| 摘要 | 第1-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第16-17页 |
| 1 文献综述 | 第17-46页 |
| ·猪基因组的研究现状 | 第18-19页 |
| ·基因分离的几种方法 | 第19-21页 |
| ·比较基因图谱在分离新基因中的应用 | 第19-20页 |
| ·表达序列标签(EST)在分离新基因中的应用 | 第20-21页 |
| ·候选基因分析法克隆基因 | 第21页 |
| ·动物基因功能的研究方法 | 第21-27页 |
| ·基于mRNA水平的基因表达研究方法 | 第22页 |
| ·测序技术与基因表达的研究 | 第22-23页 |
| ·PCR技术与基因表达的研究 | 第23页 |
| ·大规模杂交技术与基因表达的研究 | 第23-24页 |
| ·单核苷酸多态性 | 第24-25页 |
| ·基于突变体基础上的基因功能研究 | 第25-26页 |
| ·基于蛋白质水平上的基因功能研究 | 第26-27页 |
| ·猪生产性状相关基因研究进展 | 第27-28页 |
| ·猪骨骼肌生长发育相关基因研究进展 | 第28-34页 |
| ·骨骼肌的发生、发育基本过程 | 第28-30页 |
| ·影响骨骼肌肌形成和发育的调控因子 | 第30-34页 |
| ·肌发生过程中特异的bHLH转录因子 | 第31-32页 |
| ·成肌增强因子 | 第32-33页 |
| ·其它影响肌肉生长发育的因子 | 第33-34页 |
| ·BTG/TOB基因家族研究进展 | 第34-39页 |
| ·BTG/TOB家族成员的发现 | 第34页 |
| ·BTG/TOB家族的结构 | 第34-35页 |
| ·BTG/TOB家族蛋白的特异性降解 | 第35-36页 |
| ·BTG/TOB家族的生理功能 | 第36-38页 |
| ·与神经细胞的分化的关系 | 第36页 |
| ·BTG1与成肌细胞的关系 | 第36-37页 |
| ·抗增殖与肿瘤发生 | 第37-38页 |
| ·BTG/TOB家族与其它因子的相互作用 | 第38-39页 |
| ·BTG1与PRMT1的关系 | 第38页 |
| ·BTG/TOB家族与Wnt信号途径的关系 | 第38页 |
| ·BTG/TOB家族与pRB的关系 | 第38-39页 |
| ·高等动物启动子研究进展 | 第39-46页 |
| ·启动子的结构 | 第40-41页 |
| ·原核生物启动子的结构模型 | 第40页 |
| ·真核生物启动子的结构模型 | 第40-41页 |
| ·启动子的分类 | 第41-42页 |
| ·组成型启动子的功能和结构特征 | 第41页 |
| ·组织特异型启动子的功能和结构 | 第41页 |
| ·诱导型启动子的功能和结构 | 第41-42页 |
| ·启动子克隆的意义 | 第42页 |
| ·启动子克隆的方法 | 第42-44页 |
| ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第43页 |
| ·利用PCR技术克隆启动子 | 第43-44页 |
| ·启动子功能和结构研究的策略 | 第44-45页 |
| ·转染分析 | 第44页 |
| ·瞬间表达分析 | 第44-45页 |
| ·点突变分析 | 第45页 |
| ·启动子研究存在的问题和展望 | 第45-46页 |
| 2 研究目的与意义 | 第46-47页 |
| 3 材料与方法 | 第47-66页 |
| ·试验材料 | 第47-53页 |
| ·试验样品 | 第47-48页 |
| ·用于基因分离的DNA样品 | 第47页 |
| ·用于基因遗传变异检测的猪DNA样品 | 第47页 |
| ·用于标记-性状关联分析的DNA样品 | 第47页 |
| ·用于新基因染色体定位的DNA样品 | 第47-48页 |
| ·用于基因时空表达谱研究的组织样品 | 第48页 |
| ·菌株、载体、细胞和转染试剂盒 | 第48-50页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·载体 | 第48-49页 |
| ·用于表达的真核细胞 | 第49页 |
| ·真核细胞转染用试剂盒 | 第49-50页 |
| ·主要培养基 | 第50-51页 |
| ·大肠杆菌培养基 | 第50页 |
| ·哺乳动物细胞培养基及消化液 | 第50-51页 |
| ·主要仪器设备 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·主要试剂的配制 | 第52-53页 |
| ·主要分子生物学软件和网站 | 第53页 |
| ·主要分子生物学软件 | 第53页 |
| ·主要生物学网站和数据库 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-66页 |
| ·基因片段的的分离 | 第53-56页 |
| ·cDNA的电子克隆 | 第53-54页 |
| ·序列的同源性分析与鉴定 | 第54页 |
| ·引物设计 | 第54页 |
| ·PCR扩增条件 | 第54-56页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆与测序 | 第56-57页 |
| ·IMpRH辐射杂种板定位 | 第57-58页 |
| ·定位引物设计 | 第57页 |
| ·定位引物扩增及其分型方法与数据分析 | 第57-58页 |
| ·基因的表达与功能分析 | 第58-60页 |
| ·组织和细胞中总RNA提取 | 第58页 |
| ·总RNA完整性检测 | 第58-59页 |
