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重金属汞单克隆抗体制备与免疫检测方法建立

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
第一部分 文献综述第11-33页
 第一章 重金属概述第12-21页
  1 重金属形态及分布特征第12-14页
   ·重金属在土壤中的形态及分布特征第12-13页
   ·重金属在水体中的形态及分布特征第13页
   ·重金属在农作物的形态及分布特征第13-14页
  2 重金属污染第14-16页
   ·重金属污染来源第14-16页
     ·土壤中的重金属污染来源第14-15页
     ·水体中重金属污染来源第15页
     ·大气中重金属污染来源第15-16页
  3 重金属污染的危害第16-19页
   ·重金属污染对人的危害第16-17页
   ·重金属污染对植物的危害第17-19页
  4 重金属污染的防治第19-21页
 第二章 重金属残留检测技术的研究第21-33页
  1 重金属样品的前处理方法第21页
  2 传统重金属残留检测方法第21-23页
  3 重金属免疫检测方法第23-32页
   ·小分子免疫检测技术基本原理第23-26页
     ·免疫学基本原理第23-25页
     ·小分子免疫检测的基本原理第25-26页
   ·重金属抗原及其特异性单抗的制备第26-28页
     ·重金属抗原的制备第26-27页
     ·重金属特异性抗体的制备第27-28页
   ·抗原分子中螯合剂的结构在抗体识别抗原中的作用第28-30页
     ·重金属抗原制备过程中螯合剂的选择第28页
     ·螯合剂一级化学结构对抗体亲合力的影响第28-29页
     ·金属离子-螯合剂复合物三维结构的差异对抗体识别能力的影响第29-30页
     ·金属离子-螯合剂复合物的价态对抗体识别抗原的影响第30页
   ·重金属免疫学检测技术第30-32页
     ·重金属间接竞争ELISA免疫检测法第30页
     ·重金属KinExA免疫检测方法第30-31页
     ·一步竞争性重金属免疫检测法第31页
     ·荧光偏振重金属免疫检测第31-32页
  4 研究重金属免疫检测技术的意义第32-33页
第二部分 研究内容第33-65页
 第一章 重金属汞单克隆抗体的制备及鉴定第33-52页
  1 材料与方法第35-42页
   ·试剂及主要仪器第35-37页
     ·主要试剂材料第35-36页
     ·主要仪器设备第36页
     ·主要溶液配制第36-37页
   ·重金属完全抗原的制备第37-38页
     ·免疫抗原的制备第37-38页
     ·包被抗原的制备第38页
   ·动物免疫第38-39页
   ·抗汞单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立第39-42页
     ·Sp2/0骨髓瘤细胞的复苏第39页
     ·免疫脾细胞的制备第39页
     ·细胞融合第39页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第39-40页
     ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第40页
     ·杂交瘤细胞的冻存与复苏第40-41页
       ·杂交瘤细胞的冻存第41页
       ·杂交瘤细胞的复苏第41页
     ·单克隆抗体的大量制备第41页
       ·体外培养法第41页
       ·小鼠腹水的制备第41页
     ·单克隆抗体的纯化(PEG沉淀法)第41-42页
   ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第42-44页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第42页
     ·单克隆抗体类型及亚类鉴定第42-43页
     ·单克隆抗体对汞的亲和性第43页
     ·单克隆抗体的灵敏度第43页
     ·单克隆抗体特异性分析第43页
     ·单克隆抗体稳定性观察第43-44页
  2 结果与分析第44-47页
   ·小鼠血清效价测定第44页
   ·杂交瘤细胞株建立第44页
   ·杂交瘤细胞株的冻存及复苏第44页
   ·单克隆抗体的大量制备第44-45页
   ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第45-47页
     ·杂交瘤细胞染色体分析第45页
     ·单克隆抗体类型及亚类鉴定第45页
     ·单克隆抗体对汞的亲和性第45-46页
     ·单克隆抗体的灵敏度第46页
     ·单克隆抗体特异性分析第46-47页
     ·单克隆抗体稳定性观察第47页
  3 讨论第47-52页
   ·重金属汞免疫抗原的制备第47-48页
   ·单克隆抗体制备过程中的几个重要环节第48-49页
   ·杂交瘤技术第49-50页
   ·重金属抗体的间接竞争ELISA第50页
   ·单克隆抗体的大量制备第50-52页
 第二章 重金属汞的间接竞争ELISA检测技术研究第52-65页
  1 材料和方法第53-55页
   ·材料、试剂及主要仪器第53页
   ·螯合剂及其浓度的选择第53-54页
   ·间接竞争ELISA最佳工作条件的确定第54页
     ·抗原抗体工作浓度的确定第54页
     ·盐离子强度的影响第54页
     ·不同封闭物的影响第54页
     ·PH值的影响第54页
   ·标准曲线的建立及添加回收试验第54-55页
     ·标准曲线的建立第54页
     ·添加回收试验第54-55页
   ·与传统检测方法的比较第55页
  2 结果与分析第55-62页
   ·螯合剂及其浓度的选择第55-56页
   ·间接竞争ELISA最佳工作条件的确定第56-58页
     ·抗原抗体工作浓度的确定第56页
     ·盐离子强度对竞争ELISA检测结果的影响第56-57页
     ·不同封闭物对竞争ELISA检测结果的影响第57页
     ·不同PH值对竞争ELISA检测结果的影响第57-58页
   ·标准曲线的建立及添加回收试验第58-61页
     ·ELISA标准方程的建立第58-59页
     ·精确度分析第59-60页
     ·准确度分析第60-61页
   ·与传统方法比较第61-62页
  3 讨论第62-65页
   ·关于对作为研究目标抗体的筛选第62页
     ·杂交瘤细胞株的选择第62页
     ·抗体特性分析第62页
   ·关于以杂交瘤细胞培养上清液建立检测体系第62-63页
   ·关于间接竞争ELISA最佳工作条件的确定第63页
   ·关于标准曲线的实用性第63页
   ·关于检测样品的前处理第63-64页
   ·免疫检测方法与传统检测方法第64-65页
参考文献第65-76页
附录第76-77页
致谢第77页

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