陆地棉棉铃离层赤霉素、乙烯处理相关基因差减文库的构建
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩写词表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-25页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·蕾铃脱落的生物学规律 | 第12-13页 |
| ·离层的形成 | 第13-14页 |
| ·蕾铃脱落的生理原因 | 第14-15页 |
| ·影响蕾铃脱落的环境因素 | 第14页 |
| ·有机养料与蕾铃脱落的关系 | 第14-15页 |
| ·受精作用与幼铃脱落的关系 | 第15-16页 |
| ·环境对受精作用的影响 | 第15-16页 |
| ·受精作用对于叶片同化产物运输分配的影响 | 第16页 |
| ·激素与蕾铃脱落的关系 | 第16-19页 |
| ·生长素 | 第16-17页 |
| ·乙烯 | 第17页 |
| ·赤霉素 | 第17-18页 |
| ·脱落酸 | 第18页 |
| ·逆境对激素平衡的影响 | 第18-19页 |
| ·衰老因素 | 第19页 |
| ·其他物质 | 第19页 |
| ·病虫危害对蕾铃脱落的影响 | 第19-20页 |
| ·机械损伤对蕾铃脱落的影响 | 第20页 |
| ·分离植物差异表达的方法 | 第20-23页 |
| ·差异显示PCR | 第20-21页 |
| ·cDNA代表性差异分析 | 第21页 |
| ·cDNA-AFLP | 第21-22页 |
| ·抑制差减杂交 | 第22页 |
| ·基因表达系列分析 | 第22-23页 |
| ·基因芯片 | 第23页 |
| ·本课题的研究意义和目的 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-39页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株和载体 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·缓冲液和培养基配方 | 第25-26页 |
| ·处理与取材 | 第26页 |
| ·组织学切片 | 第26页 |
| ·提取总RNA和分离mRNA | 第26-28页 |
| ·提取总RNA | 第26-27页 |
| ·分离mRNA | 第27-28页 |
| ·SSH差减文库的构建 | 第28-34页 |
| ·cDNA第一链合成 | 第28页 |
| ·cDNA第二链合成 | 第28-29页 |
| ·RsaI酶切 | 第29页 |
| ·接头连接 | 第29-31页 |
| ·第一次杂交 | 第31页 |
| ·第二次杂交 | 第31-32页 |
| ·第一次PCR扩增 | 第32页 |
| ·第二次PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·差减片段与载体的连接 | 第33页 |
| ·连接产物转化 | 第33-34页 |
| ·差减文库插入片断长度检测 | 第34页 |
| ·差减基因片段的反向Northern杂交筛选 | 第34-36页 |
| ·点膜 | 第34-35页 |
| ·探针标记 | 第35页 |
| ·反向Northern杂交筛选 | 第35-36页 |
| ·差异表达克隆的挑取及测序 | 第36页 |
| ·序列同源性检索 | 第36页 |
| ·差异表达基因的RT-PCR分析 | 第36-39页 |
| ·DNase处理 | 第36-37页 |
| ·RNA定量 | 第37页 |
| ·cDNA逆转录 | 第37页 |
| ·PCR | 第37-39页 |
| 3 结果和分析 | 第39-51页 |
| ·赤霉素,乙烯对棉铃脱落的影响 | 第39-41页 |
| ·离层细胞的组织学分析 | 第41页 |
| ·总RNA含量和质量的检测 | 第41-42页 |
| ·mRNA的质量检测 | 第42-43页 |
| ·SSH文库的构建 | 第43-44页 |
| ·文库装载和克隆挑选 | 第44-45页 |
| ·文库初步筛选 | 第45页 |
| ·PCR扩增筛选 | 第45页 |
| ·反向Northern筛选 | 第45页 |
| ·测序结果及其同源性分析 | 第45-49页 |
| ·同源性检索 | 第45-47页 |
| ·已测序EST序列分类 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR分析结果 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·关于脱落率的调查 | 第51页 |
| ·关于抑制差减杂交的田间取材 | 第51页 |
| ·离层总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·差减文库的构建 | 第52页 |
| ·离层差异表达基因的探讨 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