| ·总RNA的DNase-I处理 | 第59页 |
| ·总RNA的反转录 | 第59页 |
| ·引物设计 | 第59-60页 |
| ·扩增反应条件 | 第60页 |
| ·数据分析 | 第60页 |
| ·猪基因的分型与关联分析 | 第60-61页 |
| ·PCR扩增反应 | 第60-61页 |
| ·酶切条件 | 第61页 |
| ·基因分型 | 第61页 |
| ·多态标记与性状的关联分析方法 | 第61页 |
| ·BTG1基因启动子片段的克隆、分析与荧光素酶报告基因表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·BTG1基因启动子片段的克隆 | 第62页 |
| ·启动子的转录因子结合位点预测 | 第62页 |
| ·荧光素酶报告基因表达载体的构建 | 第62-63页 |
| ·哺乳动物细胞培养、质粒转染与荧光测定 | 第63-66页 |
| ·复苏方法 | 第63-64页 |
| ·传代培养 | 第64页 |
| ·细胞诱导分化 | 第64页 |
| ·细胞冻存 | 第64-65页 |
| ·质粒转染 | 第65页 |
| ·双荧光素酶活性测定 | 第65-66页 |
| 4 结果 | 第66-99页 |
| ·基因片段的分离、序列分析与鉴定结果 | 第66-69页 |
| ·cDNA的电子克隆结果 | 第66页 |
| ·猪基因的cDNA及DNA扩增结果 | 第66-68页 |
| ·扩增产物的序列分析与鉴定结果 | 第68-69页 |
| ·猪基因的氨基酸序列分析结果 | 第69-75页 |
| ·BTG1基因的氨基酸序列分析 | 第69-71页 |
| ·BTG2基因的氨基酸序列分析 | 第71-72页 |
| ·BTG3基因的氨基酸序列分析 | 第72-74页 |
| ·三个基因的氨基酸序列比对结果 | 第74-75页 |
| ·基因在染色体上的定位 | 第75-78页 |
| ·基因的定位结果 | 第75-77页 |
| ·基因定位区域与对应染色体上的QTL | 第77-78页 |
| ·基因表达研究结果 | 第78-85页 |
| ·总RNA的甲醛变性胶电泳检测结果 | 第78-79页 |
| ·cDNA模板质量及引物扩增效果的检测 | 第79页 |
| ·猪BTG1,BTG2和BTG3基因的组织表达 | 第79-81页 |
| ·BTG1,BTG2和BTG3在通城和长白猪胚胎不同时期肌肉中的表达 | 第81-83页 |
| ·BTG1,BTG2和BTG3基因在C2C12细胞分化不同时期的表达 | 第83-85页 |
| ·C2C12细胞在分化不同时期的形态 | 第83-84页 |
| ·BTG1,BTG2和BTG3基因在C2C12细胞分化不同时期的表达 | 第84-85页 |
| ·新分离的基因SNP检测及多态分布 | 第85-94页 |
| ·BTG1基因的SNP检测与多态分布 | 第85-89页 |
| ·BTG1基因的SNP检测 | 第85-87页 |
| ·PCR-RFLP-PsuI多态性在各猪品种中的分布情况 | 第87-88页 |
| ·PCR-RFLP-Bsh1236I多态性在各猪品种中的分布情况 | 第88-89页 |
| ·BTG2基因SNP检测及多态分布 | 第89-92页 |
| ·BTG2基因的SNP检测 | 第89-90页 |
| ·PCR-RFLP-MvaI多态性在各猪品种中的分布情况 | 第90-92页 |
| ·BTG3基因多态分布 | 第92-94页 |
| ·BTG3基因的SNP检测 | 第92-93页 |
| ·PCR-RFLP-MvaI多态性在各猪品种中的分布情况 | 第93-94页 |
| ·不同基因多态性与性状的关联分析结果 | 第94-96页 |
| ·BTG1基因多态与性状关联 | 第94-95页 |
| ·BTG2基因多态与性状关联 | 第95页 |
| ·BTG3基因多态与性状关联 | 第95-96页 |
| ·BTG1基因启动子区的克隆与功能分析 | 第96-99页 |
| ·BTG1基因启动子区的克隆 | 第96-97页 |
| ·启动子区转录因子结合位点预测 | 第97页 |
| ·五个启动子删除片段的荧光报告基因载体的构建 | 第97-99页 |
| 5 讨论 | 第99-111页 |
| ·关于新基因的克隆 | 第99页 |
| ·关于基因MRNA表达分析的方法 | 第99-101页 |
| ·关于启动子的克隆 | 第101-104页 |
| ·关于基因的染色体定位 | 第104-105页 |
| ·关于猪TBG1/BTG2/BTG3基因的组织表达谱 | 第105页 |
| ·关于猪TBG1/BTG2/BTG3基因的时空表达谱 | 第105-107页 |
| ·关于TBG1/BTG2/BTG3基因对成肌细胞分化的作用 | 第107页 |
| ·关于BTG/TOB基因家族的结构和功能 | 第107-108页 |
| ·关于基因的SNP与性状关联分析 | 第108-111页 |
| ·关于SNP检测 | 第108-109页 |
| ·关于SNP与生产性状的关联 | 第109-111页 |
| 6 小结 | 第111-114页 |
| ·本研究的主要结果和结论 | 第111-112页 |
| ·本研究的特色和创新点 | 第112-113页 |
| ·本研究不足之处和进一步的工作 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-126页 |
| 在读期间发表或待发表的论文 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 附录 | 第129-133页 |
