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柠条锦鸡儿NCED1基因启动子及蛋白原核表达的初步分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 前言第8-17页
   ·ABA的生物合成途径第8-12页
     ·ABA的生物合成途径第8页
     ·ABA的合成途径第8-10页
     ·ABA合成途径中的关键酶基因第10-11页
     ·ABA应答基因的类型第11-12页
   ·启动子第12-13页
     ·启动子的分类第12-13页
     ·脱落酸诱导启动子第13页
     ·利用PCR技术克隆启动子第13页
   ·启动子常用功能分析方法第13-15页
     ·生物信息学分析与预测第13-14页
     ·实验方法功能分析第14-15页
   ·柠条锦鸡儿的研究进展第15-16页
   ·本研究目的及意义第16-17页
2 材料与方法第17-39页
   ·CkNCEDI启动子的克隆与表达分析第17-30页
     ·实验材料第17-18页
     ·方法第18-25页
     ·CkNCED1基因启动子序列的生物信息学分析第25页
     ·植物表达载体GUS融合基因的构建第25-30页
   ·柠条锦鸡儿pCAMBIA1302-NCED1-GFP融合蛋白的亚细胞定位第30-34页
     ·实验材料与溶液配制第30-31页
     ·亚细胞定位pCAMBIA1302-NCED1-GFP载体的构建第31-33页
     ·拟南芥原生质体的制备与转化第33-34页
   ·pET30a-A/Ca?/蛋白的原核表达分析第34-39页
     ·实验材料及溶液第34-35页
     ·pET30a-NCED1原核表达载体的构建第35-36页
     ·重组质粒pET30a-NCED1融合蛋白的诱导表达第36页
     ·融合蛋白表达的SDS凝胶电泳鉴定第36-37页
     ·融合蛋白的可溶性分析及纯化过程第37-38页
     ·蛋白浓度的测定第38页
     ·Western blot印记第38-39页
3 结果与分析第39-47页
   ·CkNCED1基因启动子的克隆和初步分析第39-43页
     ·CkNCED1基因启动子序列的生物信息学分析第39-40页
     ·转基因拟南芥的筛选第40-41页
     ·转基因植株的分子检测第41页
     ·GUS报告基因的表达检测结果第41-43页
   ·CkNCED1蛋白的亚细胞定位分析第43-44页
   ·CkNCED1基因的原核表达分析第44-47页
     ·CkNCED1蛋白的生物信息学分析第44-45页
     ·pET30a-NCED1融合蛋白的诱导表达分析第45-46页
     ·重组蛋白的可溶性分析及纯化第46-47页
     ·Western Blot 印迹第47页
4 讨论第47-51页
   ·CkNCED1基因启动子的初步分析第47-49页
     ·启动子组织表达的特异性分析第47-48页
     ·关于表达载体及表型分离第48-49页
   ·亚细胞定位第49页
   ·原核表达分析第49-50页
   ·后续工作的展望第50-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-59页
作者简介第59页

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