摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-15页 |
第一章 绪论 | 第15-28页 |
·国内外研究进展 | 第15-26页 |
·乳铁蛋白的分子特性 | 第15-18页 |
·乳铁蛋白的功能以及作用机理 | 第18-20页 |
·乳铁蛋白含量变化的影响因素 | 第20-21页 |
·乳铁蛋白基因的结构特点 | 第21-25页 |
·乳铁蛋白基因表达与调控特点 | 第25-26页 |
·存在的问题 | 第26页 |
·本研究的总体思路 | 第26-27页 |
·本研究目的及意义 | 第27-28页 |
第二章 初乳中乳铁蛋白的变化规律 | 第28-31页 |
·材料与方法 | 第28-29页 |
·乳样的采集 | 第28页 |
·乳清的分离及乳铁蛋白含量检测 | 第28页 |
·数据统计 | 第28-29页 |
·结果 | 第29-30页 |
·初乳中乳铁蛋白绝对含量的变化 | 第29-30页 |
·SDS-PAGE 方法检测初乳中乳铁蛋白的相对含量 | 第30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
第三章 常乳中乳铁蛋白含量的变化以及影响因素研究 | 第31-39页 |
·材料与方法 | 第31-32页 |
·奶牛的选择 | 第31页 |
·奶样的收集和处理 | 第31页 |
·乳铁蛋白含量的检测 | 第31-32页 |
·泌乳阶段和产奶量组别的划分 | 第32页 |
·体细胞数(Somatic cell count , SCC)评分 | 第32页 |
·数据分析 | 第32页 |
·结果 | 第32-37页 |
·正常奶牛组中乳铁蛋白含量 | 第32-33页 |
·乳铁蛋白与各个指标之间的相关性分析 | 第33页 |
·不同因素对乳中乳铁蛋白含量的影响 | 第33-35页 |
·正常奶牛组中不同因子的协同作用对乳中乳铁蛋白含量的影响 | 第35-36页 |
·乳中乳铁蛋白含量与SCS 之间的关系 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
·正常奶牛乳中乳铁蛋白的含量 | 第37页 |
·奶牛是否处于正常状态的判定标准 | 第37页 |
·正常奶牛乳中乳铁蛋白含量的影响因素分析 | 第37-38页 |
·乳中乳铁蛋白含量与SCS 之间的关系 | 第38-39页 |
第四章 乳铁蛋白基因启动子中 SNP 检测以及与其含量和体细胞数的关系 | 第39-47页 |
·材料与方法 | 第39-41页 |
·奶牛的选择 | 第39页 |
·奶样的收集以及体细胞测定 | 第39-40页 |
·乳铁蛋白含量的检测 | 第40页 |
·血样的采集以及DNA 的提取 | 第40页 |
·PCR 扩增、纯化后测序发现并确定SNP 位点 | 第40页 |
·数据分析 | 第40-41页 |
·结果 | 第41-45页 |
·基因的SNP 检测 | 第41-42页 |
·基因型以及基因频率 | 第42-43页 |
·乳中SCS 影响因素分析 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·乳铁蛋白基因的多态性 | 第45页 |
·奶牛胎次和泌乳月对牛奶中SCS 的影响 | 第45-46页 |
·乳铁蛋白基因多态性对乳中SCS 以及乳铁蛋白含量的影响 | 第46-47页 |
第五章 免疫条件下乳铁蛋白含量的变化规律研究 | 第47-56页 |
·材料与方法 | 第47-51页 |
·试验奶牛、地点及时间 | 第47-48页 |
·抗原释放剂ARD(Antigen Release Devise) | 第48-49页 |
·试验牛饲养管理及样品的采集 | 第49-50页 |
·体细胞数和乳常规检测 | 第50页 |
·奶牛外周血相检测 | 第50页 |
·间接ELISA 方法测定特异性抗Lipase 的Ig | 第50页 |
·夹心ELISA 方法测定乳铁蛋白绝对含量 | 第50-51页 |
·数据分析 | 第51页 |
·结果 | 第51-54页 |
·血清以及乳中特异性抗Lipase 抗体的含量 | 第51-52页 |
·血清中乳铁蛋白的含量 | 第52-53页 |
·乳中乳铁蛋白的含量 | 第53页 |
·免疫乳中乳铁蛋白含量水平与初乳之间的比较 | 第53-54页 |
·血清中乳铁蛋白含量与WBC, LYMPH, GRAN 和MID 之间的相关性 | 第54页 |
·乳中乳铁蛋白含量与血清乳铁蛋白含量、以及不同乳成分之间的相关性 | 第54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
第六章 小鼠免疫刺激后乳腺中乳铁蛋白基因 MRNA 的表达变化初步研究 | 第56-65页 |
·材料与方法 | 第56-59页 |
·小鼠及饲养管理 | 第56页 |
·试验设计以及样品采集 | 第56-57页 |
·分子生物学试验关键试剂及仪器设备 | 第57页 |
·小鼠乳腺总RNA 的提取及反转录 | 第57-58页 |
·Real Time PCR 检测乳腺Lf 基因mRNA 的表达量 | 第58-59页 |
·数据分析 | 第59页 |
·结果 | 第59-64页 |
·ISCOM 免疫对小鼠乳及血清中总IgG 浓度和特异性IgG 效价的影响 | 第59-60页 |
·小鼠乳腺总RNA 的提取效果及其目的片段的PCR 检测 | 第60页 |
·Real Time PCR 扩增效率的检验 | 第60-61页 |
·小鼠Lf 基因和GAPDH 基因的扩增曲线及熔解曲线 | 第61-62页 |
·不同泌乳天数下小鼠乳腺中Lf 基因表达相对定量结果 | 第62-63页 |
·免疫条件下小鼠乳腺中Lf 基因表达相对定量结果 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-65页 |
·不同泌乳天数下小鼠乳腺中Lf 基因相对表达量 | 第64页 |
·免疫条件下小鼠乳腺中Lf 基因相对表达量 | 第64-65页 |
第七章 全文结论 | 第65-66页 |
·初乳中乳铁蛋白含量变化规律 | 第65页 |
·常乳中乳铁蛋白含量及影响因素分析 | 第65页 |
·免疫条件下乳铁蛋白含量变化规律 | 第65页 |
·免疫条件下,小鼠乳腺内乳铁蛋白基因表达量变化 | 第65页 |
·本试验的创新点 | 第65页 |
·有待进一步研究的问题 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 | 第73-80页 |
附录一 间接ELISA 测定血清及乳清中特异性抗LIPASE 的IG相对含量的方法 | 第73-75页 |
附录二 夹心ELISA 试剂盒测定小鼠免疫球蛋白以及乳铁蛋白绝对含量的方法 | 第75-78页 |
附录三 SDS-PAGE 电泳及定量分析蛋白方法 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简历 | 第81页 |