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基于等位特异引物技术和双链置换探针技术的实时PCR基因分型研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
英文缩写词表第13-14页
第一章 ARMS 引物四步法对乙醇脱氢酶2 基因的实时PCR 分型第14-29页
 第一节 引言第14-16页
 第二节 材料与方法第16-18页
 第三节 结果与分析第18-24页
   ·荧光染料EvaGreen 与SYBR Green I 的比较第18-19页
   ·PCR 扩增产物和引物二聚体熔解曲线分析第19-20页
   ·三步法与四步法实时PCR 基因分型比较第20-21页
   ·实时PCR 检测基因组DNA 的灵敏度实验第21-22页
   ·四步法实时PCR 分型特异性实验第22-23页
   ·150 份外周血标本的四步法实时PCR 基因分型第23-24页
 第四节 讨论第24-26页
 参考文献第26-29页
第二章 硫代磷酸化修饰引物对β-珠蛋白基因的实时PCR 分型第29-47页
 第一节 引言第29-31页
 第二节 材料与方法第31-36页
 第三节 结果与分析第36-43页
   ·等位基因特异引物实时PCR 基因分型第36-38页
   ·3′末端碱基硫代磷酸化修饰引物对核酸外切酶的耐受性研究第38-41页
   ·3′最末端一个碱基进行硫代磷酸化修饰的等位基因特异引物实时PCR分型第41-42页
   ·106 份临床基因组DNA 标本的实时PCR 检测第42-43页
 第四节 讨论第43-44页
 参考文献第44-47页
第三章 荧光双链置换探针对乙醛脱氢酶2 基因的实时PCR 分型第47-65页
 第一节 引言第47-49页
 第二节 材料与方法第49-53页
 第三节 结果与分析第53-59页
   ·荧光双链置换探针实时PCR 对ALDH2 基因分型的原理第53-54页
   ·荧光双链置换探针与合成靶序列进行变温杂交第54-55页
   ·靶序列二级结构分析第55-56页
   ·荧光双链置换探针实时PCR 基因分型第56-57页
   ·荧光双链置换探针实时PCR 的灵敏度实验第57-58页
   ·限制性片段长度多态性分型实验第58-59页
   ·实时PCR 检测136 份外周血标本第59页
 第四节 讨论第59-61页
 参考文献第61-65页
第四章 荧光双链置换探针对HLA-A 基因的实时PCR 分型第65-81页
 第一节 引言第65-67页
 第二节 材料与方法第67-70页
 第三节 结果与分析第70-75页
   ·HLA-A 基因的双链置换探针实时PCR 分型原理第70-71页
   ·扩增基因片段电泳验证第71-72页
   ·荧光双链置换探针实时PCR 体系的优化第72-74页
   ·HLA-A 基因的双链置换探针实时PCR 分型第74-75页
 第四节 讨论第75-77页
 参考文献第77-81页
发表交流论文第81-82页
致谢第82页

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