| 摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-10页 |
| 英文词缩写表 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-18页 |
| 1 GnRH的分子结构及主要生理作用 | 第11-12页 |
| ·GnRH的分子结构 | 第11页 |
| ·GnRH的主要生理作用 | 第11-12页 |
| 2 GnRH疫苗的发展过程 | 第12-15页 |
| ·GnRH合成肽疫苗 | 第12-14页 |
| ·GnRH基因工程疫苗 | 第14-15页 |
| 3 GnRH疫苗对动物机体产生的影响及其应用 | 第15-17页 |
| ·GnRH疫苗对动物机体产生的影响 | 第15-16页 |
| ·GnRH疫苗的应用 | 第16-17页 |
| 4 GnRH疫苗前景展望 | 第17-18页 |
| 引言 | 第18-20页 |
| 实验部分 | 第20-39页 |
| 1 材料和方法 | 第20-30页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·GnRH六聚体基因片段 | 第20页 |
| ·菌株与载体 | 第20页 |
| ·主要工具酶及试剂盒 | 第20页 |
| ·其他主要相关试剂 | 第20-21页 |
| ·标准参照物 | 第21页 |
| ·缓冲液、试剂及培养基的配制 | 第21-22页 |
| ·仪器设备 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-30页 |
| ·GnRH六聚体基因的人工合成 | 第23页 |
| ·GnRH-6/pMAL-c2x重组质粒的构建 | 第23-27页 |
| ·目的基因在大肠杆菌BL21中的诱导表达 | 第27页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·表达产物及纯化产物的SDS-PAGE分析 | 第28页 |
| ·融合蛋白反直原性的鉴定 | 第28页 |
| ·融合蛋白免疫原性的鉴定 | 第28-30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-35页 |
| ·GnRH-6/pMAL-c2x重组质粒的构建 | 第30页 |
| ·GnRH-6基因与pMAL-c2x质粒的酶切、连接及转化 | 第30页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·表达产物及纯化产物的SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| ·融合蛋白反应原性的鉴定 | 第31-32页 |
| ·融合蛋白免疫原性的鉴定 | 第32-35页 |
| ·睾丸大小与重量的测定 | 第32-33页 |
| ·睾丸组织学观察 | 第33-35页 |
| 3 讨论 | 第35-38页 |
| ·GnRH基因的设计 | 第35页 |
| ·关于IPTG的诱导时间及IPTG使用浓度 | 第35页 |
| ·关于融合蛋白的表达量 | 第35页 |
| ·关于融合蛋白的纯化工艺 | 第35-36页 |
| ·关于细菌沉淀中融合蛋白的残留 | 第36页 |
| ·关于融合蛋白中MBP的用途 | 第36页 |
| ·关于动物实验鉴定融合蛋白免疫原性过程中小白鼠睾丸变化情况 | 第36-37页 |
| ·关于睾丸切片 | 第37-38页 |
| 4 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-47页 |
| 附录A | 第47-49页 |
| 附录B | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |