摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 绵羊骨骼肌卫星细胞的体外培养 | 第11-30页 |
1 材料 | 第12-13页 |
·主要仪器设备 | 第12页 |
·实验动物 | 第12页 |
·实验试剂及耗材 | 第12页 |
·培养液 | 第12-13页 |
2 实验方法 | 第13-18页 |
·采用两步酶消化法分离绵羊MDSCs及用差速贴壁法对其进行纯化 | 第13-14页 |
·两步酶消化法分离绵羊MDSCs | 第13页 |
·差速贴壁法纯化绵羊MDSCs | 第13-14页 |
·绵羊DMSCs的冷冻保存及复苏 | 第14页 |
·绵羊MDSCs生长曲线测定 | 第14-15页 |
·绵羊MDSCs免疫荧光染色及RT-PCR鉴定 | 第15-17页 |
·Desmin,a-Sarcomeric Actinin,MyoD1,Myf5和PAX7的免疫组化检测 | 第15页 |
·RT-PCR检测细胞内Myf5和MyoD1的表达 | 第15-17页 |
·细胞总RNA提取 | 第15-16页 |
·RT-PCR反应检测Myf5和MyoD1的表达 | 第16-17页 |
·流式细胞术检测绵羊MDSCs | 第17-18页 |
·绵羊MDSCs染色体数目分析 | 第18页 |
3 结果 | 第18-24页 |
·绵羊MDSCs的分离与纯化 | 第18-21页 |
·绵羊MDSCs生长曲线 | 第21页 |
·绵羊MDSCs免疫荧光染色及RT-PCR鉴定 | 第21-22页 |
·绵羊MDSCs流式细胞仪检测 | 第22-23页 |
·绵羊MDSCs染色体数目分析 | 第23-24页 |
4 讨论 | 第24-27页 |
结论 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-30页 |
第二章 绵羊骨骼肌卫星细胞诱导分化 | 第30-43页 |
1 材料 | 第31-32页 |
·主要仪器设备 | 第31页 |
·实验材料 | 第31页 |
·主要试剂及耗材 | 第31页 |
·液体培养基 | 第31-32页 |
2 方法 | 第32-35页 |
·绵羊MDSCs成肌诱导与鉴定 | 第32-33页 |
·免疫组化检测Myosin | 第32页 |
·RT-PCR鉴定标记基因的表达 | 第32-33页 |
·绵羊MDSCs成骨诱导与鉴定 | 第33页 |
·Alizarin Red染色 | 第33页 |
·ALP活性检测 | 第33页 |
·RT-PCR鉴定标记基因的表达 | 第33页 |
·绵羊MDSCs成脂诱导与鉴定 | 第33-35页 |
·Oil Red-O染色 | 第33-34页 |
·RT-PCR鉴定标记基因的表达 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-38页 |
·绵羊MDSCs成肌诱导 | 第35-36页 |
·绵羊MDSCs成骨诱导 | 第36-37页 |
·绵羊MDSCs成脂诱导 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
文献综述 | 第43-58页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间已发表学术论文 | 第59页 |