中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第1章 前言 | 第9-20页 |
·无融合生殖 | 第9-11页 |
·甜菜M14品系特异表达基因M14-263和M14-341 | 第11-12页 |
·基因M14-263相关信息 | 第11-12页 |
·基因M14-341相关信息 | 第12页 |
·Rab蛋白 | 第12-15页 |
·Rab蛋白的结构 | 第13页 |
·Rab蛋白的定位与功能 | 第13-14页 |
·植物Rab蛋白功能的研究进展 | 第14-15页 |
·MADS-box基因 | 第15-17页 |
·MADS-box基因所编码蛋白的结构 | 第15-16页 |
·MADS-box基因的功能 | 第16-17页 |
·原核表达体系的研究进展 | 第17-18页 |
·本实验内容及目的 | 第18-19页 |
·本实验技术路线 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-37页 |
·实验材料 | 第20-22页 |
·植物材料 | 第20页 |
·表达载体及宿主菌株 | 第20页 |
·引物 | 第20-21页 |
·实验试剂及药品 | 第21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-37页 |
·cDNA的制备 | 第22-23页 |
·表达载体的构建 | 第23-29页 |
·阳性克隆子的筛选 | 第29-30页 |
·重组质粒的提取及转化 | 第30-31页 |
·诱导表达目的蛋白及SDS-PAGE电泳检测 | 第31-33页 |
·目的蛋白的Western印迹鉴定 | 第33-34页 |
·重组质粒稳定性鉴定 | 第34-35页 |
·目的蛋白表达条件的优化 | 第35页 |
·目的蛋白的热稳定性 | 第35-36页 |
·目的蛋白的亲水性 | 第36-37页 |
第3章 结果与分析 | 第37-64页 |
·cDNA的制备 | 第37-38页 |
·甜菜M14品系花器总RNA的制备及检测 | 第37页 |
·甜菜M14品系花器总cDNA的制备 | 第37-38页 |
·表达载体的构建 | 第38-43页 |
·基因 M14-263表达载体的构建 | 第38-40页 |
·基因 M14-341表达载体的构建 | 第40-43页 |
·阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第43-47页 |
·基因M14-263阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第43-45页 |
·基因M14-341阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第45-47页 |
·重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后的鉴定 | 第47-49页 |
·基因M14-263阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第47-48页 |
·基因M14-341阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第48-49页 |
·诱导表达目的蛋白及SDS-PAGE电泳检测 | 第49-51页 |
·M14-263蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第49-50页 |
·M14-341蛋白的SDS-PAGE电泳检测 | 第50-51页 |
·目的蛋白的Western印迹鉴定 | 第51-52页 |
·M14-263蛋白的Western印迹鉴定 | 第51-52页 |
·M14-341蛋白的Western印迹鉴定 | 第52页 |
·重组质粒的稳定性鉴定 | 第52-54页 |
·重组质粒pET-28a-M14-263稳定性的鉴定 | 第52-53页 |
·重组质粒pET-28a-M14-341稳定性的鉴定 | 第53-54页 |
·目的蛋白表达条件的优化 | 第54-61页 |
·M14-263蛋白表达条件的优化 | 第54-57页 |
·M14-341蛋白表达条件的优化 | 第57-61页 |
·目的蛋白的热稳定性 | 第61-62页 |
·M14-263蛋白的热稳定性 | 第61-62页 |
·M14-341蛋白的热稳定性 | 第62页 |
·目的蛋白的亲水性 | 第62-64页 |
·M14-263蛋白的亲水性 | 第62-63页 |
·M14-341蛋白的亲水性 | 第63-64页 |
第4章 讨论 | 第64-70页 |
·影响融合蛋白表达的因素 | 第64-65页 |
·融合蛋白的性质与生物信息学分析 | 第65-66页 |
·融合蛋白M14-263的性质与生物信息学分析 | 第65页 |
·融合蛋白M14-341的性质与生物信息学分析 | 第65-66页 |
·原核表达载体的选择 | 第66-67页 |
·Western 印迹中的问题 | 第67-68页 |
·下一步实验计划 | 第68-70页 |
结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
附录 | 第77-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第81-82页 |