| 论文摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 综述 | 第12-17页 |
| ·水产动物抗菌肽的研究 | 第12-13页 |
| ·LEAP-2 的基因的发现 | 第13页 |
| ·LEAP-2 的结构 | 第13-14页 |
| ·LEAP-2 的基因的组织特异性表达 | 第14页 |
| ·LEAF-2 基因的作用机制 | 第14-16页 |
| ·LEAF-2 基因抗菌机制 | 第14-15页 |
| ·LEAF-2 基因的信号传导途径 | 第15-16页 |
| ·讨论 | 第16-17页 |
| 2 大黄鱼 LEAP-2 基因分子特征 | 第17-43页 |
| ·实验材料 | 第17-21页 |
| ·样品采集 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-20页 |
| ·主要耗材 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-29页 |
| ·克隆大黄鱼 LEAP-2 基因 DNA 序列 | 第22-26页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 cDNA 序列克隆 | 第26-29页 |
| ·结果与分析 | 第29-41页 |
| ·基因组 DNA 提取 | 第29-30页 |
| ·总 RNA 提取 | 第30-31页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 基因 DNA 序列克隆 | 第31页 |
| ·RT-PCR 扩增 LEAP-2 完整开放阅读框 | 第31-32页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 基因 DNA 序列分析 | 第32-34页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 cDNA 序列分析 | 第34-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 3 常规 RT-PCR 检测大黄鱼 LEAP-2 基因的半定量表达 | 第43-52页 |
| ·实验材料 | 第43页 |
| ·样品采集 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要耗材 | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-44页 |
| ·各组织总 RNA 的提取、DNase I 处理及总 RNA 的检测 | 第43页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第43-44页 |
| ·β-actin、LEAP-2 特异性引物设计 | 第44页 |
| ·β-actin 和 LEAP-2 的 PCR 扩增和检测 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·提取总 RNA 质量的测定 | 第44-47页 |
| ·LEAP-2 在大黄鱼成体正常组织中的表达情况 | 第47-48页 |
| ·LEAP-2 在诱导 48 小时后的大黄鱼感染组织中的表达情况 | 第48页 |
| ·LEAP-2 在诱导 7 天后的大黄鱼感染组织中的表达情况 | 第48-49页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 在正常和病原菌刺激不同时间后的表达比较 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 4 大黄鱼 LEAP-2 全长基因的原核表达 | 第52-65页 |
| ·实验材料 | 第52-54页 |
| ·样品采集 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52-54页 |
| ·主要耗材 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54页 |
| ·实验材料 | 第54-60页 |
| ·大黄鱼 LEAP-2 基因 cDNA 的合成 | 第54-55页 |
| ·大黄鱼目的片段的扩增 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的构建 | 第56-58页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第58-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-63页 |
| ·总 RNA 提取 | 第60页 |
| ·PCR 产物 | 第60-61页 |
| ·目的片段克隆 | 第61页 |
| ·酶切 | 第61页 |
| ·重组质粒的构建 | 第61-62页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 5 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 在学研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
