| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 图和附表清单 | 第13-14页 |
| 中英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 材料与方法 | 第17-34页 |
| 1 材料 | 第17-22页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·肺泡巨噬细胞 | 第17页 |
| ·粉尘 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备及实验材料 | 第18-19页 |
| ·溶液的配制 | 第19-22页 |
| ·D-Hank’s平衡液的配制 | 第19页 |
| ·DMEM培养基的配制 | 第19页 |
| ·粉尘工作液的配制 | 第19-20页 |
| ·MTT溶液的配制(5mg/ml) | 第20页 |
| ·0.25%胰蛋白酶溶液的配制 | 第20页 |
| ·RNA提取试剂的配制 | 第20页 |
| ·Western blot试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-34页 |
| ·肺泡巨噬细胞的提取和纯化 | 第22-24页 |
| ·MTT法确定粉尘作用于肺泡巨噬细胞的剂量 | 第24-25页 |
| ·游离SiO_2粉尘工作液对肺泡巨噬细胞剂量的确定 | 第24页 |
| ·煤尘工作液对肺泡巨噬细胞作用剂量的确定 | 第24-25页 |
| ·氧化锌粉尘工作液对肺泡巨噬细胞作用剂量的确定 | 第25页 |
| ·巨噬细胞的处理 | 第25-26页 |
| ·游离SiO_2粉尘作用于肺泡巨噬细胞 | 第25页 |
| ·煤尘作用于肺泡巨噬细胞 | 第25-26页 |
| ·氧化锌粉尘作用于肺泡巨噬细胞 | 第26页 |
| ·RT-PCR技术检测肺泡巨噬细胞表面清道夫受体MARCO mRNA的表达水平 | 第26-29页 |
| ·细胞内总RNA的提取 | 第26页 |
| ·总RNA质量鉴定及含量计算 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第27-28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第28页 |
| ·Real-time PCR反应体系 | 第28-29页 |
| ·PCR反应条件 | 第29页 |
| ·总蛋白提取及蛋白含量的检测 | 第29-30页 |
| ·总蛋白提取 | 第29页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第29-30页 |
| ·待测样品蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| ·Western blot检测肺泡巨噬细胞表面MARCO受体的蛋白表达量 | 第30-33页 |
| ·凝胶的制备 | 第30-31页 |
| ·上样 | 第31页 |
| ·电泳 | 第31页 |
| ·转膜 | 第31-32页 |
| ·染色 | 第32页 |
| ·封闭 | 第32页 |
| ·抗体孵育 | 第32-33页 |
| ·ECL发光 | 第33页 |
| ·曝光 | 第33页 |
| ·条带分析 | 第33页 |
| ·统计学分析 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-42页 |
| 1 肺泡巨噬细胞的体外培养形态 | 第34-35页 |
| 2 不同粉尘刺激对肺泡巨噬细胞活性的影响 | 第35-36页 |
| ·游离SiO_2粉尘对肺泡巨噬细胞活性的影响 | 第35页 |
| ·煤尘对肺泡巨噬细胞活性的影响 | 第35-36页 |
| ·氧化锌粉尘对肺泡巨噬细胞活性的影响 | 第36页 |
| 3 肺泡巨噬细胞总RNA提取的结果 | 第36-37页 |
| 4 不同粉尘刺激对肺泡巨噬细胞表面MARCO受体mRNA表达的影响 | 第37-39页 |
| 5 不同粉尘对肺泡巨噬细胞表面MARCO受体蛋白表达的影响 | 第39-42页 |
| 讨论 | 第42-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 综述 | 第50-65页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 个人简历及硕士研究生期间发表论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
