| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-25页 |
| ·坏死梭杆菌白细胞毒素背景 | 第15页 |
| ·白细胞毒素遗传学研究进展 | 第15-19页 |
| ·白细胞毒素 lktB | 第15-16页 |
| ·白细胞毒素 LktA 和一级结构分析 | 第16-17页 |
| ·LktA 二级结构分析 | 第17-18页 |
| ·LktA 三级结构分析 | 第18-19页 |
| ·白细胞毒素 lktC | 第19页 |
| ·白细胞毒素免疫学研究进展 | 第19-20页 |
| ·白细胞毒素免疫学背景 | 第19-20页 |
| ·白细胞毒素免疫学特性 | 第20页 |
| ·表达系统研究进展 | 第20-24页 |
| ·原核表达系统 | 第20-21页 |
| ·酵母表达系统 | 第21-22页 |
| ·哺乳动物和昆虫细胞表达系统 | 第22-23页 |
| ·植物细胞表达系统 | 第23-24页 |
| ·结语 | 第24-25页 |
| 第2章 坏死梭杆菌白细胞毒素 BSBSE-GAS-SH 融合及酵母表达 | 第25-41页 |
| ·实验材料和仪器 | 第25-26页 |
| ·菌种和载体 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·酶及主要试剂 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·引物设计 | 第26-27页 |
| ·表达载体构建流程图 | 第27页 |
| ·bsbse、gas-sh 扩增与回收 | 第27-28页 |
| ·bsbse、gas-sh 克隆与鉴定 | 第28-29页 |
| ·bsbse-gas-sh 克隆与鉴定 | 第29-30页 |
| ·BSBSE-GSS-SH 分泌表达酵母工程菌构建与诱导表达 | 第30-33页 |
| ·BSBSE-GAS-SH SDS-PAGE 电泳 | 第33-35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·bsbse、gas-sh 克隆与鉴定 | 第35页 |
| ·表达片段 gas-sh 扩增 | 第35-36页 |
| ·bsbse-gas-sh 融合与鉴定 | 第36页 |
| ·重组表达载体构建并诱导表达 | 第36-37页 |
| ·BSBSE-GAS-SH SDS-PAGE 电泳 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·引物设计 | 第39页 |
| ·基因融合并真核载体构建 | 第39页 |
| ·毕赤酵母诱导表达 | 第39-40页 |
| ·存在问题和不足 | 第40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 坏死梭杆菌白细胞毒素 BSBSE-SH 融合及酵母表达 | 第41-49页 |
| ·实验材料与仪器 | 第41页 |
| ·菌种与载体 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·酶及主要试剂 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·引物设计 | 第41页 |
| ·表达载体构建流程 | 第41-42页 |
| ·sh 扩增与回收 | 第42页 |
| ·sh 克隆与鉴定 | 第42页 |
| ·bsbse-sh 融合与鉴定 | 第42-43页 |
| ·BSBSE-SH 分泌表达酵母工程菌构建与诱导表达 | 第43页 |
| ·BSBSE-SH SDS-PAGE 电泳 | 第43页 |
| ·实验结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·sh 克隆与鉴定 | 第43-44页 |
| ·bsbse-sh 克隆与鉴定 | 第44页 |
| ·重组表达载体鉴定 | 第44-45页 |
| ·毕赤酵母转化子 PCR 鉴定 | 第45-46页 |
| ·BSBSE-SH SDS-PAGE 电泳 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第4章 坏死梭杆菌白细胞毒素部分融合蛋白免疫活性分析 | 第49-57页 |
| ·实验材料与仪器 | 第49-50页 |
| ·主要材料 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·重组蛋白浓度测定 | 第50页 |
| ·重组蛋白初步浓缩 SDS-PAGE 电泳 | 第50页 |
| ·重组蛋白 Western Blot 印迹 | 第50-51页 |
| ·融合蛋白对细胞活力影响 | 第51-53页 |
| ·实验结果 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白浓度测定 | 第53页 |
| ·重组蛋白初步浓缩 SDS-PAGE 电泳 | 第53页 |
| ·重组蛋白 Western Blot 印迹 | 第53-54页 |
| ·融合蛋白对细胞活力影响实验 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·重组蛋白浓度 | 第55页 |
| ·重组蛋白 Western Blot 印迹 | 第55页 |
| ·融合蛋白对细胞活力影响实验 | 第55-56页 |
| ·存在问题和不足 | 第56页 |
| ·本章小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 附录 | 第65-79页 |
| 附录1 | 第65-67页 |
| 附录2 | 第67-69页 |
| 附录3 | 第69-75页 |
| 附录4 | 第75-79页 |
| 攻读硕士学位期间所发表的学术论文 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81页 |
