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家蝇抗菌肽的分离及对细菌壁膜和DNA的作用

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第一章 绪论第10-25页
   ·前言第10页
   ·蝇类抗菌肽的研究概况第10-11页
   ·抗菌肽的作用机理第11-16页
     ·细胞膜损伤第11-15页
     ·胞内损伤第15-16页
   ·抗菌肽的应用前景及存在的问题第16-18页
     ·应用前景第16-17页
     ·存在的问题第17-18页
   ·本课题的主要研究内容第18-19页
 参考文献第19-25页
第二章 基于细胞膜结合原理分离家蝇抗菌肽第25-37页
   ·前言第25页
   ·材料与试剂第25-26页
     ·菌株第25-26页
     ·主要试剂第26页
   ·实验方法第26-27页
     ·蝇蛆蛋白干粉粗提物的制备第26页
     ·抗菌肽细菌吸附结合试验第26页
     ·凝胶过滤层析确定目标抗菌肽第26页
     ·反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化第26-27页
   ·结果与讨论第27-35页
     ·Sephadex G-15 凝胶过滤分离家蝇抗菌肽第27-31页
     ·基于细胞膜结合原理分离家蝇幼虫抗菌肽第31-35页
   ·本章小结第35页
 参考文献第35-37页
第三章 家蝇抗菌肽的结构鉴定及抗菌活性第37-49页
   ·前言第37页
   ·材料与试剂第37页
     ·菌株第37页
     ·主要材料与试剂第37页
   ·实验方法第37-40页
     ·MALDI-TOF-TOF MS 鉴定抗菌肽氨基酸序列第37-38页
     ·抗菌肽浓度的测定第38页
     ·细菌的培养第38页
     ·真菌的培养第38页
     ·抗菌肽抗真菌活性检测第38页
     ·抗菌肽对病原菌最小抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration,MIC)第38-39页
     ·抗菌肽的抑菌动力学研究第39页
     ·稳定性检测第39页
     ·抗菌肽溶血性和凝集性第39-40页
   ·结果与讨论第40-46页
     ·MALDI-TOF/TOF-MS 鉴定抗菌肽第40-42页
     ·最低抑菌浓度测定第42-43页
     ·家蝇抗菌肽MDpep5 和MDpep9 的抗菌动力第43-44页
     ·抗菌肽MDpep5 和MDpep9 对环境的敏感性第44-46页
     ·家蝇抗菌肽的溶血性第46页
   ·本章小结第46-47页
 参考文献第47-49页
第四章 家蝇抗菌肽对不同类型细菌的细胞壁膜及胞内酶系的作用第49-72页
   ·前言第49页
   ·材料与试剂第49页
     ·菌株第49页
     ·主要试剂第49页
   ·实验方法第49-51页
     ·抗菌肽对细菌细胞壁作用检测第49-50页
     ·细胞表面微区低pH 值对于家蝇抗菌肽表面疏水性影响第50页
     ·家蝇抗菌肽对细菌超微结构的影响第50页
     ·细菌细胞荧光标记第50-51页
     ·流式细胞仪(FCM)分析第51页
   ·结果与讨论第51-68页
     ·家蝇抗菌肽对细菌细胞壁的影响第51-52页
     ·细胞表面微区低pH 值对于家蝇抗菌肽表面疏水性的影响第52-54页
     ·家蝇抗菌肽对细菌超微结构的影响第54-57页
     ·流式细胞仪( flow cytometry, FCM)检测细菌细胞受损情况第57-64页
     ·家蝇抗菌肽引发细菌细胞的亚致死状态分析第64-68页
   ·本章小结第68-69页
 参考文献第69-72页
第五章 家蝇抗菌肽与细菌DNA 的作用研究第72-85页
   ·前言第72页
   ·材料与试剂第72-73页
     ·菌株第72页
     ·主要试剂第72-73页
   ·实验方法第73-75页
     ·抗菌肽与细菌作用后对染色体DNA 的影响第73页
     ·细菌紫外吸收物的渗透检测第73-74页
     ·凝胶电泳检测抗菌肽与DNA 的结合第74页
     ·原子力显微镜(AFM)检测抗菌肽与DNA 的结合第74页
     ·抗菌肽与细菌DNA 相互作用的紫外光谱分析第74页
     ·抗菌肽与细菌DNA 结合的荧光光谱第74页
     ·抗菌肽与细菌DNA 相互作用的荧光光谱分析第74页
     ·抗菌肽对EB-DNA 复合体系滴定的荧光光谱第74页
     ·EB 对复合体系抗菌肽-DNA 滴定的荧光光谱第74-75页
   ·结果与讨论第75-83页
     ·细菌物质的泄露的紫外吸收分析第75-76页
     ·家蝇抗菌肽对细菌DNA 的损伤第76页
     ·凝胶电泳检测家蝇抗菌肽与细菌DNA 的结合第76-77页
     ·原子力显微镜检测家蝇抗菌肽与DNA 的作用第77-79页
     ·紫外光谱法检测家蝇抗菌肽与细菌DNA 相互作用第79-80页
     ·家蝇抗菌肽与细菌DNA 结合的荧光光谱第80页
     ·家蝇抗菌肽与溴化乙锭竞争结合细菌DNA第80-83页
   ·本章小结第83页
 参考文献第83-85页
第六章 家蝇抗菌肽引起细菌DNA 降解的机理探讨第85-95页
   ·前言第85页
   ·材料与试剂第85-86页
     ·菌株第85页
     ·主要试剂第85-86页
   ·实验方法第86页
     ·染色体DNA 酶切实验第86页
     ·不同浓度抗菌肽对DNA 酶切程度的影响第86页
     ·圆二色光谱第86页
   ·结果与讨论第86-93页
     ·细菌DNA 限制性内切酶酶切实验第86-87页
     ·不同浓度家蝇抗菌肽对细菌DNA 酶切的影响第87-88页
     ·家蝇抗菌肽对于细菌DNA 构象的影响第88-93页
   ·本章小结第93页
 参考文献第93-95页
论文主要结论与创新点第95-96页
 一、主要结论第95页
 二、创新点第95-96页
攻读博士学位期间发表论文清单第96-97页
致谢第97页

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