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PCV2感染性克隆构建及ORF3蛋白功能研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 前言第11-35页
   ·PCV 的分类地位第11-12页
   ·PCV 一般特性第12页
   ·PCV 的细胞培养特性第12-13页
   ·流行病学特征第13-15页
     ·流行情况第13-14页
     ·致病性第14-15页
   ·PCV2 相关的疾病第15-17页
     ·断奶仔猪多系统衰竭综合征第15页
     ·猪皮炎与肾病综合征第15-16页
     ·猪先天性震颤第16页
     ·猪增生性和坏死性肺炎第16页
     ·猪呼吸道病复合征第16-17页
     ·繁殖障碍第17页
   ·猪圆环病毒的分子生物学特征第17-20页
     ·基因组结构第17-18页
     ·ORF1 的研究进展第18页
     ·ORF2 的研究进展第18-19页
     ·ORF3 的研究进展第19-20页
   ·复制动力学第20-21页
   ·PCV 结构蛋白组成与功能第21-23页
   ·PCV2 病原学诊断研究进展第23-27页
     ·免疫学诊断技术第23-25页
     ·分子生物学诊断技术第25-27页
   ·PCV2 致病机理第27-29页
     ·免疫抑制第28页
     ·其他病原对疾病发展的促进和诱导第28-29页
     ·PCV2 感染猪体内靶细胞的变化第29页
   ·PCV 感染性克隆的研究进展第29-30页
   ·细胞凋亡检测常用方法第30-33页
     ·细胞凋亡概念第30-31页
     ·细胞凋亡检测方法第31-33页
   ·本研究的目的及意义第33-35页
2 材料与方法第35-49页
   ·材料第35-38页
     ·病料第35页
     ·菌(细胞)株第35页
     ·试剂第35页
     ·仪器第35页
     ·引物设计与合成第35-37页
     ·溶液系统第37-38页
   ·PCV2-SD 株全基因组克隆测序与序列分析第38-42页
     ·病毒分离培养第38页
     ·病毒DNA 提取第38页
     ·病毒基因组克隆PCR 反应第38-39页
     ·电泳检测第39页
     ·目的核苷酸克隆测序第39-42页
   ·PCV2-SD 株感染性克隆的构建及改造第42-48页
     ·PCV2 双拷贝感染性克隆构建第42-44页
     ·ORF3 表达缺失双拷贝感染性克隆构建第44-46页
     ·重组质粒转染PK-15 细胞及IFA 检测第46-48页
   ·ORF3 蛋白对 PCV2-SD 株生物学性能的影响研究第48-49页
     ·感染性克隆拯救病毒增殖能力检测第48页
     ·细胞凋亡检测第48-49页
3 结果与分析第49-62页
   ·PCV2-SD 株全基因组克隆测序与序列分析结果第49-54页
     ·PCV2-SD 核酸片段扩增结果第49-50页
     ·PCR 产物的克隆与重组质粒的鉴定第50页
     ·PCV2-SD 序列分析第50-54页
   ·PCV2 双拷贝感染性克隆及突变克隆构建结果第54-57页
     ·PCR 扩增结果第54-56页
     ·重组质粒酶切鉴定结果第56-57页
     ·IFA 检测结果第57页
   ·ORF3 蛋白对 PCV2-SD 株生物学性能的影响研究第57-62页
     ·标准品制备及标准曲线绘制第57-59页
     ·PCV2 增殖能力检测第59-60页
     ·细胞凋亡作用检测第60-62页
4 讨论第62-66页
   ·PCV2-SD 株全基因组克隆测序与序列分析第62-64页
   ·PCV2-SD 株感染性克隆及突变克隆的构建第64-65页
   ·ORF3 蛋白对 PCV2-SD 株生物学性能的影响第65-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-75页
致谢第75-76页
硕士学位论文内容简介及自评第76页

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