| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-22页 |
| 1.呼肠孤病毒的研究现状 | 第10-16页 |
| ·禽呼肠孤病毒简介 | 第10-11页 |
| ·禽呼肠孤病毒历史 | 第11-12页 |
| ·禽呼肠孤病毒特征 | 第12-14页 |
| ·禽呼肠孤病毒的分子生物学 | 第14-16页 |
| 2.动物疫苗研究进展 | 第16-22页 |
| ·灭活疫苗和减毒活疫苗 | 第17页 |
| ·减毒活疫苗 | 第17-18页 |
| ·亚单位疫苗 | 第18页 |
| ·基因工程疫苗 | 第18-22页 |
| 第一章 DRV σB和σC蛋白的原核表达和纯化 | 第22-34页 |
| 1 材料 | 第22页 |
| ·菌种、重组质粒、血清、培养基 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| 2 方法 | 第22-27页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·质粒转化 | 第23页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第23页 |
| ·确定目的蛋白(σB和σC)的最佳诱导条件 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳鉴定 | 第25-26页 |
| ·表达产物的Western-blotting鉴定 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析: | 第27-28页 |
| ·IPTG诱导条件优化 | 第27页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第27页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·Western-blot检测 | 第28页 |
| 4 讨论: | 第28-34页 |
| ·包涵体的形成和纯化 | 第28-29页 |
| ·包涵体的变性和复性 | 第29-34页 |
| 第二章 检测番鸭呼肠孤病毒抗体的重组σC蛋白—乳胶凝集试验的建立 | 第34-38页 |
| 1 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·重组质粒的转化 | 第34页 |
| ·σC蛋白融合表达产物的获得 | 第34页 |
| ·纯化产物的SDS-PAGE电泳 | 第34页 |
| ·乳胶的预处理 | 第34页 |
| ·重组σC蛋白致敏乳胶最佳条件的选择 | 第34-35页 |
| ·乳胶凝集试验操作程序 | 第35页 |
| ·致敏乳胶质量检验 | 第35-36页 |
| 2.结果 | 第36-37页 |
| ·重组σC蛋白致敏乳胶最佳条件的确定 | 第36页 |
| ·致敏乳胶质量检验结果 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第三章 S3、S4 ORF2基因亚单位疫苗的免疫原性试验 | 第38-42页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| ·材料 | 第38页 |
| ·σB、σC蛋白的的大量表达及其纯化 | 第38页 |
| ·乳化制苗 | 第38页 |
| ·雏番鸭的免疫 | 第38-39页 |
| ·攻毒 | 第39页 |
| ·间接ELISA法检测血清抗体水平 | 第39页 |
| 2.结果 | 第39-41页 |
| ·σB、σC蛋白抗原免疫及攻毒后抗体产生情况 | 第39页 |
| ·发病和死亡情况 | 第39-41页 |
| 3.讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 禽(番鸭)呼肠孤病毒σB和σC蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位预测 | 第42-51页 |
| 1 材料和方法 | 第42-43页 |
| ·禽(番鸭)呼肠孤病毒σB和σC蛋白的氨基酸序列 | 第42-43页 |
| ·σB和σC蛋白二级结构的预测 | 第43页 |
| ·σB和σC蛋白B细胞抗原表位的预测 | 第43页 |
| 2 结果 | 第43-50页 |
| ·σB蛋白的二级结构和抗原表位 | 第43-47页 |
| ·σB蛋白的二级结构的预测 | 第43-45页 |
| ·σB蛋白的亲水性分析 | 第45页 |
| ·σB蛋白的表面可能性分析 | 第45页 |
| ·σB蛋白骨架区的柔韧性分析 | 第45页 |
| ·σB蛋白B细胞抗原表位的预测分析 | 第45-46页 |
| ·综合分析 | 第46-47页 |
| ·σC蛋白的二级结构和抗原表位 | 第47-50页 |
| ·σC蛋白二级结构的预测 | 第47-48页 |
| ·σC蛋白的亲水性分析 | 第48页 |
| ·σC蛋白的表面可能性分析 | 第48页 |
| ·σC蛋白骨架区的柔韧性分析 | 第48-49页 |
| ·σC蛋白B细胞抗原表位的预测分析 | 第49页 |
| ·综合分析 | 第49-50页 |
| 3.讨论 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
