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分子伴侣Jiv90的原核表达及其功能的初步研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
文献综述第10-15页
 第一章 分子伴侣研究进展第10-12页
   ·分子伴侣的概念与种类第10页
   ·分子伴侣的特征第10页
   ·分子伴侣的功能第10-12页
     ·分子伴侣对蛋白质正确折叠的影响第10-12页
 第二章 分子伴侣Jiv90 与瘟病毒属成员相互作用研究进展第12-15页
   ·分子伴侣Jiv90 与BVDV 的相互作用第12-14页
   ·分子伴侣Jiv90 与CSFV 的相互作用第14-15页
试验研究第15-35页
 第三章 分子伴侣Jiv90 基因的克隆及原核表达第15-21页
   ·材料第15-16页
     ·材料和试剂第15页
     ·主要仪器第15-16页
   ·方法第16-17页
     ·引物合成第16页
     ·RT- CR 反应第16页
     ·原核表达载体pET-32a-Jiv90 的构建及鉴定第16页
     ·Jiv90 基因在大肠埃希菌中的表达第16-17页
   ·结果第17-20页
     ·Jiv90 基因的RT-PCR 扩增第17-18页
     ·重组原核表达载体pET-32a-Jiv90 的酶切鉴定第18页
     ·不同浓度IPTG 对Jiv90 蛋白的诱导表达分析第18-19页
     ·不同时间对Jiv90 蛋白的诱导表达分析第19页
     ·Jiv90 蛋白的可溶性分析第19-20页
     ·融合蛋白pET-32a-Jiv90 蛋白的Wester blot 检测第20页
   ·讨论第20页
   ·小结第20-21页
 第四章 猪Jiv90 蛋白降解特性的研究第21-29页
   ·材料第21页
     ·细胞株、菌株及载体第21页
     ·主要工具酶、试剂及耗材第21页
     ·主要仪器设备第21页
   ·方法第21-23页
     ·猪Jiv90 基因的克隆第21-22页
     ·真核表达载体的构建与鉴定第22页
     ·重组载体的细胞转染与稳定表达细胞株的建立第22页
     ·表达产物的Real-time PCR 检测第22-23页
     ·Western blot 对表达产物的鉴定第23页
     ·Jiv90 蛋白降解特性的观察第23页
   ·结果第23-27页
     ·Jiv90 基因的RT-PCR 扩增与序列分析第23页
     ·Jiv90 基因真核表达载体的构建与鉴定第23-24页
     ·获得EC-pEGFP-N1-Jiv90 细胞株第24页
     ·EC-pEGFP-N1- Jiv90 基因mRNA 的相对定量结果第24-25页
     ·EC-pEGFP-N1- Jiv90 细胞株的Western blot 检测第25-26页
     ·Jiv90 蛋白的降解特性观察第26-27页
   ·讨论第27-28页
   ·小结第28-29页
 第五章 猪Jiv90 基因的细胞和组织分布情况第29-35页
   ·材料第29-30页
     ·细胞株和原代细胞第29页
     ·主要工具酶、试剂及耗材第29-30页
     ·主要仪器设备第30页
   ·方法第30-31页
     ·细胞的复苏与培养第30页
     ·细胞及组织的处理第30页
     ·RNA 提取(Trizol 法)第30页
     ·RNA 产物的反转录第30-31页
     ·Real-time PCR 检测Jiv90 基因细胞组织分布差异第31页
   ·结果第31-33页
     ·不同细胞中Jiv90 基因的分布差异情况第31-32页
     ·Jiv90 基因在组织中分布差异第32-33页
   ·讨论第33-34页
   ·小结第34-35页
结论第35-36页
参考文献第36-40页
致谢第40-42页
作者简介第42页

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