| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| １前言 | 第12-20页 |
| ·植物淀粉合成及其主要酶类 | 第12-14页 |
| ·淀粉的磷酸化及其功能 | 第14-15页 |
| ·淀粉磷酸化的酶学机制 | 第15-17页 |
| ·禾谷类作物中的淀粉磷酸化酶 | 第17-19页 |
| ·本研究的目的 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·质粒与细菌菌株 | 第20-21页 |
| ·PCR 引物 | 第21页 |
| ·化学试剂 | 第21页 |
| ·序列获取及基因结构分析 | 第21-22页 |
| ·水稻总DNA 和总RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·微量总DNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·大量总DNA 的提取 | 第23页 |
| ·总RNA 的提取 | 第23页 |
| ·编码区部分序列的克隆 | 第23-24页 |
| ·PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物的克隆与序列测定 | 第24页 |
| ·OsPho-L 基因启动子的克隆 | 第24-25页 |
| ·含OsPho-L 基因BAC 克隆的筛选 | 第24-25页 |
| ·OsPho-L 基因启动子序列的PCR 扩增 | 第25页 |
| ·PCR 产物的克隆与测序分析 | 第25页 |
| ·微卫星分子标记设计与检测 | 第25-26页 |
| ·微卫星分子标记的设计 | 第25-26页 |
| ·微卫星分子标记的检测 | 第26页 |
| ·地高辛标记DNA 探针的制备 | 第26-27页 |
| ·Southern 杂交分析 | 第27页 |
| ·Northern 杂交分析 | 第27页 |
| ·Real-Time RT-PCR 分析 | 第27-28页 |
| ·参照基因与引物 | 第27-28页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第28页 |
| ·Real-Time PCR 分析 | 第28页 |
| ·OsPho-L 基因启动子系列缺失与GUS 融合表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·OsPho-L 基因RNA 干扰载体的构建 | 第29-31页 |
| ·根癌农杆菌介导培育转基因水稻 | 第31-32页 |
| ·水稻的组织培养 | 第31页 |
| ·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻转化 | 第31页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第31-32页 |
| ·转基因水稻植株中GUS 活性的分析 | 第32-33页 |
| ·GUS 组织化学染色分析 | 第32-33页 |
| ·GUS 活性的定量测定 | 第33页 |
| ·水稻成熟种子理化品质性状的测定 | 第33-34页 |
| ·样品前处理 | 第33页 |
| ·直链淀粉含量的测定 | 第33-34页 |
| ·胶稠度的测定 | 第34页 |
| ·水稻成熟种子淀粉粘滞性谱（RVA）的测定 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-62页 |
| ·水稻淀粉磷酸化酶基因的结构与编码序列 | 第35-38页 |
| ·OsPho-L 和OsPho-H 基因的结构 | 第35-36页 |
| ·OsPho-L 和OsPho-H 氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
| ·OsPho-L 和OsPho-H 基因部分序列的PCR 克隆与序列分析 | 第37-38页 |
| ·不同水稻品种间淀粉磷酸化酶基因的等位性变异分析 | 第38-42页 |
| ·RFLP 分析 | 第38-40页 |
| ·OsPho-L 基因5’上游调控区一个微卫星多态性的分析 | 第40-42页 |
| ·水稻淀粉磷酸化酶基因的表达特性 | 第42-46页 |
| ·OsPho-L 基因的表达特性 | 第42-43页 |
| ·OsPho-H 基因的表达特性 | 第43页 |
| ·不同水稻品种胚乳中OsPho-L 和OsPho-H 基因表达的差异 | 第43-46页 |
| ·缺失分支酶基因表达水稻品种中OsPho-L 基因的表达 | 第46页 |
| ·OsPho-L 基因启动子控制的GUS 融合基因的表达特性 | 第46-54页 |
| ·不同长度OsPho-L 基因启动子与GUS 融合表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·转GUS 融合基因水稻植株的获得 | 第47-48页 |
| ·转基因水稻植株的分子鉴定 | 第48-50页 |
| ·不同GUS 嵌合基因在转基因水稻植株中的表达 | 第50-53页 |
| ·种子萌发过程中GUS 融合基因的表达特性 | 第53-54页 |
| ·RNA 干扰OsPho-L 基因表达对稻米品质的影响 | 第54-62页 |
| ·RNA 干扰载体的构建与鉴定 | 第54-55页 |
| ·转基因水稻植株的获得 | 第55页 |
| ·转基因水稻植株的分子鉴定 | 第55-57页 |
| ·转基因水稻植株中OsPho-L 基因的表达 | 第57-58页 |
| ·RNA 干扰转基因水稻成熟种子中淀粉的品质表现 | 第58-62页 |
| 4、小结与讨论 | 第62-67页 |
| ·研究小结 | 第62-63页 |
| ·水稻淀粉磷酸化酶基因的结构特点 | 第63页 |
| ·水稻淀粉磷酸化酶基因的表达特点 | 第63-65页 |
| ·水稻淀粉磷酸化酶基因的功能 | 第65-66页 |
| ·研究展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
