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甜菜M14品系特异表达基因编码蛋白性质的研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第1章 前言第9-20页
   ·无融合生殖第9-11页
   ·甜菜M14品系特异表达基因M14-263和M14-341第11-12页
     ·基因M14-263相关信息第11-12页
     ·基因M14-341相关信息第12页
   ·Rab蛋白第12-15页
     ·Rab蛋白的结构第13页
     ·Rab蛋白的定位与功能第13-14页
     ·植物Rab蛋白功能的研究进展第14-15页
   ·MADS-box基因第15-17页
     ·MADS-box基因所编码蛋白的结构第15-16页
     ·MADS-box基因的功能第16-17页
   ·原核表达体系的研究进展第17-18页
   ·本实验内容及目的第18-19页
   ·本实验技术路线第19-20页
第2章 材料与方法第20-37页
   ·实验材料第20-22页
     ·植物材料第20页
     ·表达载体及宿主菌株第20页
     ·引物第20-21页
     ·实验试剂及药品第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
   ·实验方法第22-37页
     ·cDNA的制备第22-23页
     ·表达载体的构建第23-29页
     ·阳性克隆子的筛选第29-30页
     ·重组质粒的提取及转化第30-31页
     ·诱导表达目的蛋白及SDS-PAGE电泳检测第31-33页
     ·目的蛋白的Western印迹鉴定第33-34页
     ·重组质粒稳定性鉴定第34-35页
     ·目的蛋白表达条件的优化第35页
     ·目的蛋白的热稳定性第35-36页
     ·目的蛋白的亲水性第36-37页
第3章 结果与分析第37-64页
   ·cDNA的制备第37-38页
     ·甜菜M14品系花器总RNA的制备及检测第37页
     ·甜菜M14品系花器总cDNA的制备第37-38页
   ·表达载体的构建第38-43页
     ·基因 M14-263表达载体的构建第38-40页
     ·基因 M14-341表达载体的构建第40-43页
   ·阳性克隆子的筛选与鉴定第43-47页
     ·基因M14-263阳性克隆子的筛选与鉴定第43-45页
     ·基因M14-341阳性克隆子的筛选与鉴定第45-47页
   ·重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后的鉴定第47-49页
     ·基因M14-263阳性克隆子的筛选与鉴定第47-48页
     ·基因M14-341阳性克隆子的筛选与鉴定第48-49页
   ·诱导表达目的蛋白及SDS-PAGE电泳检测第49-51页
     ·M14-263蛋白的SDS-PAGE电泳检测第49-50页
     ·M14-341蛋白的SDS-PAGE电泳检测第50-51页
   ·目的蛋白的Western印迹鉴定第51-52页
     ·M14-263蛋白的Western印迹鉴定第51-52页
     ·M14-341蛋白的Western印迹鉴定第52页
   ·重组质粒的稳定性鉴定第52-54页
     ·重组质粒pET-28a-M14-263稳定性的鉴定第52-53页
     ·重组质粒pET-28a-M14-341稳定性的鉴定第53-54页
   ·目的蛋白表达条件的优化第54-61页
     ·M14-263蛋白表达条件的优化第54-57页
     ·M14-341蛋白表达条件的优化第57-61页
   ·目的蛋白的热稳定性第61-62页
     ·M14-263蛋白的热稳定性第61-62页
     ·M14-341蛋白的热稳定性第62页
   ·目的蛋白的亲水性第62-64页
     ·M14-263蛋白的亲水性第62-63页
     ·M14-341蛋白的亲水性第63-64页
第4章 讨论第64-70页
   ·影响融合蛋白表达的因素第64-65页
   ·融合蛋白的性质与生物信息学分析第65-66页
     ·融合蛋白M14-263的性质与生物信息学分析第65页
     ·融合蛋白M14-341的性质与生物信息学分析第65-66页
   ·原核表达载体的选择第66-67页
   ·Western 印迹中的问题第67-68页
   ·下一步实验计划第68-70页
结论第70-71页
参考文献第71-77页
附录第77-80页
致谢第80-81页
攻读学位期间发表的学术论文第81-82页

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