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罗伦隐球酵母B40脂肪酶的分离纯化及扩展青霉脂肪酶突变体的构建

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
中文文摘第6-11页
第1章 绪论第11-37页
   ·课题背景第11-13页
   ·脂肪酶的催化性质第13-16页
     ·脂肪酶催化机理第13-16页
   ·脂肪酶的研究技术第16-33页
     ·脂肪酶的纯化方法第16-24页
     ·脂肪酶的浓缩方法第24-27页
     ·酶蛋白印迹方法第27-32页
     ·脂肪酶的定向改造第32-33页
   ·脂肪酶的应用第33-37页
     ·脂肪酶在洗涤剂工业上的应用第33页
     ·脂肪酶在食品工业上的应用第33-34页
     ·脂肪酶在造纸工业上的应用第34页
     ·脂肪酶在有机合成工业上的应用第34-35页
     ·脂肪酶在油类合成方面的应用第35-36页
     ·其它方面的应用第36-37页
第2章 罗伦隐球酵母胞外脂肪酶的分离纯化及特性分析第37-57页
   ·材料与方法第37-45页
     ·材料第37-39页
     ·方法与步骤第39-45页
   ·结果与分析第45-57页
     ·C.laurentii B40培养基优化第45-46页
     ·C.laurentii B40脂肪酶的分离纯化第46-49页
     ·C.laurentii B40脂肪酶N端序列分析第49页
     ·C.laurentii B40脂肪酶的最适作用pH及pH稳定性第49-51页
     ·C.laurentii B40脂肪酶的最适作用温度及热稳定性第51-52页
     ·C.laurentii B40脂肪酶的底物特异性第52-54页
     ·各种金属离子及表面活性剂对脂肪酶活性的影响第54-57页
第3章 扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建第57-71页
   ·材料与方法第58-66页
     ·材料第58-60页
     ·方法与步骤第60-66页
   ·结果与分析第66-71页
     ·叠加突变基因的获得第66页
     ·获得叠加突变体重组克隆质粒pSK-ep8-R182K第66-67页
     ·获得叠加突变体重组表达质粒pAO815-ep8-R182K第67页
     ·叠加突变体pAO815-ep8-R182K阳性转化子的筛选第67页
     ·叠加突变体PEL-ep8-R182K-GS的发酵及表达产物的鉴定第67-68页
     ·叠加突变体PEL-ep8-R182K-GS表达产物的特性研究第68-71页
第4章 讨论第71-75页
   ·罗伦隐球酵母B40胞外脂肪酶的分离纯化及特性分析第71-73页
     ·发酵培养基对罗伦隐球酵母产酶的影响第71页
     ·罗伦隐球酵母B40脂肪酶的分离纯化第71-72页
     ·罗伦隐球酵母B40脂肪酶的酶学特性第72-73页
   ·扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建第73-75页
     ·叠加突变提高了扩展青霉脂肪酶的活性第73页
     ·叠加突变使扩展青霉脂肪酶稳定性降低第73-75页
结论第75-77页
 1. 罗伦隐球酵母B40脂肪酶的分离纯化及特性分析第75页
 2. 扩展青霉碱性脂肪酶叠加突变第75-77页
附录第77-79页
参考文献第79-87页
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果第87-89页
致谢第89-91页
个人简历第91-93页

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