
| ·主要试剂和酶类 | 第28页 |
| ·主要缓冲液 | 第28-29页 |
| ·仪器和设备 | 第29-30页 |
| ·本实验中用到的引物 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-40页 |
| ·质粒DNA的抽提及纯化 | 第31页 |
| ·EHA10 β感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·大肠杆菌的常规转化 | 第31-32页 |
| ·水稻幼叶基因组DNA的提取 | 第32页 |
| ·水稻幼叶总RNA提取至转录为cDNA过程 | 第32-35页 |
| ·PCR相关反应 | 第35-37页 |
| ·接合转移(MAGIC)构建amiRNA表达载体的过程 | 第37页 |
| ·日本晴水稻愈伤转化体系的建立 | 第37-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-62页 |
| ·诱导、继代日本晴水稻愈伤培养基的选择 | 第40-41页 |
| ·愈伤组织分化的激素组合 | 第41-43页 |
| ·细胞分裂素对愈伤组织分化的影响 | 第41-42页 |
| ·NAA对愈伤组织分化的影响 | 第42-43页 |
| ·日本晴水稻幼叶总RNA的提取 | 第43-44页 |
| ·RNAi表达载体的构建 | 第44-54页 |
| ·一步PCR法获得amiRNA表达单元的供体载体 | 第44-50页 |
| ·amiRNA表达单元从供体载体转移到受体双元载体 | 第50-53页 |
| ·双元载体重组子的检测 | 第53-54页 |
| ·农杆菌介导的amiRNA表达载体转化日本晴水稻 | 第54-58页 |
| ·pmiR528-amiRNA双元载体转化农杆菌 | 第54-55页 |
| ·日本晴水稻愈伤转基因流程图 | 第55-58页 |
| ·转基因日本晴水稻的检测 | 第58-59页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第59-62页 |
| 第四章 讨论与展望 | 第62-65页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·一步法反扩的方法 | 第62页 |
| ·接合转移(MAGIC)的方法 | 第62页 |
| ·干扰载体的构建 | 第62-63页 |
| ·基于NB培养基对日本晴水稻的转基因操作 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
