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利用苦瓜几丁质酶和苜蓿防御素基因提高水稻抗病性的研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-16页
第一章 文献综述第16-41页
   ·植物的抗病反应第16-24页
     ·植物的抗病性第16-18页
     ·利用植物的抗病基因第18-22页
     ·利用植物的PR基因第22-24页
   ·水稻抗病基因工程研究第24-41页
     ·水稻抗病基因的利用第24-26页
     ·水稻无毒基因的利用第26-27页
     ·R和Avr基因利用存在的问题与对策第27页
     ·导入植物的PRs蛋白基因增强水稻广谱抗性第27-37页
     ·利用转入植保素基因提高植物的抗病性第37-38页
     ·导入一些抗毒素基因增强植物的抗病性第38页
     ·依赖于同源性的病毒基因沉默第38页
     ·在植物抗病基因工程中的多基因协同作用第38-39页
     ·基因工程作物的安全性第39-41页
第二章 引言第41-45页
   ·论文的立题依据第41-43页
   ·论文的技术路线第43-45页
     ·alfAFP基因的酵母表达及对水稻病原菌的体外抑制实验第43-44页
     ·alfAFP、McCHIT1和alfAFP/McCHIT1转基因水稻的抗病检测第44-45页
第三章 籼稻缙恢35的农杆菌介导遗传转化体系的建立第45-69页
   ·实验材料第45-47页
     ·实验材料、菌种和载体第45页
     ·工具酶和生化试剂第45-46页
     ·主要仪器设备第46页
     ·主要培养基配方和缓冲液配置第46-47页
   ·实验方法第47-52页
     ·植物表达载体的构建第47-49页
     ·水稻的农杆菌介导的遗传转化第49-51页
     ·拟转基因植物的分子检测第51-52页
   ·结果与分析第52-65页
     ·植物表达载体的构建第52-57页
     ·缙恢35的农杆菌介导遗传转化体系的建立第57-65页
   ·讨论第65-67页
     ·对愈伤组织诱导和继代的影响第65-66页
     ·对愈伤组织分化再生的影响第66-67页
   ·小结第67-69页
第四章 植物防御素alfAFP基因的酵母体外表达及体外抑菌研究第69-80页
   ·实验材料第69-71页
     ·菌株和主要载体第69页
     ·主要药品与试剂第69-70页
     ·主要仪器设备第70页
     ·主要培养基和缓冲液配方第70-71页
   ·实验方法第71-73页
     ·alfAFP基因的酵母表达载体的构建第71页
     ·重组表达质粒的提取第71页
     ·质粒的线性化及去磷酸化处理第71-72页
     ·毕赤酵母感受态细胞的制备及电转化第72页
     ·酵母转化子的G418筛选第72-73页
     ·重组蛋白的诱导表达第73页
   ·重组蛋白的抗菌活性检测第73-74页
     ·水稻纹枯病的抗性检测第73页
     ·稻瘟病的抗性检测第73页
     ·白叶枯病的抗性检测第73-74页
   ·结果和分析第74-78页
     ·alfAFP基因的扩增和载体的构建第74页
     ·重组质粒对毕赤酵母GS115的转化第74-75页
     ·pPIC9K-alfAFP诱导表达的鉴定第75-78页
   ·讨论第78-79页
   ·小结第79-80页
第五章 转基因水稻的抗病检测第80-113页
   ·实验材料与方法第80-86页
     ·实验材料第80-81页
     ·实验方法第81-86页
   ·结果与分析第86-107页
     ·McCHIT1转基因水稻的抗病检测第86-93页
     ·alfAFP转基因水稻抗病检测第93-99页
     ·McCHIT1-alfAFP双价转基因水稻抗病检测第99-105页
     ·McCHIT1-alfAFP双价转基因水稻与McCHIT1、alfAFP单价转基因水稻的抗病性的比较第105-106页
     ·McCHIT1、alfAFP及McCHIT1-alfAFP双价转基因水稻抗白叶枯病的抗性检测第106-107页
   ·讨论第107-111页
     ·转基因的表达水平与转基因水稻抗病性的关系第107-108页
     ·不同抗性基因的协同作用进一步增强了植物抗病性第108-109页
     ·外源基因在转基因水稻中的整合、表达和遗传第109-111页
   ·小结第111-113页
第六章 转基因水稻后代主要农艺性状的分析第113-124页
   ·材料和方法第113页
     ·供试材料第113页
     ·农艺性状考查第113页
   ·结果与分析第113-120页
     ·McCHIT1转基因水稻T_2代主要农艺性状考查第113-116页
     ·alfAFP转基因水稻T_2代主要农艺性状考查第116-118页
     ·McCHIT1/alfAFP转基因水稻T_2代主要农艺性状考查第118-120页
   ·讨论第120-122页
     ·转基因后代植株主要农艺性状的变异第120-122页
     ·转基因后代植株农艺性状的变异的原因第122页
   ·小结第122-124页
第七章 结论第124-127页
   ·主要结论第124-126页
     ·籼稻农杆菌介导的遗传转化体系的建立第124页
     ·alfAFP体外表达蛋白对水稻三大病原菌的抑制作用第124页
     ·超量表达McCHIT1、alfAFP及其双价基因转基因水稻的抗病性检测第124-126页
   ·主要创新点第126-127页
参考文献第127-144页
附录第144-148页
致谢第148页

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