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牛奶中乳铁蛋白含量变化及其影响因素的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 绪论第15-28页
   ·国内外研究进展第15-26页
     ·乳铁蛋白的分子特性第15-18页
     ·乳铁蛋白的功能以及作用机理第18-20页
     ·乳铁蛋白含量变化的影响因素第20-21页
     ·乳铁蛋白基因的结构特点第21-25页
     ·乳铁蛋白基因表达与调控特点第25-26页
   ·存在的问题第26页
   ·本研究的总体思路第26-27页
   ·本研究目的及意义第27-28页
第二章 初乳中乳铁蛋白的变化规律第28-31页
   ·材料与方法第28-29页
     ·乳样的采集第28页
     ·乳清的分离及乳铁蛋白含量检测第28页
     ·数据统计第28-29页
   ·结果第29-30页
     ·初乳中乳铁蛋白绝对含量的变化第29-30页
     ·SDS-PAGE 方法检测初乳中乳铁蛋白的相对含量第30页
   ·讨论第30-31页
第三章 常乳中乳铁蛋白含量的变化以及影响因素研究第31-39页
   ·材料与方法第31-32页
     ·奶牛的选择第31页
     ·奶样的收集和处理第31页
     ·乳铁蛋白含量的检测第31-32页
     ·泌乳阶段和产奶量组别的划分第32页
     ·体细胞数(Somatic cell count , SCC)评分第32页
     ·数据分析第32页
   ·结果第32-37页
     ·正常奶牛组中乳铁蛋白含量第32-33页
     ·乳铁蛋白与各个指标之间的相关性分析第33页
     ·不同因素对乳中乳铁蛋白含量的影响第33-35页
     ·正常奶牛组中不同因子的协同作用对乳中乳铁蛋白含量的影响第35-36页
     ·乳中乳铁蛋白含量与SCS 之间的关系第36-37页
   ·讨论第37-39页
     ·正常奶牛乳中乳铁蛋白的含量第37页
     ·奶牛是否处于正常状态的判定标准第37页
     ·正常奶牛乳中乳铁蛋白含量的影响因素分析第37-38页
     ·乳中乳铁蛋白含量与SCS 之间的关系第38-39页
第四章 乳铁蛋白基因启动子中 SNP 检测以及与其含量和体细胞数的关系第39-47页
   ·材料与方法第39-41页
     ·奶牛的选择第39页
     ·奶样的收集以及体细胞测定第39-40页
     ·乳铁蛋白含量的检测第40页
     ·血样的采集以及DNA 的提取第40页
     ·PCR 扩增、纯化后测序发现并确定SNP 位点第40页
     ·数据分析第40-41页
   ·结果第41-45页
     ·基因的SNP 检测第41-42页
     ·基因型以及基因频率第42-43页
     ·乳中SCS 影响因素分析第43-45页
   ·讨论第45-47页
     ·乳铁蛋白基因的多态性第45页
     ·奶牛胎次和泌乳月对牛奶中SCS 的影响第45-46页
     ·乳铁蛋白基因多态性对乳中SCS 以及乳铁蛋白含量的影响第46-47页
第五章 免疫条件下乳铁蛋白含量的变化规律研究第47-56页
   ·材料与方法第47-51页
     ·试验奶牛、地点及时间第47-48页
     ·抗原释放剂ARD(Antigen Release Devise)第48-49页
     ·试验牛饲养管理及样品的采集第49-50页
     ·体细胞数和乳常规检测第50页
     ·奶牛外周血相检测第50页
     ·间接ELISA 方法测定特异性抗Lipase 的Ig第50页
     ·夹心ELISA 方法测定乳铁蛋白绝对含量第50-51页
     ·数据分析第51页
   ·结果第51-54页
     ·血清以及乳中特异性抗Lipase 抗体的含量第51-52页
     ·血清中乳铁蛋白的含量第52-53页
     ·乳中乳铁蛋白的含量第53页
     ·免疫乳中乳铁蛋白含量水平与初乳之间的比较第53-54页
     ·血清中乳铁蛋白含量与WBC, LYMPH, GRAN 和MID 之间的相关性第54页
     ·乳中乳铁蛋白含量与血清乳铁蛋白含量、以及不同乳成分之间的相关性第54页
   ·讨论第54-56页
第六章 小鼠免疫刺激后乳腺中乳铁蛋白基因 MRNA 的表达变化初步研究第56-65页
   ·材料与方法第56-59页
     ·小鼠及饲养管理第56页
     ·试验设计以及样品采集第56-57页
     ·分子生物学试验关键试剂及仪器设备第57页
     ·小鼠乳腺总RNA 的提取及反转录第57-58页
     ·Real Time PCR 检测乳腺Lf 基因mRNA 的表达量第58-59页
     ·数据分析第59页
   ·结果第59-64页
     ·ISCOM 免疫对小鼠乳及血清中总IgG 浓度和特异性IgG 效价的影响第59-60页
     ·小鼠乳腺总RNA 的提取效果及其目的片段的PCR 检测第60页
     ·Real Time PCR 扩增效率的检验第60-61页
     ·小鼠Lf 基因和GAPDH 基因的扩增曲线及熔解曲线第61-62页
     ·不同泌乳天数下小鼠乳腺中Lf 基因表达相对定量结果第62-63页
     ·免疫条件下小鼠乳腺中Lf 基因表达相对定量结果第63-64页
   ·讨论第64-65页
     ·不同泌乳天数下小鼠乳腺中Lf 基因相对表达量第64页
     ·免疫条件下小鼠乳腺中Lf 基因相对表达量第64-65页
第七章 全文结论第65-66页
   ·初乳中乳铁蛋白含量变化规律第65页
   ·常乳中乳铁蛋白含量及影响因素分析第65页
   ·免疫条件下乳铁蛋白含量变化规律第65页
   ·免疫条件下,小鼠乳腺内乳铁蛋白基因表达量变化第65页
   ·本试验的创新点第65页
   ·有待进一步研究的问题第65-66页
参考文献第66-73页
附录第73-80页
 附录一 间接ELISA 测定血清及乳清中特异性抗LIPASE 的IG相对含量的方法第73-75页
 附录二 夹心ELISA 试剂盒测定小鼠免疫球蛋白以及乳铁蛋白绝对含量的方法第75-78页
 附录三 SDS-PAGE 电泳及定量分析蛋白方法第78-80页
致谢第80-81页
作者简历第81页

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