摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
文献综述 | 第10-15页 |
第一章 分子伴侣研究进展 | 第10-12页 |
·分子伴侣的概念与种类 | 第10页 |
·分子伴侣的特征 | 第10页 |
·分子伴侣的功能 | 第10-12页 |
·分子伴侣对蛋白质正确折叠的影响 | 第10-12页 |
第二章 分子伴侣Jiv90 与瘟病毒属成员相互作用研究进展 | 第12-15页 |
·分子伴侣Jiv90 与BVDV 的相互作用 | 第12-14页 |
·分子伴侣Jiv90 与CSFV 的相互作用 | 第14-15页 |
试验研究 | 第15-35页 |
第三章 分子伴侣Jiv90 基因的克隆及原核表达 | 第15-21页 |
·材料 | 第15-16页 |
·材料和试剂 | 第15页 |
·主要仪器 | 第15-16页 |
·方法 | 第16-17页 |
·引物合成 | 第16页 |
·RT- CR 反应 | 第16页 |
·原核表达载体pET-32a-Jiv90 的构建及鉴定 | 第16页 |
·Jiv90 基因在大肠埃希菌中的表达 | 第16-17页 |
·结果 | 第17-20页 |
·Jiv90 基因的RT-PCR 扩增 | 第17-18页 |
·重组原核表达载体pET-32a-Jiv90 的酶切鉴定 | 第18页 |
·不同浓度IPTG 对Jiv90 蛋白的诱导表达分析 | 第18-19页 |
·不同时间对Jiv90 蛋白的诱导表达分析 | 第19页 |
·Jiv90 蛋白的可溶性分析 | 第19-20页 |
·融合蛋白pET-32a-Jiv90 蛋白的Wester blot 检测 | 第20页 |
·讨论 | 第20页 |
·小结 | 第20-21页 |
第四章 猪Jiv90 蛋白降解特性的研究 | 第21-29页 |
·材料 | 第21页 |
·细胞株、菌株及载体 | 第21页 |
·主要工具酶、试剂及耗材 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21页 |
·方法 | 第21-23页 |
·猪Jiv90 基因的克隆 | 第21-22页 |
·真核表达载体的构建与鉴定 | 第22页 |
·重组载体的细胞转染与稳定表达细胞株的建立 | 第22页 |
·表达产物的Real-time PCR 检测 | 第22-23页 |
·Western blot 对表达产物的鉴定 | 第23页 |
·Jiv90 蛋白降解特性的观察 | 第23页 |
·结果 | 第23-27页 |
·Jiv90 基因的RT-PCR 扩增与序列分析 | 第23页 |
·Jiv90 基因真核表达载体的构建与鉴定 | 第23-24页 |
·获得EC-pEGFP-N1-Jiv90 细胞株 | 第24页 |
·EC-pEGFP-N1- Jiv90 基因mRNA 的相对定量结果 | 第24-25页 |
·EC-pEGFP-N1- Jiv90 细胞株的Western blot 检测 | 第25-26页 |
·Jiv90 蛋白的降解特性观察 | 第26-27页 |
·讨论 | 第27-28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第五章 猪Jiv90 基因的细胞和组织分布情况 | 第29-35页 |
·材料 | 第29-30页 |
·细胞株和原代细胞 | 第29页 |
·主要工具酶、试剂及耗材 | 第29-30页 |
·主要仪器设备 | 第30页 |
·方法 | 第30-31页 |
·细胞的复苏与培养 | 第30页 |
·细胞及组织的处理 | 第30页 |
·RNA 提取(Trizol 法) | 第30页 |
·RNA 产物的反转录 | 第30-31页 |
·Real-time PCR 检测Jiv90 基因细胞组织分布差异 | 第31页 |
·结果 | 第31-33页 |
·不同细胞中Jiv90 基因的分布差异情况 | 第31-32页 |
·Jiv90 基因在组织中分布差异 | 第32-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
·小结 | 第34-35页 |
结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
致谢 | 第40-42页 |
作者简介 | 第42页 |