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猪圆环病毒1型Cap蛋白的原核表达及PCV-1/PCV-2抗体鉴别ELISA的建立

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-25页
   ·病原学研究进展第11-16页
     ·病毒的发现第11-12页
     ·病毒的理化特性及培养特性第12页
     ·PCV的基因组特征第12-13页
     ·PCV基因组的复制与转录第13-14页
     ·病毒主要的编码蛋白第14-16页
   ·流行病学第16-17页
   ·PCV-2相关的疾病第17-19页
     ·断奶仔猪多系统衰竭综合征第18页
     ·猪皮炎和肾病综合征第18页
     ·繁殖障碍第18-19页
     ·增生性坏死性肺炎第19页
     ·先天性震颤第19页
     ·猪呼吸道综合征第19页
   ·诊断方法第19-23页
     ·猪圆环病的临床诊断第20页
     ·猪圆环病的病理学诊断第20页
     ·猪圆环病毒的实验室诊断第20-23页
   ·研究的目的和意义第23-25页
2 材料与方法第25-35页
   ·材料第25-27页
     ·实验动物第25页
     ·质粒、载体、菌种、病毒、细胞第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·引物第26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·方法第27-35页
     ·PCV-1 ORF2基因的原核表达及纯化第27-30页
     ·检测PCV-1抗体的间接ELISA诊断方法的建立第30-32页
     ·PCV-1、PCV-2鉴别ELISA诊断方法的初步建立第32-35页
3 结果与分析第35-45页
   ·PCV-1 ORF2基因的原核表达及纯化第35-38页
     ·PCV-1 ORF2A、ORF2B、ORF2C基因的扩增第35页
     ·重组克隆载体酶切鉴定第35页
     ·PCV-1 ORF2A、ORF2B、ORF2C基因核苷酸序列测定结果第35-36页
     ·重组表达载体酶切鉴定第36-37页
     ·重组蛋白表达及可溶性分析第37页
     ·重组蛋白的纯化及Western blot结果第37-38页
   ·检测PCV-1抗体的间接ELISA诊断方法的建立第38-43页
     ·CapA、CapB、CapC抗原性的比较第38页
     ·阳性血清效价的检测第38页
     ·抗原最适包被量与血清最适稀释度的确定第38-39页
     ·工作条件的优化第39-40页
     ·判定标准第40-41页
     ·特异性试验第41-42页
     ·敏感性试验第42页
     ·批内重复试验第42页
     ·与IPMA检测结果比较试验第42页
     ·临床样品检测第42-43页
   ·PCV-1、PCV-2鉴别ELISA诊断方法的初步建立第43-45页
     ·抗原最适包被量与血清最适稀释度的确定试验第43页
     ·工作条件的优化第43页
     ·特异性反应试验第43-44页
     ·批内重复试验第44页
     ·与IPMA检测结果比较试验第44页
     ·临床样品检测第44-45页
4 讨论第45-49页
   ·重组蛋白原核表达第45-46页
     ·表达载体的选择第45页
     ·原核表达条件的优化第45-46页
     ·包涵体蛋白的纯化第46页
   ·目的蛋白的选择及应用第46-47页
   ·PCV-1 Cap间接ELISA方法的条件优化第47页
   ·PCV-1 Cap间接ELISA诊断方法的判定标准及应用第47-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55-56页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第56页

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