| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-51页 |
| 第一节 NO信号转导通路及可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)简介 | 第15-19页 |
| NO在生命体内的反应 | 第15-16页 |
| NO信号转导通路简介 | 第16-17页 |
| 可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的分子构造 | 第17-18页 |
| 可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的亚基类型及组织分布 | 第18-19页 |
| 可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的表达与纯化 | 第19页 |
| 第二节 sGC介导NO信号转导的机理简介 | 第19-25页 |
| NO激活(NO activation)的机理研究 | 第19-22页 |
| sGC对NO失活和对NO脱敏的机理研究 | 第22-25页 |
| 第三节 可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)相关疾病与药物 | 第25-28页 |
| sGC激动剂(sGC stimulator) | 第25-27页 |
| sGC激活剂(sGC activator) | 第27-28页 |
| 第四节 异源二聚蛋白的设计及sGC二聚机理研究简介 | 第28-33页 |
| 蛋白复合物的折叠与组装 | 第28-30页 |
| 大肠杆菌体系中蛋白共表达方法简介 | 第30-32页 |
| sGC二聚调节区域及机理研究 | 第32-33页 |
| 第五节 可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的晶体结构 | 第33-36页 |
| H-NOX结构域 | 第34-35页 |
| 催化结构域 | 第35页 |
| Per-Arnt-Sim(PAS)-like结构域 | 第35页 |
| 螺旋卷曲(CC)区域 | 第35-36页 |
| 第六节 本论文研究的目的、内容和意义 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-51页 |
| 第二章 人可溶性鸟苷酸环化酶β1亚基的质粒构建、蛋白表达与纯化及其性质研究 | 第51-75页 |
| 第一节 hsGC β1亚基相关蛋白的基因构建 | 第51-55页 |
| 实验材料 | 第51-52页 |
| 实验方法 | 第52-55页 |
| 结果与讨论 | 第55页 |
| 第二节 hsGC β1相关蛋白的表达和纯化 | 第55-60页 |
| 实验材料 | 第55页 |
| 蛋白的表达与纯化 | 第55-57页 |
| 蛋白的血红素重组 | 第57页 |
| 实验结果与讨论 | 第57-60页 |
| 第三节 hsGC-β 1亚基的性质表征 | 第60-71页 |
| 实验部分 | 第60-62页 |
| 结果与讨论 | 第62-71页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 第三章 人可溶性鸟苷酸环化酶α1亚基蛋白表达、纯化及性质研究 | 第75-109页 |
| 第一节 hsGC α1亚基相关蛋白的基因构建及蛋白表达纯化 | 第76-78页 |
| 实验材料 | 第76页 |
| 实验方法 | 第76-78页 |
| 结果与讨论 | 第78页 |
| 第二节 hsGCα259蛋白的性质表征 | 第78-94页 |
| 实验材料 | 第78-79页 |
| 实验部分 | 第79-82页 |
| 结果与讨论 | 第82-94页 |
| 第三节 轴向配体(H105)的作用研究 | 第94-102页 |
| MBP-β195 H105G突变体的质粒构建及蛋白表达与纯化 | 第94-96页 |
| 突变体蛋白的基本性质表征 | 第96-98页 |
| 轴向配体对血红素结合性质的影响 | 第98-102页 |
| 参考文献 | 第102-109页 |
| 第四章 人可溶性鸟苷酸环化酶α1/β1亚基血红素结构域异源二聚研究 | 第109-133页 |
| 第一节 α1/β1血红素结构域异源二聚蛋白的基因构建、蛋白表达与纯化 | 第110-114页 |
| 实验材料 | 第110页 |
| 质粒构建 | 第110-112页 |
| 蛋白表达与纯化 | 第112-114页 |
| 第二节 hsGCβ195-α259蛋白的性质研究 | 第114-124页 |
| 实验材料 | 第114页 |
| 实验部分 | 第114-115页 |
| 结果与讨论 | 第115-124页 |
| 第三节 α1/β1亚基血红素结构域异源二聚机理探索 | 第124-129页 |
| 体外异源二聚重组 | 第124-125页 |
| 共表达质粒的构建 | 第125-127页 |
| 共表达质粒的蛋白表达及亲和纯化 | 第127-129页 |
| 参考文献 | 第129-133页 |
| 第五章 人可溶性鸟苷酸环化酶蛋白晶体学的初步研究 | 第133-141页 |
| 第一节 α1/β1亚基血红素结构域晶体的培养 | 第134-137页 |
| 蛋白结晶最适浓度的确定 | 第134-135页 |
| 脱辅基hsGCβ195-α259蛋白结晶条件及结果 | 第135-136页 |
| 其他形式蛋白晶体 | 第136-137页 |
| 第二节 蛋白晶体衍射数据 | 第137-139页 |
| 参考文献 | 第139-141页 |
| 工作总结与展望 | 第141-144页 |
| 附录 | 第144-168页 |
| 本论文所涉及的基因测序结果 | 第144-165页 |
| 本论文所涉及的缩写的全称及说明 | 第165-168页 |
| 攻读学位期间已发表和完成的论文 | 第168-170页 |
| 致谢 | 第170-171页 |
