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绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养和诱导分化

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
缩略词表第10-11页
第一章 绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养第11-30页
 1 材料第12-13页
   ·主要仪器设备第12页
   ·实验动物第12页
   ·实验试剂及耗材第12页
   ·培养液第12-13页
 2 实验方法第13-18页
   ·采用两步酶消化法分离绵羊MDSCs及用差速贴壁法对其进行纯化第13-14页
     ·两步酶消化法分离绵羊MDSCs第13页
     ·差速贴壁法纯化绵羊MDSCs第13-14页
   ·绵羊DMSCs的冷冻保存及复苏第14页
   ·绵羊MDSCs生长曲线测定第14-15页
   ·绵羊MDSCs免疫荧光染色及RT-PCR鉴定第15-17页
     ·Desmin,a-Sarcomeric Actinin,MyoD1,Myf5和PAX7的免疫组化检测第15页
     ·RT-PCR检测细胞内Myf5和MyoD1的表达第15-17页
       ·细胞总RNA提取第15-16页
       ·RT-PCR反应检测Myf5和MyoD1的表达第16-17页
   ·流式细胞术检测绵羊MDSCs第17-18页
   ·绵羊MDSCs染色体数目分析第18页
 3 结果第18-24页
   ·绵羊MDSCs的分离与纯化第18-21页
   ·绵羊MDSCs生长曲线第21页
   ·绵羊MDSCs免疫荧光染色及RT-PCR鉴定第21-22页
   ·绵羊MDSCs流式细胞仪检测第22-23页
   ·绵羊MDSCs染色体数目分析第23-24页
 4 讨论第24-27页
 结论第27-28页
 参考文献第28-30页
第二章 绵羊骨骼肌卫星细胞诱导分化第30-43页
 1 材料第31-32页
   ·主要仪器设备第31页
   ·实验材料第31页
   ·主要试剂及耗材第31页
   ·液体培养基第31-32页
 2 方法第32-35页
   ·绵羊MDSCs成肌诱导与鉴定第32-33页
     ·免疫组化检测Myosin第32页
     ·RT-PCR鉴定标记基因的表达第32-33页
   ·绵羊MDSCs成骨诱导与鉴定第33页
     ·Alizarin Red染色第33页
     ·ALP活性检测第33页
     ·RT-PCR鉴定标记基因的表达第33页
   ·绵羊MDSCs成脂诱导与鉴定第33-35页
     ·Oil Red-O染色第33-34页
     ·RT-PCR鉴定标记基因的表达第34-35页
 3 结果第35-38页
   ·绵羊MDSCs成肌诱导第35-36页
   ·绵羊MDSCs成骨诱导第36-37页
   ·绵羊MDSCs成脂诱导第37-38页
 4 讨论第38-40页
 结论第40-41页
 参考文献第41-43页
文献综述第43-58页
 参考文献第52-58页
致谢第58-59页
攻读学位期间已发表学术论文第59页

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