| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 文献综述 | 第10-18页 |
| 第一章 Akt 家族简介 | 第10-14页 |
| ·Akt 的发现 | 第10页 |
| ·Akt 的结构 | 第10页 |
| ·Akt 的分型 | 第10-11页 |
| ·Akt 的激活 | 第11-14页 |
| 第二章 Akt 的功能 | 第14-18页 |
| ·Akt 调节其转录因子活性 | 第14-15页 |
| ·Akt 调节胰岛素活性 | 第15页 |
| ·Akt2 与脂肪细胞分化 | 第15-16页 |
| ·Akt 的其他功能 | 第16页 |
| ·Sirt1 与 Akt2 | 第16-18页 |
| 实验研究 | 第18-49页 |
| 前言 | 第18-19页 |
| 第三章 猪 Akt2 的组织与原代脂肪细胞分化时序表达 | 第19-29页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·实验动物 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·样品采集 | 第19页 |
| ·猪前体脂肪细胞培养 | 第19-20页 |
| ·鸡尾酒法诱导猪前体脂肪细胞分化 | 第20页 |
| ·总 RNA 提取 | 第20-21页 |
| ·组织总 RNA 提取 | 第20页 |
| ·细胞总 RNA 提取 | 第20-21页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第21页 |
| ·Real Time 检测 Akt2 RNA 表达 | 第21-22页 |
| ·总蛋白提取 | 第22-23页 |
| ·组织中总蛋白提取 | 第22页 |
| ·细胞中总蛋白提取 | 第22-23页 |
| ·Weatern Blotting 检测 Akt2 表达 | 第23页 |
| ·数据分析 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·3 日龄仔猪 Akt2 RNA 组织表达谱 | 第24页 |
| ·3 日龄仔猪 Akt2 蛋白组织表达谱 | 第24-25页 |
| ·180 日龄猪 Akt2 RNA 组织表达谱 | 第25-26页 |
| ·180 日龄猪 Akt2 蛋白组织表达谱 | 第26-27页 |
| ·猪前体脂肪细胞分化过程中 Akt2 蛋白表达变化 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| 第四章 Akt2 慢病毒干扰载体的构建及有效性检测 | 第29-45页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-33页 |
| ·猪 Akt2 基因序列扩增 | 第29-30页 |
| ·猪 pLentiH1-Akt2 shRNA 的构建 | 第30-31页 |
| ·病毒包装 | 第31-32页 |
| ·慢病毒感染猪前体脂肪细胞 | 第32页 |
| ·Real Time PCR 检测 | 第32页 |
| ·Western blot 检测 | 第32页 |
| ·统计分析 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-43页 |
| ·扩增猪 Akt2 基因序列 | 第33-34页 |
| ·pLentiH1-Akt2 shRNA 构建及鉴定 | 第34-38页 |
| ·重组慢病毒的包装及感染猪前体脂肪细胞 | 第38-41页 |
| ·Akt2 mRNA 和蛋白在感染慢病毒的猪前体脂肪细胞中的表达 | 第41-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 干扰猪 Akt2 抑制猪前体脂肪细胞分化 | 第45-49页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·Western blot 检测 | 第45页 |
| ·油红 O 染色 | 第45页 |
| ·Bodipy 染色 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-47页 |
| ·Akt2 干扰抑制猪前体脂肪细胞脂肪生成 | 第46-47页 |
| ·Akt2 knockdown 抑制猪前体脂肪细胞分化标志基因蛋白表达 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 结论 | 第49页 |
| 创新点 | 第49页 |
| 需进一步研究的问题 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附注 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |
