| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语 | 第11-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-36页 |
| ·链霉菌简介 | 第14-15页 |
| ·链霉菌的遗传不稳定 | 第15-17页 |
| ·RecA | 第16页 |
| ·Tpg和Tap | 第16-17页 |
| ·DNA旋转酶 | 第17页 |
| ·链霉菌的形态分化 | 第17-18页 |
| ·链霉菌两种模式的细胞分裂 | 第18-21页 |
| ·细胞分裂中染色体的分离 | 第21-23页 |
| ·细胞分裂过程中染色体分离简介 | 第21-22页 |
| ·链霉菌染色体分离的研究现状 | 第22-23页 |
| ·FtsK家族蛋白在细菌细胞分裂中的作用 | 第23-31页 |
| ·FtsK参与隔膜形成 | 第23-26页 |
| ·FtsK参与染色体的分离 | 第26-28页 |
| ·FtsK参与染色体的转运 | 第28-31页 |
| ·PCR-targeting重组系统简介 | 第31-33页 |
| ·基因突变体构建的常用方法 | 第31-32页 |
| ·链霉菌PCR-targeting系统进行重组的原理 | 第32-33页 |
| ·EGFP报告系统的应用 | 第33-35页 |
| ·本研究的工作基础、目的和意义 | 第35-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-58页 |
| ·菌株 | 第36-37页 |
| ·质粒 | 第37-41页 |
| ·引物 | 第41-42页 |
| ·培养基和生化试剂 | 第42-45页 |
| ·实验方法 | 第45-58页 |
| ·链霉菌培养及菌种保藏 | 第45页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第45-46页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的少量快速提取及检测 | 第46页 |
| ·链霉菌总DNA的少量快速提取 | 第46页 |
| ·DNA溶液中蛋白质及RNA的去除 | 第46-47页 |
| ·DNA片段的回收 | 第47页 |
| ·载体的去磷酸化 | 第47-48页 |
| ·DNA连接 | 第48页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)及转化 | 第48页 |
| ·AT克隆 | 第48-49页 |
| ·IPTG诱导的大肠杆菌中重组基因的表达 | 第49页 |
| ·PCR技术 | 第49-50页 |
| ·PCR-Targeting技术中大肠杆菌电转化感受态的制备及电转 | 第50-51页 |
| ·链霉菌原生质体的制备及DNA转化 | 第51页 |
| ·两亲本杂交介导的质粒DNA的跨属转移 | 第51-52页 |
| ·DNA-DNA地高辛杂交 | 第52-53页 |
| ·链霉菌的显微观察 | 第53页 |
| ·链霉菌RNA的抽提 | 第53-54页 |
| ·总RNA中DNA的去除 | 第54页 |
| ·RNA的定量以及质量检测 | 第54页 |
| ·低精度S1核酸酶作图 | 第54-55页 |
| ·链霉菌总蛋白的提取 | 第55页 |
| ·SDS-PAGE | 第55-56页 |
| ·Western杂交 | 第56-58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-112页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变载体的构建 | 第58-61页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·基于库斯质粒SC7C7的ftsK_(SC)缺失载体的构建 | 第58-60页 |
| ·ftsK_(SC)同框缺失载体的构建 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变菌株的构建 | 第61-65页 |
| ·ftsK_(SC)缺失菌株的构建及检测 | 第61页 |
| ·ftsK_(SC)同框缺失菌株的构建及检测 | 第61-62页 |
| ·ftsK_(SC)缺失菌株的表型观察 | 第62-63页 |
| ·SCO5751的缺失突变菌株并不具有遗传不稳定的表型 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变的互补检测 | 第65-68页 |
| ·低拷贝的互补载体的构建 | 第65页 |
| ·单拷贝整合型互补载体的构建 | 第65-67页 |
| ·互补能力的观察 | 第67-68页 |
| ·小结 | 第68页 |
| ·FtsK_(SC)蛋白三个主要结构域对其功能影响的初步检测 | 第68-76页 |
| ·生物信息学预测FtsK_(SC)蛋白的结构 | 第68-74页 |
| ·FtsK_(SC)蛋白的3个主要结构域的同框缺失载体的构建 | 第74-75页 |
| ·六个不同载体对WL11互补功能的鉴定 | 第75-76页 |
| ·小结 | 第76页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变菌株遗传不稳定的检测 | 第76-82页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变株孢子预萌发实验对后代异常菌落的作用检测 | 第76-77页 |
| ·ftsK_(SC)缺失突变株氯霉素敏感突变的检测 | 第77-78页 |
| ·精氨酸营养缺陷型突变的检测 | 第78-79页 |
| ·WL11中异常菌落的末端丢失的检测 | 第79-82页 |
| ·小结 | 第82页 |
| ·FtsK_(SC)-EGFP融合蛋白在链霉菌菌丝体内的定位的显微观察 | 第82-89页 |
| ·前言 | 第82页 |
| ·携带FtsK_(SC)-EGFP融合蛋白的载体的构建 | 第82-84页 |
| ·FtsK_(SC)-EGFP融合蛋白不影响FtsK_(SC)的活性 | 第84页 |
| ·FtsK_(SC)-EGFP融合蛋白体内定位的显微观察 | 第84-89页 |
| ·小结 | 第89页 |
| ·FtsK_(SC)的缺失对产孢晚期表达基因的影响机理初探 | 第89-100页 |
| ·前言 | 第89-90页 |
| ·报告基因插入载体的构建 | 第90-93页 |
| ·报告基因插入标记菌株的构建 | 第93-94页 |
| ·报告基因插入标记菌株的显微观察 | 第94-97页 |
| ·FtsK_(SC)蛋白对WL11/pIJ8635的功能互补能力的检测 | 第97-98页 |
| ·对报告基因插入标记菌株WL11/pIJ8635的进一步检测 | 第98-100页 |
| ·小结 | 第100页 |
| ·FtsK_(SC)的缺失突变对FtsZ_(SC)的影响 | 第100-101页 |
| ·前言 | 第100页 |
| ·FtsK_(SC)的缺失突变不影响FtsZ_(SC)-EGFP的细胞定位 | 第100-101页 |
| ·小结 | 第101页 |
| ·FtsK_(SC)蛋白与链霉菌中另一染色体分离蛋白ParAB的关系鉴定 | 第101-104页 |
| ·前言 | 第101-102页 |
| ·双突变株的构建 | 第102-103页 |
| ·双突变株的表型检测 | 第103-104页 |
| ·小结 | 第104页 |
| ·通过S1核酸酶作图分析ftsK_(SC)的转录起点的尝试 | 第104-108页 |
| ·前言 | 第104-106页 |
| ·保护性探针的准备 | 第106页 |
| ·低精度S1核酸酶作图分析ftsK_(SC)的转录起点 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| ·基因组中另一个ftsK同系物的鉴定 | 第108-112页 |
| ·前言 | 第108页 |
| ·SCO4508缺失突变载体的构建 | 第108-109页 |
| ·SCO4508缺失突变菌株的构建以及表型观察 | 第109-110页 |
| ·SCO4508的生物信息分析 | 第110-111页 |
| ·小结 | 第111-112页 |
| 4 总结与讨论 | 第112-117页 |
| ·总结 | 第112-113页 |
| ·讨论 | 第113-116页 |
| ·FtsK_(SC)的功能 | 第113-114页 |
| ·FtsK_(SC)的作用模型 | 第114-115页 |
| ·FtsK_(SC)与其它蛋白的相互作用 | 第115页 |
| ·FtsK_(SC)缺失突变株中的sigF表达抑制 | 第115-116页 |
| ·展望 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 附录 | 第128页 |
