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利用RNAi干扰技术研究大鼠附睾特异性基因Ces7的功能

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
引言第9-11页
第一部分 文献综述第11-21页
 第一章 附睾的概述第11-17页
  1 附睾的结构和功能第11-13页
  2 附睾与精子成熟第13页
  3 精子形态的改变第13页
  4 精子表面成分的改变第13-14页
  5 附睾基因表达的特点第14页
  6 雄激素及睾丸因子对附睾的基因表达的调控第14-17页
 第二章 羧基酯酶基因的概述第17-21页
  1 羧基酯酶的表达和功能第17页
  2 羧基酯酶的特性第17-19页
  3 羧基酯酶的调控第19页
  4 雄性生殖系统中的羧基酯酶第19-21页
第二部分 大鼠附睾特异性基因Ces7功能的研究第21-41页
 1 材料与方法第21-28页
   ·质粒、菌株及实验动物第21页
   ·主要试剂、工具酶第21-22页
   ·主要仪器第22页
   ·试验设计第22页
   ·RNAi片段的设计和载体的构建第22-23页
   ·回收酶切后的pLenti载体第23页
   ·连接第23页
   ·转化第23-24页
   ·小量抽提质粒第24-25页
   ·大量制备质粒第25-26页
   ·Western免疫印迹分析第26页
   ·Northern Blot分析第26-27页
   ·PNGase-F糖苷酶消化第27页
   ·Lentivirus的制备第27页
   ·病毒滴度的测定第27-28页
   ·细胞培养,转染第28页
 2 siRNA-CES7对精子成熟的影响第28-29页
   ·精子获能检测第28-29页
   ·精子运动检测第29页
 3 结果与分析第29-37页
   ·Ces7表达稳定敲低的SD大鼠模型的建立第29-35页
   ·Ces7敲低后对精子运动和获能的影响第35-37页
 4 讨论第37-41页
   ·靶基因的筛选第37-38页
   ·载体的构建第38页
   ·关于注射的剂量第38-39页
   ·羧基酯酶的功能第39-41页
全文结论第41-43页
参考文献第43-49页
致谢第49-50页

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