| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩写名词表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-20页 |
| ·棉花纤维发育 | 第11-12页 |
| ·棉花的植物学分类 | 第11页 |
| ·棉花纤维的发育过程 | 第11-12页 |
| ·棉花纤维分子生物学研究的意义 | 第12页 |
| ·植物细胞壁和纤维素合酶 | 第12-14页 |
| ·植物细胞壁 | 第12页 |
| ·纤维素 | 第12-13页 |
| ·植物纤维素合酶 | 第13-14页 |
| ·植物细胞壁合成相关的基因 | 第14-17页 |
| ·SG和SGT研究现状 | 第17-20页 |
| 2 材料和方法 | 第20-34页 |
| ·材料和试剂 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和载体 | 第20-21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·仪器设备 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·棉花SGT的EST序列 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-34页 |
| ·RNA提取 | 第21-22页 |
| ·DNA提取 | 第22页 |
| ·质粒提取 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增和回收 | 第23-24页 |
| ·PCR产物与载体连接 | 第24页 |
| ·E.coli感受态细胞制备 | 第24-25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·外源片段的检测和测序 | 第25页 |
| ·RACE | 第25-26页 |
| ·目的蛋白的原核表达和纯化 | 第26-31页 |
| ·真核表达载体构建和酵母转化 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-52页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2的全长cDNA克隆 | 第34-37页 |
| ·序列比对和引物设计 | 第34-35页 |
| ·GhSGT1 cDNA序列全长的获得 | 第35-36页 |
| ·GhSGT2全长cDNA获得 | 第36-37页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2基因序列获得 | 第37-38页 |
| ·GhSGT1基因扩增 | 第37-38页 |
| ·GhSGT2基因扩增 | 第38页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2 mRNA表达分析 | 第38-39页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2生物信息学分析 | 第39-42页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2序列比对和保守域分析 | 第39-40页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2与其他物种SGT蛋白比对和聚类分析 | 第40-41页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2跨膜结构分析 | 第41-42页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2分子量和等电点分析 | 第42页 |
| ·GhSGTl、endo-β-1,4-glucanase、β-1,3-glucanase和Callose synthase抗原合成和抗体制备 | 第42-50页 |
| ·GhSGT1序列分析和抗原区段选择 | 第43页 |
| ·Endo-β-1,4-glucanase序列分析和抗原区段选择 | 第43-44页 |
| ·β-1,3-glucanase抗原区段选择和抗原表位分析 | 第44-45页 |
| ·Callose synthase抗原区段选择 | 第45-47页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第47页 |
| ·目标蛋白检测 | 第47-48页 |
| ·纯化蛋白检测 | 第48页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第48-49页 |
| ·ELISA检测抗体效价 | 第49-50页 |
| ·Western Blotting检测抗体 | 第50页 |
| ·GhSGT1蛋白真核表达 | 第50-52页 |
| ·真核载体构建 | 第51页 |
| ·质粒线性化、酵母转化和筛选 | 第51页 |
| ·蛋白表达 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-58页 |
| ·RNA提取 | 第52页 |
| ·RACE | 第52-53页 |
| ·GhSGT1和GhSGT2蛋白的生物信息学分析 | 第53-54页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第54-55页 |
| ·原核表达和目的蛋白纯化 | 第55-56页 |
| ·GhSGT1真核表达 | 第56页 |
| ·总结 | 第56-57页 |
| ·展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
